细胞培养污染是细胞培养实验室中最常见的问题,有时会造成非常严重的后果。细胞培养污染物可分为两大类,即化学污染物(如培养基、血清和水中的杂质、内毒素、增塑剂和洗涤剂)和生物污染物(如细菌、霉菌、酵母菌、病毒、支原体以及其他细胞系的交叉污染)。虽然不可能完全消除污染,但通过充分了解其来源并采用良好的无菌技术,可以降低污染的频率和严重性

本部分概述了主要生物污染类型:

交叉污染

虽然不如微生物污染常见,但许多细胞系与 HeLa 和其他快速生长细胞系的广泛交叉污染是一个已明确的问题,且后果严重。从值得信赖的细胞库中获取细胞系、定期检查细胞系的特性,并采取良好的无菌技术,都有助于避免交叉污染。DNA指纹图谱分析、核型分析和细胞亚型分析可以确定细胞培养物中是否存在交叉污染。

虽然不如微生物污染常见,但许多细胞系与 HeLa 和其他快速生长细胞系的广泛交叉污染是一个已明确的问题,且后果严重。从值得信赖的细胞库中获取细胞系、定期检查细胞系的特性,并采取良好的无菌技术,都有助于避免交叉污染。DNA指纹图谱分析、核型分析和细胞亚型分析可以确定细胞培养物中是否存在交叉污染。

视频2:无菌技术:本视频重点介绍了为防止细胞培养受到污染应采取的步骤。

Video: Sterile Techniques

使用抗生素

请勿在常规细胞培养中使用抗生素,因为抗生素的连续使用会促进耐药菌株的生长,并导致轻度污染持续存在。一旦将抗生素从培养基中去除,就会发展成大规模污染。抗生素的持续使用还可能掩盖支原体感染和其他隐性污染。此外,一些抗生素可能与细胞发生交叉反应,并干扰正在研究的细胞过程。

抗生素只能在万不得已的情况下使用,也只能短期应用,应尽快从培养物中去除。如果长期使用抗生素,则应同时进行无抗生素培养,作为检测隐性感染的对照。