Smart Deep™ 碱基识别软件 (SDB) 采用创新的碱基识别算法,可帮助您改进Sanger测序结果并减少人工审查时间。Smart Deep™ 碱基识别软件可用于测序分析软件SeqA 8。

Two electropherograms with basecalls and quality value bars, one for KB Basecaller and one for SDB Basecaller

图 1. KB 与 SDB 碱基识别软件在染料峰峰图区域的碱基识别结果对比


与 KB 碱基识别软件相比,Smart Deep™ 碱基识别软件具有以下优势:

  • 更长读长——在 5’ 和 3’ 端高质量识别更多碱基提高纯碱基和混合碱基识别的准确性
  • 更强大的碱基识别——轻松应对染料峰峰图、N-1 峰和迁移率变动等测序假象以及GC 富集模板等复杂序列,提高碱基识别的准确性
  • 新功能——强大的碱基识别确定杂合插入/缺失 (het indel) 变异
  • 减少人工审查时间——减少编辑和假阳性
  • 增强视图跟踪可视化选项,为质粒(纯碱基)序列的3’端提供清晰的基线和更高的分辨率

注意:SDB 碱基识别可用于 SeqStudio FlexSeqStudio, 37303500系列基因分析仪获得的数据。

自动化命令碱基识别功能可用于批处理。在与 3730 系列基因分析仪一起使用时,作为仪器运行的一环,Smart Deep™ 碱基识别软件可进行自动碱基识别。


更长读长,更高通量
 

通过生成更准确的碱基识别结果,Smart Deep™ 碱基识别软件在经过先进的算法可以产生更长的读长。如下所示,对于使用 SeqStudio™ Flex、3730、SeqStudio™ 和3500 基因分析仪获得的数据集,读长的增幅为 9-16%。SDB 的先进算法提高了 5’ 和 3’ 端碱基识别的准确性,从而优化了每次读取的碱基数量。

Bar graph showing Q20 CRL read lengths for SeqStudio Flex StdSeq, 3500 StdSeq, 3730 XLRSeq, 3730 LongRead Seq, and SeqStudio LongSeq

图 2. KB 与 SDB 碱基识别软件的读长对比图。QV20 CRL(质量值QV 20 连续序列读长)


更强的稳健性
 

通过如染料峰峰图、N-1 峰和迁移率变动以及 高GC复杂模板,Smart Deep™ 碱基识别软件强大的碱基识别功能轻松应对。

 

最小 QV (QV 1) 矫正

QV 20 矫正

Trimming

QV 30 矫正

Trimming

 碱基识别软件

KB

SDB

KB

SDB

KB

SDB

 混合碱基参考位置

185

185

182

185

173

183

 混合碱基识别位置

749

211

441

202

307

192

 正确的混合碱基识别

166

185

163

185

158

183

 假阴性

19

(10.3%)

0

(0.0%)

19

(10.4%)

0

(0.0%)

15

(8.7%)

0

(0.0%)

 假阳性

583

(74.7%)

26

(11.5%)

278

(54.1%)

17

(8.0%)

149

(28.6%)

9

(1.4%)

 插入/缺失错误

0

0

0

0

0

0

 假阴性减少

100%

100%

100%

 假阳性减少

95.5%

93.9%

94.0%

Smart Deep™ 碱基识别软件的结果基于包含染料峰峰图、N-1 峰和迁移率变动等164 个 SeqStudio™ 样本,与 KB 碱基识别软件获得的结果相比,假阴性减少 100%,假阳性减少 94%。

Smart Deep™ 碱基识别软件的先进算法还具有新功能,能够识别确定杂合插入/缺失 (het indel)

Het_indel


图 3. KB 与 SDB 碱基识别软件在杂合插入缺失区域的碱基识别结果对比。在上面的例子中,Smart DeepTM 碱基识别软件能够通过高质量值在 het indel 区域中正确地进行碱基识别,与 KB 碱基识别软件相比更胜一筹。


通过增强视图提高 3’ 端分辨率
 

Smart DeepTM 碱基识别软件的增强视图选项通过利用生成的高质量碱基识别结果,为质粒测序数据的 3’ 端提供更高的分辨率。从而提高了结果的清晰度和可靠性。

SDB Enhanced View electropherogram and KB view electropherogram

图 4. SDB增强视图


减少编辑=缩短人工审核时间
 

Smart DeepTM 碱基识别软件有助于减少低质量碱基识别和假阳性结果,因此能够缩短人工审查时间,从而简化了Sanger 测序数据的审查,让您留出了更多时间从事其他专业工作。

A line graph showing the number of sequence edits needed using KB and SDB Basecallers

图 5. 需要的编辑次数


仪器要求
 

使用 Applied BiosystemsTM SeqStudio FlexTM、SeqStudioTM、3500 和 3730 基因分析仪获得的数据可通过 Smart DeepTM 碱基识别软件进行碱基识别。

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Style Sheet for Global Design System

仅供科研使用,不可用于诊断目的。