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我们提供一系列磁珠和树脂等纯化产品,用于从大肠杆菌、酵母、昆虫或哺乳动物表达系统中纯化重组蛋白。这些磁珠和树脂具有mg级蛋白结合能力,提供多种规格选择,可满足广泛的实验需求,包括高通量筛选、批量处理、中试和工艺纯化等。
6xHis标签记蛋白的高得率、高纯度、中等规模纯化。采用200 mL含有HisPur Ni-NTA Superflow琼脂糖或Qiagen™ Ni-NTA Superflow 的层析柱在3小时内纯化超过4 g过量表达的6xHis-GFP。以20 mL/min的速率,上样1 Ll裂解液,再然后采用含有30 mM 咪唑异吡唑的洗涤缓冲液洗涤至基线澄清。然后采用含有300 mM 咪唑异吡唑的洗涤缓冲液洗脱结合的蛋白质。富集含有纯化的6xHis-GFP 的组分,采用Pierce 660 nm 蛋白定量(货号22662)法进行定量。通过分离SDS-PAGE 上样、流穿通、洗涤和洗脱的组分用SDS-PAGE分离,采用Imperial 蛋白染色剂(货号24615)染色,然后采用myImage分析软件(货号62237)测定纯度。
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Thermo Scientific Pierce谷胱甘肽琼脂糖可实现极高的GST融合蛋白得率和纯度。采用来自于不同供应商的50 µL GSH树脂孵育培养含有过量表达GST的大肠杆菌裂解物(14.4 mg总蛋白),然后分别依照制造商的说明进行纯化。采用Thermo Scientific™ Coomassie Plus考马斯亮蓝蛋白质定量分析测定方法定量树脂中洗脱出的GST(得率)。通过测定染色凝胶电泳道图的光密度,评估蛋白纯度。M= 分子量标准品志物;L=上样裂解物彩照; FT=流穿通;E=洗脱。
为您演示如何使用这个灵敏、宽范围的内毒素定量试剂盒来测量0.01 - 1 EU/mL水平的内毒素污染。
仅供科研使用,不可用于诊断目的。