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胚胎干细胞来源于囊胚的内细胞团,可应用于有关生物功能的各种不同研究。Gibco 胚胎干 (ES) 细胞专用合格胎牛血清 (FBS) 采用了行业领先的鉴定测定,其中包括先进的仪器、细胞培养和测定设计。我们的干细胞研发和质量团队开发了改进的测定,以确认我们的 FBS 能够实现高接种效率并保持 ES 细胞的多能性。该新方法通过定量分析多能性标志物表达集落并结合形态学评估来评定 FBS 支持 mESC 铺板、多能性和增殖的能力。
在进行干细胞研究时,研究人员需要能够支持其测试方法的细胞。为了检测表达和其他特性,至关重要的一点是维持干细胞分化成目标细胞类型的能力。无论是研究体外受精,还是研究人类胚胎中癌症与突变之间的关系,我们有多种类型的胚胎干细胞,均可应用于各种方法,以帮助研究人员进行研究。
非常适合研究人员学习…*
使用 ES 细胞研究疾病、癌症或细胞突变,有助于为新的治疗方案和生物学的未来发展铺平道路。如需了解更多有关可选干细胞类型的信息、研究方法及方案详情,请立即致电赛默飞世尔科技专家。
在添加了 ES 细胞专用合格 FBS 的培养基中生长的 mESC 表现出多能性的形态特征:清晰的折射边缘、紧密的小细胞集落和少数分化细胞(图1A)。在 ES 细胞专用合格 FBS 中生长的 ESC 集落也对碱性磷酸酶 (AP) 染色呈阳性。AP 是由 PSC 表达的多能性标志物。
图1.在添加了 Gibco ES 细胞专用合格 FBS 的培养基中生长的 ESC 集落的图像分析。(A) 在添加了 ES 细胞专用合格 FBS 的培养基中生长的 mESC 集落的相差图像显示出具有与多能性一致的形态特征的集落。(B) 荧光图像(用碱性磷酸酶 (AP) 活性染料对样品进行染色后获得)与 mESC 集落的相差图像的叠加,显示出均匀的 AP 染色。呈绿色的集落表达 AP,因此具有多能性。
图2. 在添加了 ES 细胞专用合格 FBS 的培养基中生长的 mESC 表现出正常的核型。PRX129/X1 mESC 系的正常核型报告。测试的 20 个细胞中有 18 个显示出正常的核型。(Cell Line Genetics)
图3. 在添加了 ES 细胞专用合格 FBS 的培养基中培养的 mESC 保持了 LIF 反应性。从 mESC 培养基中去除 LIF 时,正常的 mESC 培养物会出现广泛分化。在有和没有 LIF 的情况下生长的 PRX129/X1 小鼠 ES 细胞均表现出此反应性。
图4.当作为生长培养基的添加物时,ES 细胞专用合格 FBS 能够支持从小鼠和人类成纤维细胞生成 iPSC。在使用基于仙台病毒的重编程(CytoTune iPS 2.0 仙台病毒重编程试剂盒)的标准工作流程中,小鼠和人类成纤维细胞均成功生成了 iPSC。
使用 PRX129/X1 小鼠 ESC 系筛选出每批ES 细胞专用合格 FBS,并使用测量接种率、形态学(图5)和干细胞标志物表达(图6)的测定法进行筛选。
图5.在添加了 ES 细胞专用合格 FBS 的培养基中培养的小鼠胚胎干细胞的接种率和集落形态评估。(A) 用碱性磷酸酶染色时,未分化的集落(顶行)看起来明亮而清晰,而分化的集落(底行)则显得暗淡、模糊和扁平。(B) 亚甲蓝为所有细胞染色并用于计算总集落数。(C) 绘制为 % AP+/MB+ 的图示结果显示出三个用户之间的测定一致性。
图6.mESC 集落的相差和荧光图像。在添加了 ES 细胞专用合格 FBS 的培养基中培养的 ESC 表现出清晰折射边缘、紧密小细胞集落和少数分化细胞的形态特征。这些细胞还通过碱性磷酸酶 (AP) 活性染料和 Oct4 和 Sox2 的表达表现出多能性。
* 这些结果基于对大约 10,000 份出版物的综述,这些出版物的检索术语基于赛默飞世尔科技提供的六种特殊应用胎牛血清产品。这些术语采用 MeSH(医学主题标题)分类法根据论文全文生成。
仅用于研究和进一步生产用途。血清和血液蛋白不可直接用于人或动物。