Sf9 昆虫细胞系是源自亲本草地贪夜蛾细胞系 IPLB-Sf-21-AE 的克隆分离株,该细胞系是用于通过杆状病毒表达系统(如 Invitrogen 的 Bac-to-Bac®Bac-N-Blue™ 表达系统)进行重组蛋白表达的合适宿主。 虽然过去一直在利用 T 培养瓶和添加血清的基础培养基的静置系统中培养昆虫细胞,但昆虫细胞通常不具有贴壁依赖性,可轻松在悬浮培养物中维持培养。

健康 Sf9 细胞形态

下图显示了健康的 Sf9 昆虫细胞在悬浮培养时的形态和贴壁培养时的形态。 Sf9 细胞牢固附着于表面,其小而规则的尺寸使其用于形成单层细胞和噬斑时异常出色。

健康 Sf9 昆虫细胞在悬液中生长的相差图像

图3.5:  健康 Sf9 昆虫细胞在悬液中生长的相差图像。 从摇瓶开始培养,以 3 × 105 个活细胞/mL 密度接种于 Sf-900 II SFM 培养基,然后在未加湿的 28℃ 环境空气调节培养箱中维持培养。 接种后第3天使用 10X 和 20X 物镜获得图像(分别为图 A 和 B)。

健康 Sf9 昆虫细胞在 Sf900 II SFM 培养基中以单层贴壁形式生长的相差图像

图3.6: 健康 Sf9 昆虫细胞在 Sf900 II SFM 培养基中以单层贴壁形式生长的相差图像。 将细胞铺于 T-25 培养瓶中,接种密度为 5 × 104 个活细胞/cm2,使其在未加湿的 28℃ 环境空气调节培养箱中以单层形式生长。接种后第3天使用 10X 和 20X 物镜获得图像(分别为图 A 和 B)。