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ViewRNA ISH 检测 |
Invitrogen ViewRNA ISH 细胞和组织检测结合了分支 DNA (bDNA) 扩增技术,以单分子灵敏度可视化 RNA。bDNA 使用专有的探针对设计和信号扩增技术,为 RNA 定位提供独特、稳健且灵敏的原位杂交检测。
目前可提供具有更高灵敏度和清晰度的基于 Fast Red 和 DAB 的 ViewRNA 组织染色试剂盒。
用下表查找适合您研究需求的 ViewRNA ISH 检测。
ISH 细胞检测 | ISH 细胞+ 检测 | ISH 组织比色检测 | ISH 组织荧光检测 | |
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用途 |
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差异 | 针对培养细胞或循环肿瘤细胞 (CTC) 进行了优化 | 与通过免疫细胞化学技术进行的多重 mRNA 检测(免疫染色)兼容 | 针对固定组织切片进行了优化。 使用比色可视化方法通过免疫组织化学技术进行多重 mRNA 检测。 可同时检测多达 3 个 RNA 靶标。 | 针对固定组织切片进行了优化。 使用荧光成像方法通过免疫组织化学技术进行多重 mRNA 检测。 可同时检测多达 4 个 RNA 靶标。 |
样品类型 | 经过优化,可用于培养细胞的 mRNA 检测 | 经过优化,可用于以下标本:
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兼容的样品类型 |
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不兼容 | 不兼容 ICC/IHC | 不兼容 384 孔板 | 未经过 ICC/IHC 验证 | |
参数数量和检测通道选项 | 1 至 4 种 RNA
| 1 至 4 种 RNA 和一个或多个蛋白质靶标,或 RNA 和蛋白质的任何组合,前提是使用不同的荧光检测通道
| 比色:多达 3 个靶点 固红和固蓝底物也分别与传统 TRITC/RFP 和 CY5.5/CY7 滤光片组兼容,可进行荧光检测。 | 多达 4 靶点
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所需仪器 |
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ViewRNA 检测需要使用探针对,必须单独购买。每个探针对类型都特定于检测标记和明场/荧光读数。对于多重检测实验,每份样品必须避免使用一个以上相同的探针集类型。请使用下表确定您的实验需要哪种探针对类型。
探针对 | 靶标 RNA 表达水平 | 检测标记 | 荧光读数 |
---|---|---|---|
1 | 低 | Alexa Fluor 546 | TRITC/RFP |
4 | 中 | Alexa Fluor 488 | FITC/GFP |
6 | 低 | Alexa Fluor 647 | 深红色/Cy5 |
10 | 丰富 | Alexa Fluor 750 | 近红外/Cy7 |
探针对 | 靶标 RNA 表达水平 | 检测标记 | 比色读数 | 荧光读数 |
---|---|---|---|---|
1 | 低 | 固红 | 红色 | TRITC/RFP |
4 | 低 | DAB | 棕色 | 不适用 |
6 | 低 | 固蓝 | 蓝色 | Cy5.5 或 Cy7 |
探针对 | 靶标 RNA 表达水平 | 检测标记 | 荧光通道 |
---|---|---|---|
1 | 低 | Alexa Fluor 594 | Texas Red |
1 | 低 | Alexa Fluor 546 | TRITC/RFP |
4 | 中 | Alexa Fluor 488 | FITC/GFP |
6 | 低 | Alexa Fluor 647 | 深红色/Cy5 |
10 | 丰富 | Alexa Fluor 750 | 近红外/Cy7 |
探针对 | 靶标 RNA 表达水平 | 检测标记 | 荧光读数 |
---|---|---|---|
1 | 低 | Alexa Fluor 546 | TRITC/RFP |
4 | 中 | Alexa Fluor 488 | FITC/GFP |
6 | 低 | Alexa Fluor 647 | 深红色/Cy5 |
10 | 丰富 | Alexa Fluor 750 | 近红外/Cy7 |
探针对 | 靶标 RNA 表达水平 | 检测标记 | 比色读数 | 荧光读数 |
---|---|---|---|---|
1 | 低 | 固红 | 红色 | TRITC/RFP |
4 | 低 | DAB | 棕色 | 不适用 |
6 | 低 | 固蓝 | 蓝色 | Cy5.5 或 Cy7 |
探针对 | 靶标 RNA 表达水平 | 检测标记 | 荧光通道 |
---|---|---|---|
1 | 低 | Alexa Fluor 594 | Texas Red |
1 | 低 | Alexa Fluor 546 | TRITC/RFP |
4 | 中 | Alexa Fluor 488 | FITC/GFP |
6 | 低 | Alexa Fluor 647 | 深红色/Cy5 |
10 | 丰富 | Alexa Fluor 750 | 近红外/Cy7 |
图 1A.ViewRNA ISH 检测。基于分支 DNA 信号扩增技术的 ViewRNA ISH 组织检测可用于同时测量 3 个靶标,并具有在单细胞中测定单个 mRNA 分子的灵敏度和耐用性。
图 1B.ViewRNA FISH 检测。基于分支 DNA 信号扩增技术的 ViewRNA 荧光检测可用于同时测量 4 个靶标,并具有在单细胞中测定单个 mRNA 分子的灵敏度和耐用性。
ViewRNA ISH Cell 和 Cell Plus 可实现:
试剂盒 | 探针对类型 | 货号 | 规格 |
---|---|---|---|
ViewRNA ISH 细胞检测试剂盒 | 1,4,6 | QVC0001 | 24 次检测 |
ViewRNA 细胞+ 检测试剂盒 | 1,4,6 | 88-19000-99 | 24 次检测 |
ViewRNA ISH 细胞 750 模块 | 10 | QVC0200 | 24 次检测 |
没有找到您所需的内容?如果在我们的网页目录中找不到您的感兴趣靶基因,请使用定制工具订购适用于 PrimeFlow、QuantiGene Singleplex 和 ViewRNA 细胞和组织检测的自定义分支 DNA 探针对。
阳性对照:对于 ViewRNA 细胞检测,管家基因(如 ACTB、GAPD、PPIB 或 UBC 探针对)通常用作阳性对照。对于 micro-RNA 实验,Let7a 探针对适用于许多样品。
阴性对照:应在每项实验中使用阴性对照,以帮助确保正确评估特异性与非特异性结合。强烈建议使用省略靶标特异性探针的样品,或者用针对目标细胞中未表达的靶标的探针标记的样品。
采用相应物种的探针搜索工具,搜索用于阳性和阴性对照的探针。请注意 ViewRNA 探针具有极高的特异性,一个物种的探针对通常不能检测其他物种的靶标。
ViewRNA ISH 组织检测可实现:
试剂盒 | 探针对类型 | 货号 | 规格 |
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ViewRNA 组织检测核心试剂盒 | 1,4,6 | QVT0400 | 24 张玻片 |
ViewRNA 组织检测固红模块 | 1 | QVT0410 | 24 张玻片 |
ViewRNA 组织检测固蓝模块 | 6 | QVT0420 | 24 张玻片 |
ViewRNA 组织检测 DAB 模块 | 4 | QVT0430 | 24 张玻片 |
为了增加 RNA 多重检测能力,ViewRNA 组织检测核心试剂盒可与 ViewRNA 组织检测模块结合使用 | |||
ViewRNA 固红单通路检测试剂盒 | 1,6 | QVT0410C | 24 张玻片 |
QVT4410C | 96 次检测 | ||
ViewRNA 固蓝单通路检测试剂盒 | 1,6 | QVT0420C | 24 张玻片 |
QVT4420C | 96 次检测 | ||
ViewRNA DAB 单通路检测试剂盒 | 4 | QVT0430C | 24 张玻片 |
QVT4430C | 96 次检测 | ||
ViewRNA 红色‑蓝色 2 通路检测试剂盒 | 1,6 | QVT0412C | 24 张玻片 |
QVT4412C | 96 次检测 | ||
ViewRNA 红色‑棕色 2 通路检测试剂盒 | 1,4,6 | QVT0422C | 24 张玻片 |
QVT4422C | 96 次检测 | ||
ViewRNA 蓝色‑棕色 2 通路检测试剂盒 | 1,4,6 | QVT0433C | 24 张玻片 |
QVT4433C | 96 次检测 |
试剂盒 | 探针对类型 | 货号 | 规格 |
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ViewRNA 组织荧光 4 通路检测核心试剂盒,含(Alexa Fluor 488,Alexa Fluor 546,Alexa Fluor 647,Alexa Fluor 750) | 1,4,6,10 | QVT0700 | 24 张玻片 |
QVT4700 | 96 张玻片 | ||
ViewRNA 组织荧光 4 通路检测核心试剂盒,含(Alexa Fluor 488,Alexa Fluor 594,Alexa Fluor 647,Alexa Fluor 750) | 1,4,6,10 | QVT0800 | 24 张玻片 |
QVT4800 | 96 张玻片 | ||
ViewRNA 组织荧光单通路检测核心试剂盒,含 Alexa Fluor 647(6 型)标记探针 | 6 | QVT0600C | 24 张玻片 |
QVT4600C | 96 张玻片 | ||
为了增加 RNA 多重检测能力,ViewRNA 组织荧光检测模块可与 ViewRNA 组织荧光单通路检测核心试剂盒和 Alexa Fluor 647(6 型)标记探针试剂盒结合使用 | |||
ViewRNA 组织 Alexa Fluor 488 (4型) 模块 | 4 | QVT0688B | 24 张玻片 |
QVT4688B | 96 张玻片 | ||
ViewRNA 组织 Alexa Fluor 546(1 型)模块 | 1 | QVT0646B | 24 张玻片 |
QVT4646B | 96 张玻片 | ||
ViewRNA 组织 Alexa Fluor 594(1 型)模块 | 1 | QVT0694B | 24 张玻片 |
QVT4694B | 96 张玻片 | ||
ViewRNA 组织 Alexa Fluor 750(10 型)模块 | 10 | QVT0640B | 24 张玻片 |
QVT4640B | 96 张玻片 | ||
选择 ViewRNA 组织 Alexa Fluor 546(1 型)模块或 ViewRNA 组织 Alexa Fluor 594(1 型)模块。这两种都使用 1 型探针,彼此不兼容。 |
对于比色检测试剂盒,请在下面的搜索工具中使用“ViewRNA 细胞”过滤器查找探针对。
没有找到您所需的内容?如果在我们的网页目录中找不到您的感兴趣靶基因,请使用自定义订购工具订购适用于 PrimeFlow、QuantiGene Singleplex 和 ViewRNA 细胞和组织检测的自定义分支 DNA 探针对。
应在每项实验中使用阳性对照探针对以确保正确的性能。对于 ViewRNA 组织检测,可采用以下试剂盒之一作为阳性对照:
ViewRNA 组织阳性对照试剂盒(2 通路)(4 个大鼠肾脏载玻片 + 探针)
ViewRNA 组织阳性对照试剂盒(单通路)(4 个大鼠肾脏载玻片 + 探针)
应在每项实验中使用阴性对照,以帮助确保正确评估特异性与非特异性结合。强烈建议使用省略靶标特异性探针的样品,或者用针对目标细胞中未表达的靶标的探针标记的样品。
采用相应物种的探针搜索工具,搜索用于阳性和阴性对照的探针。请注意 ViewRNA 探针具有极高的特异性,一个物种的探针对通常不能检测其他物种的靶标。
图1.采用 ViewRNA ISH 细胞检测鉴别人骨髓中的乳腺癌循环肿瘤细胞 (CTC)。使用 ViewRNA ISH 细胞检测(用于 ERBB2 [绿色]、泛角蛋白系列 [细胞角蛋白 8、18 和 19][黄色] 和 BACTEC [紫色])固定和分析来自骨髓样品的推定乳腺癌肿瘤细胞。该技术只用于鉴别玻片上的两种此类 CTC。数据承蒙挪威奥斯陆的 Radium 医院提供。
HeLa
SKBR3
图2.使用 ViewRNA ISH 细胞检测对细胞系中转录本异质性进行可视化和定量。HeLa 细胞和 SKBR3 细胞中 Her2 mRNA(绿色)和对照 18S rRNA(红色)的多重分析。细胞核用 DAPI(蓝色)染色,并通过荧光显微镜观察。
图3.使用 ViewRNA ISH 细胞检测在单细胞水平上观察细胞因子诱导后的基因表达时程。用 PMA 处理 HeLa 细胞 0-8 小时。然后用 ViewRNA ISH 细胞检测固定和分析细胞,可视化诱导的 IL-6(红色)和 IL-8 表达(绿色)。细胞核使用 DAPI(蓝色)染色。结果显示,IL-6 在 1-2 小时后出现诱导后峰,IL-8 在 4 小时后出现诱导后峰。此外,该检测揭示了单个细胞反应的异质性。
图4.使用 ViewRNA ISH 细胞检测对细胞中的 H1N1 甲型流感病毒 RNA 迁移进行检测。病毒 RNA 核易位是流感病毒复制所必需的步骤。将小鼠胚胎成纤维细胞 (MEF) 与甲型流感病毒(H1N1,PR8 毒株)一同在冰上孵育。在时间零点,移除病毒,并添加培养基(加热到 37°C)。在加热后的指定时间点,使用 ViewRNA ISH 细胞检测试剂盒和针对核蛋白 (NP) 病毒基因组片段的探针对(绿色)固定和处理细胞。细胞核用 DAPI 染为蓝色。感染后 90 min 即可看到 NP 基因组的时间依赖性核转位,180 min 还观察到将新合成的病毒基因组从细胞核导出到细胞溶质。数据承蒙麻省理工学院和哈佛大学 MGH 研究所 Abraham L Brass 博士提供。
图 5.Huh7 细胞中病毒 RNA 和 mRNA 多重检测。对不含 (–HCV) 或含 (+HCV) 丙型肝炎病毒 (HCV) 复制子的 Huh7 细胞中的 HCV 基因组病毒 RNA(绿色)和 18S rRNA(红色)进行多重荧光原位检测。细胞核使用 DAPI(蓝色)染色。
图 6.使用 ViewRNA 细胞检测对各种表达水平的 miRNA 和 mRNA 进行多重分析。同时检测任何给定细胞中的 miRNA(固红底物,Cy3/550 通道)和 mRNA(FITC 通道或 Cy7 通道)表达。双通路检测,显示 HeLa 细胞中不同 miRNA 和 mRNA 靶标的表达。在 FITC 通道中检测到 HPRT、ACTB 和 PPIB,在 Cy7 通道中检测到 GAPD。基于已知的表达水平,数据确认了对各种表达水平的 miRNA 和 mRNA 的准确、精确的研究和可视化,其中一个不同的斑点对应于 miRNA 或 mRNA 靶标的一个分子。
化合物剂量-反应分析
图7.使用高内涵筛选 ViewRNA 细胞检测,对培养细胞的诱导进行可视化和定量。HeLa 细胞在 384 孔透明底板中培养,并用各种浓度的 PMA 处理。经过 4 小时 PMA 处理后,固定细胞并分析 IL-8 表达(绿色)。细胞核使用 DAPI(蓝色)染色。
使用多个标记物进行化合物筛选
图8.使用高内涵筛选 ViewRNA 细胞检测对化合物筛选进行多重分析。图片分别显示了细胞核和 RNA 靶标:gene 1,gene 2 和 gene 3。合并后的图像显示同时检测三个 RNA 靶标。细胞核使用 DAPI(蓝色)染色。数据承蒙 Proteostasis, Inc. 的 Dan Garza 博士提供
我们的高内涵筛选 (HCS) 平台(也叫做高内涵分析 (HCA) 或高内涵成像平台),旨在提供出色的单细胞分析功能和最短的数据采集时间。
Invitrogen PrimeFlow RNA 检测扩展了流式细胞术测定 RNA 的能力。其采用结合荧光染料的抗体,将PrimeFlow与细胞表面和细胞内蛋白免疫标记结合在一起。
Invitrogen QuantiGene 检测为单基因或多重基因表达定量提供了一种准确和精确的方法。无需纯化和扩增 RNA,可直接从细胞或组织裂解物中测量多达 80 个基因靶标。
仅供科研使用,不可用于诊断目的。