细胞培养故障排除

下表列举了进行细胞培养实验时的一些潜在问题，以及可帮助排除故障的可能解决方案。请注意，以下列表仅包括细胞培养中最常见的问题，并且仅提供解决方案指南。为了帮助您更成功地评估结果，我们建议您查阅您使用产品随附的手册和产品信息表，以及已发表的相关文献和书籍。

问题：细胞储存液解冻后没有活细胞

原因	解决方案
细胞储存不当	获取新的细胞储存液并储存于液氮中。将细胞保存在液氮中，直至解冻
自制冷冻细胞储存液中没有活细胞	按照供应商推荐的密度冻存细胞使用低传代细胞制作冷冻细胞储存液严格按照供应商建议的程序冷冻细胞。请注意，本手册推荐的冷冻程序是一般程序，仅供参考。获取新的细胞储存液
细胞解冻不当	严格按照供应商建议的程序复苏细胞。请注意，本手册推荐的解冻程序是一般程序，仅供参考。确保快速解冻冷冻细胞，但在接种前使用预热的生长培养基缓慢稀释细胞。
复苏培养基不合适	使用供应商推荐的培养基。确保预热培养基
细胞稀释过度	按照供应商的建议，以高密度接种解冻后的细胞，优化回收率
细胞处理过程不够轻柔	大多数细胞在冷冻和解冻时均受到外力作用。请勿涡旋、敲击培养瓶使细胞脱落（培养昆虫细胞时除外），或是高速离心细胞。
冷冻培养基中使用的甘油未避光储存（如适用）。	如果未避光储存，甘油会转化成对细胞有毒性的丙烯醛。获取新储备液。

原因	解决方案
生长培养基不合适	使用供应商推荐的经过预热的生长培养基。
生长培养基中的血清质量不良	使用其他批次的血清。
细胞传代次数过多	使用健康的低传代数细胞。
让细胞生长超过汇合状态	在哺乳动物细胞达到汇合状态前处于对数期时进行传代。
培养物被支原体污染	丢弃细胞、培养基和试剂。获取新的细胞储备液，并将其与新鲜培养基和试剂配合使用。