RNAi 转染方案

我们提供十分完整的转染试剂产品系列，在传统或难以转染的细胞系中拥有 DNA、siRNA、Stealth™ RNAi 和 Invitrogen BLOCK-iT RNAi 载体递送的出色性能。计划 RNAi 实验时，请参阅 RNAi 成功的七个步骤。

通用转染方案

• 使用 Lipofectamine RNAiMAX 将 Stealth RNA 或 siRNA 递送至哺乳动物细胞
• 使用 Lipofectamine 2000 将质粒 DNA 和合成 RNAi 递送至哺乳动物细胞
• 使用 Lipofectamine 2000 在 96 孔板中进行 Stealth RNAi 或 siRNA 反向转染
   

用于 Stealth RNAi 和 siRNA 的细胞类型特异性转染方案

客户还发现，Lipofectamine RNAiMAX 转染试剂在其他细胞类型中效果良好。

Stealth RNAi 和 siRNA 转染浓度
Stealth RNAi 或 siRNA 二聚体的转染浓度通过除以最终转染体积（即，起始培养基体积 + 转染混合物体积）所用的 siRNA 摩尔数进行确定。使用 24 孔板，我们通常将 100uL 转染混合物中的 0.5-5 pmol siRNA 转染到每个孔内的 500uL 培养基中，获得 1 至 10 nM 的最终浓度。Stealth RNAi 或 siRNA 的分析证书具有制作 20µM 储液的说明。如果要一式三份地转染，则通过将 0.1–1 uL 的 20 µM 储液添加至 399 µL 的 Gibco Opti-MEM 中来制作 400µL 的 5x 转染混合物。然后向每个孔中加入 100µL 此转染混合物。20µM Stealth RNAi 或 siRNA = 20pmol/µL。

细胞系数据库
我们的细胞系数据库中提供多种免费细胞系专用转染方案。该数据库旨在帮助研究人员轻松查找与我们产品的使用和感兴趣细胞系相关的参考资料。此数据库并非详尽无遗，但却是我们技术服务团队努力收集的数据。

共转染载体和 siRNA：
进行质粒和 siRNA 共转染时，应使用适合质粒转染的转染条件。siRNA 成分通常会添加忽略不计的核酸质量，因此可忽略。在细胞系数据库中，查找更多有关细胞系转染条件的信息和参考文献。

转染实验故障排除
我们创建了一个通用表格，以帮助对使用阳离子脂质体进行转染的故障排除。此外，我们还编制了一份有关转染的常见问题列表。