报告基因检测

报告基因是指转染后易于检测产物的基因，可作为标记物用于筛选成功转染的细胞，用于研究基因表达调控，或作为对照用于对转染效率进行标准化。

理想的报告基因应是研究使用的细胞中不存在的基因，或可以与该基因的天然形式轻松区分，便于检测且具有较广的线性检测范围。同样重要的是，报告基因的存在不应影响转染细胞的正常生理和总体健康。

报告基因可以呈组成型表达，也可通过外来干预（如在 β-半乳糖苷酶系统中导入 IPTG）呈诱导性表达。一般在转染后 1-3 天进行报告基因检测，但检测的最佳时间应根据经验确定。

可筛选标记物可保护生物体不受筛选试剂影响，筛选试剂通常会杀死生物体或阻止其生长，与之相比，用于转染子筛选的报告基因可使含有报告基因的细胞通过显像识别。上述用途的报告基因一般可在其自身启动子的调控下表达，与导入的目标基因无关，因此，即便目标基因只在某些特定条件下表达或者其所在的组织难以获取，亦可利用报告基因来筛选成功转染的细胞。

报告基因还可用作转染的对照。例如，通过比较所有实验中使用的报告基因的表达水平，可以对不同实验的转染效率进行标准化。

报告基因检测对于顺式作用因子（基因调控元件）和反式作用因子（转录因子或外源性调控因子）的基因表达调控研究均具有不可估量的价值。此外，报告基因系统可以使用具有通路特异性、组织特异性或受发育调控的基因启动子作为特异性事件过程的生物标记物。

在这些分析中，可检测的报告基因可用作待研究基因编码区的替代物。报告基因构建体包含一个或多个待分析的基因调控元件、报告基因序列和功能 mRNA 转录所需的序列。将报告基因构建体导入细胞后，可以通过直接检测报告蛋白质的酶活性监测
报告基因的表达水平。

可诱导产生显像识别特性的常用报告基因通常涉及荧光和发光蛋白。