目前,主要有两种基本的细胞培养体系,一种是使细胞在人工基质上单层生长(如贴壁培养),另一种是使细胞在培养基中自由漂浮生长(悬浮培养)。

每种细胞培养类型的特征

除造血细胞系和其他一些细胞外,大多数脊椎动物细胞均具有贴壁依赖性,必须在合适的基质上进行贴壁培养,且该基质必须经过特殊处理,以便细胞附着和铺展(即经组织培养处理)。然而,许多细胞系也可采用悬浮培养。同样,大多数市售昆虫细胞系在单层或悬浮培养中生长良好。

悬浮培养细胞可在未经组织培养处理的培养瓶中培养,但随着培养物体积与表面积之比(通常为0.2 – 0.5 mL/cm2)的增加,阻碍了气体的充分交换,因此需要对培养基进行搅拌。这种搅拌一般通过磁力搅拌器或旋转转瓶实现。


贴壁细胞培养
悬浮细胞培养
适用于大多数细胞类型,包括原代培养
适用于适应悬浮培养的细胞和一些其他非粘附性细胞系(例如,造血细胞细胞系)
需要定期传代,但可在倒置显微镜下轻松进行目视检查更容易传代,但需要每日进行细胞计数和存活率测定以遵循生长模式;可稀释培养物以刺激生长
通过酶解(例如,Gibco™ TrypLE™ Express、胰蛋白酶)或机械解离细胞
不需要酶或机械解离
生长受表面积的限制,可能会限制产品产量
生长受培养基中的细胞浓度限制,便于扩大规模
需要经组织培养处理的容器可在未经组织培养处理的培养容器中维持培养,但需要搅拌(即振荡或搅拌),以实现充分的气体交换
用于细胞学、持续收获产品和多种研究应用用于大量蛋白生产、批量收获和多种研究应用

视频:细胞传代

视频3:细胞传代

本视频解释了为什么、何时以及如何在贴壁培养物和悬浮培养物中传代细胞。这包括细胞解离、细胞计数、确定最佳接种密度和为传代细胞准备新的培养容器。

Video: Passaging 本视频解释了为什么、何时以及如何在贴壁培养物和悬浮培养物中传代细胞。这包括细胞解离、细胞计数、确定最佳接种密度和为传代细胞准备新的培养容器。

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仅供科研使用,不可用于诊断目的。