该细胞系部分提供了细胞培养的基础知识,包括为您的实验选择合适的细胞系。您还可以了解:贴壁细胞培养与悬浮细胞培养

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选择合适的细胞系

为您的实验选择合适的细胞系时,请考虑以下标准:

  • 种属:非人类和非灵长类动物细胞系的生物安全限制通常较少,但是否需要使用种属特异性的细胞培养物,则由所要开展的实验来最终决定。

  • 功能特性:您的实验目的是什么?例如,肝脏和肾脏来源的细胞系可能更适合进行毒性测试。

  • 有限细胞系或连续细胞系: 虽然选择有限细胞系会使您在表达正常功能方面具有更多的选择,但是连续细胞系往往更容易扩增和维持。

  • 正常或转化的细胞系:转化细胞系通常生长速度快,接种效率较高,并且可以连续培养,培养基中需要的血清也较少,但是由于遗传转化,其表型已经发生了永生性变化。

  • 生长条件和特性:您对细胞的生长率、饱和密度、克隆形成率以及悬浮生长能力有何要求?例如,要大量表达重组蛋白以获得高产量,您可能应选择生长迅速且能够悬浮生长的细胞系。

  • 其他标准:如果您使用的是有限细胞系,您的细胞储备充足吗?细胞系的特性是否明确?需要自己进行验证吗?如果您使用的是异常细胞系,您是否有等效的正常细胞系可用作对照?该细胞系是否稳定? 如果不稳定,那么这种细胞容易扩增以便为实验提供充足的冻存储备吗?

获取细胞系

您可以通过原代细胞建立自己的培养物,也可以选择从商业或非营利供应商(即细胞库)购买已建立的细胞培养物。声誉良好的供应商可提供高质量的细胞系,这些细胞系经过仔细的完整性测试,以确保培养物不受污染。我们建议不要借用其他实验室的培养物,因为它们具有较高的细胞培养污染风险。无论其来源如何,在您开始使用之前,请确保对所有新的细胞系进行支原体污染检测。

我们为您的细胞培养实验提供各种原代培养物和已建立的细胞系、试剂、培养基、血清和生长因子。

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视频3:细胞传代

Video: Passaging 本视频解释了为什么、何时以及如何在贴壁培养物和悬浮培养物中传代细胞。这包括细胞解离、细胞计数、确定最佳接种密度和为传代细胞准备新的培养容器。