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我们总结了一系列要点提示和技巧并建立了一个详细的知识库，以满足您的各类科研需求，助您优化试验，获得最理想的结果。
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实验遇到问题了吗？请访问我们的
是的，我们在2014年2月12日获得了ISIA可追溯性的有效认证。请点击此处阅读更多详情。
请使用我们的培养基配方搜索工具来获取相关信息。
会。动物血清应储存于–5至–20°C。培养基储存于2至8°C；请在推荐的保质期内用完。请将完全培养基（加入添加剂）保存于2 至 8°C，推荐的存放期限为2至4周。此外，尽量减少血清和培养基暴露于光线下的时间。
美国在生物安全方面的规章和建议公布于《微生物学与生物医学实验室的生物安全》文档中，该文件由疾病控制中心（CDC）与国立卫生研究院（NIH）共同撰写，由美国卫生与人类服务部发布。该文件定义了逐步增加的4个污染等级，简称为1至4级生物安全级别，其中描述了操作某一特定试剂所对应的风险级别，及其相应的微生物学方法，安全设备与设施保障。
生物安全级别1（BSL-1）：BSL-1是大多数研究型与临床型实验室常规使用的基础保护级别，适用于那些不会导致正常健康人体发生疾病的试剂。
生物安全级别2（BSL-2）：BSL-2适用于摄入后或经皮肤或粘膜接触会导致不同程度人类疾病的中等风险性试剂。大多数细胞培养实验室需至少达到BSL-2级别，但实际要求需基于所用的细胞系和所执行的工作类型来决定。
生物安全级别3（BSL-3）：BSL-3适合于已知的具有潜在空气传播性的本土或外来制剂，以及可能引起严重和潜在致命感染的试剂。
生物安全级别4（BSL-4）：BSL-4适用于具有高个体风险的外来制剂——这些制剂会通过空气传播造成生命威胁性疾病，且无可用治疗方案。这些试剂仅限于在高度封闭的实验室内应用。
如需获得生物安全级别规则相关的更多信息，请参考《微生物学与生物医学实验室的生物安全》第五版，下载链接： http://www.cdc.gov/biosafety/publications/bmbl5/index.htm.
大多数常规哺乳动物细胞系在pH7.4的条件下生长良好，不同的细胞株系之间差异极小。大多数研究人员通常使用含5–7% CO2的空气，一般而言，4–10%的CO2浓度即可满足绝大多数的细胞培养实验要求。请点击 此处阅读更多关于缓冲条件的相关信息。
无菌技术的作用是在环境微生物与无菌的细胞培养物之间形成一道屏障，它通过一套操作流程来降低培养物被污染源污染的可能。无菌技术的组成要素包括：无菌工作区域、良好的个人卫生、无菌试剂和培养基以及无菌操作。点击此处阅读更多关于无菌技术方面的信息，也可浏览我们的目录。
细胞培养实验有两种基本的细胞生长系统：在人工基质上的单层培养（即粘附培养）或在培养基中自由漂浮（悬浮培养）。来源于脊椎动物的大部分细胞，除造血细胞系及少数其它细胞系外，均依赖固着性的生长，因此需要专门培养于适当的基质上，且该基质必须经过特殊处理，才能成功地粘附和扩增（即组织-培养处理）。不过，许多细胞株也能够适应悬浮培养条件。以此类似市售的昆虫细胞系在单层或悬浮培养条件下均生长良好。
悬浮培养的细胞也可培养于未经组织-培养处理的培养瓶中，不过由于培养体积相比表面积有所增加，导致气体交换受阻（通常情况下为0.2-0.5 mL/cm2），因此需要对培养基进行搅动。这一搅动过程一般由磁力搅拌器或旋转培养瓶来完成。
两者的比较表请见此处。
接种也成为移是指移去培养基并将之前培养的细胞转移至新鲜的生长培养基中，通过此步骤能够进一步扩增细胞系或细胞株。请点击此处阅读更多关于细胞生长和接种的相关信息
请点击此处查看我们的细胞冻存方案。
请点击此处查看我们的细胞复苏方案。
请点击此处阅读使用血细胞计数器的一般说明。此处阅读使用血细胞计数器的一般说明。
下列步骤将帮助您精确地测定细胞活力。
您可在我们的网站上找到一份实验方案。在主搜索框中输入“以干粉和浓缩液制备培养基（Media Preparation from Powder and Concentrates）”，按下回车键或点击搜索按钮。这一操作将引导用户至一个详细的实验方案页面。
GibcoTM细胞培养基用水符合USP（美国药典）对注射用水的全部要求。
不必，您收货之后无需再调整液体培养基的pH值。这些产品已经处于正确的pH使用区间。加入添加剂（需要时）后如有需要，您可再次检测pH值并进行调整。不过，通常这一操作并不会显著改变pH值。如果您以粉剂自制培养基，则需要调整其pH值，但能够自动调节pH值和渗透压的AGTTM培养基不在此列。
Gibco™细胞培养袋（Cell Culture Bag）是预先灌注培养基，使用方便的包装，具有多种配方与体积，特别针对提升效能与降低成本的需求进行了专门设计。这些培养袋的体积可达1000升。请点击此处阅读更多关于这些培养袋的相关信息。
基于用户的反馈，我们设计了一个袋装培养基的系列，所有尺寸的培养袋均使用一致的膜体进行包装。这一膜材料——称为PE膜——比其他市售膜材料的功能更优。点击此处了解更多关于PE膜材料的说明。
这一市销的膜材料是一种非常透明，多层的单卷膜材料，并拥有聚乙烯接触表面，可制成各种不同的尺寸（250 mL至1000 L）。此外，这一膜材料还具有卓越的气体阻隔性能和极低渗漏率，是市场的领先产品。点击此处 了解更多关于PE膜材料的说明。
我们对每一尺寸的培养袋都设计了特定重量的瓦楞纸箱来辅助运输：
5 L: 12” x 14.25” x 5.5”
10 L: 13” x 23.5” x 6.125”
20 L: 15” x 24” x 6.125”
有的。尽管我们感觉PE膜材料在技术性能上超越了市面上许多其他膜材料，我们仍将以订购的形式继续供应和支持我们目前正在销售的其他膜材料。
几乎所有的Gibco™细胞培养基础培养基产品都可通过Gibco™培养基配置工具进行定制。如需检索某一特定产品，请访问培养基配置工具页面，通过Gibco™目录编号来进行搜索，或通过相关描述来浏览我们目前正在提供的产品。对于缓冲液和生长因子等非培养基类Gibco™产品的定制服务，请通过lifescience-CNTS@thermofisher.com电子邮箱联系我们。
Gibco™培养基配置工具 允许您增加、降低和调整各成份的浓度。此外，您还可以在包装，质控测试，以及cGMP或非cGMP生产等广泛的选项中进行选择。
否，Gibco™培养基配置工具无法用于非Gibco细胞培养产品的询价操作。不过，我们在帮助客户生产自制配方的培养基方面拥有非常丰富的经验。请访问www.thermofisher.com/custommedia或联系我们的 lifescience-CNTS@thermofisher.com 邮箱获取更多相关信息。
您可在任何时间使用Gibco™培养基配置工具在线浏览为您的细胞培养产品专门准备的定制选项。同时，这一工具还能够为客户定制的培养基提供更快速的询价功能，相关价格通常在48小时的工作时间内即可获得。
是的，我们基于产品购买数量，为绝大多数定制培养基设定分段价格。
是的，使用GibcoTM培养基配置工具首先需要输入一个Gibco™目录编号，之后再按照专门的配方来设定自定义选项。
如果您当前并未使用类似的Gibco™配方，请使用www.thermofisher.com/mediaconfigurator页面上提供的链接来浏览我们的Gibco™产品选项。
不必，您并不需要登录网站就可使用Gibco™培养基配置工具；不过，登录有助于加速响应您的查询请求。此外，如果您已登录，您的询价需求也会储存于您的查询历史之中，从而使您未来的查询更为方便。
您会被告知有某一现有目录产品可完全匹配您的需求。所有定制培养基的需求在进入生产前都将首先经过我们的可行性引擎进行全面的分析——如果您的产品可立即送货的话，我们双方都将由此获益！
我们拥有Gibco™定制培养基专家团队，他们能够协助您进行产品定制，生产和运输。请邮件联系lifescience-CNTS@thermofisher.com，或拨打www.thermofisher.com/mediaconfigurator页面列出的当地电话，以提交您的问题。
如有网络可访问性相关的问题，请通过免费或当地电话号码联系我们的系统支持。
可以。如果您在通过GibcoTM培养基配置工具询价时进行了登录，只需简单地重新登入thermofisher.com站点，从您的收藏夹中调出表格，修改后重新提交即可。如果您之前询价时未登录网站，请联系GibcoTM定制培养基专家团队以获得帮助。
有的。我们的Gibco™培养基定制专家与研发专员能够为您提供添加或精简培养基成份方面的建议。如需更为全面的服务，我们的PD-DirectTM生物工艺服务团队将进一步为您提供培养基开发与优化的专业服务。
最小的订购体积通常为1升非cGMP标准产品（Gibco™ Media Express™）和10升cGMP标准产品。如有例外，会显示于培养基配置工具中。
当您准备进行首次订购时，请联系Gibco™培养基定制专员或您当地的客户经理。我们Gibco™培养基定制专员的区域联系信息可在 www.thermofisher.com/mediaconfigurator站点找到。
有的。如果您再次订购与之前相同配方，数量和包装的产品，只需简单访问每一 thermofisher.com页面顶部的快速订购（Quick Order）链接，或访问您的历史订单（Order History）页面并点击再次订购（Reorder）选框。
您如有价格方面的问题，请联系您当地的客户经理或您的培养基定制专员。除非另外声明，客户报价在90天内有效。
生产交付周期视具体配方，原料库存，批量大小，质控测试时间以及客户的整体需求而定。我们会对交付周期进行密切监控，而且会在您确认订单时准备一份预估的发货时间框架。您也可与您的Gibco™培养基定制专员或客户经理商讨交付需求。
请访问如下页面浏览我们提供的细胞培养相关的抗生素产品。
血清浓度随所用细胞系和基础培养基的不同而变化。请点击此处查看我们推荐用于测试细胞系的血清添加剂。
该培养基本身不含血清。“减血清（reduced serum）”一词意味着用户可减少常规细胞培养基中的血清含量。使用Opti-MEM™I培养基时，大多数在常规血清添加量中培养的细胞均可直接切换至血清添加量减少50%以上的Opti-MEM™I培养基中进行培养。
高级培养基可减少血清用量50%至90%。对于大多数细胞系而言，减少50%的血清用量不会导致任何营养问题。进一步降低血清含量可能会逐渐出现营养问题。如需将血清含量减至50%以上，则血清用量应具体视所用细胞系而定。降低血清用量的好处包括节约成本——特别是在血清价格上涨时期——延长某批血清的使用时间和减少实验条件的批次间差异。
如需了解高级DMEM和高级MEM的更多详情，请于我们的网站主页搜索“Advanced Media（高级培养基）”。
Fetal Bovine Serum（FBS）一度被称作Fetal Calf Serum（FCS）。它们是同种产品。
从冰箱中取出血清并在2–8°C条件下过夜融化。随后可在室温下完成解冻过程。在这一过程中，血清应规则地进行混匀。警告：不要将FBS置于37°C条件下孵育过长时间，否则产品可能会变混浊。由于血清中许多成份存在敏感性，其性能也可能受到影响。产品一旦解冻，建议您立即使用。
不必，使用前并不需要过滤血清。Gibco™血清产品经最为严格的工艺生产，其中就包含有膜过滤步骤。
有的。我们为您提供了各种的定制选择。请联系我们的血清专员来讨论您的应用与研究需求。我们将通过密切合作来为您提供专项加工和测试的血清产品，以匹配您的特定需求。举例来说，我们的定制包括热失活、伽马辐照和四环素残留测试等。
伽马辐照被认为是灭活动物源性产品中病毒的有效手段。按照USDA（美国农业部）对抗体产品常规要求方面的规定（9CFR，章节113.450），动物源性血液衍生物的最小照射剂量为25 kGy。某些欧洲国家要求在进口前对产品进行处理的最小剂量为25 kGy。
我们将依照您的需求对血清产品进行伽马辐照。我们通过经验证的30-45 kGy的伽马辐照来灭活可能存在于FBS中，最为常见的牛病毒和支原体。病毒灭活的对数（log）量级达6-8，支原体灭活的对数量级达6-7。我们也验证了血清的生化性质与细胞培养性能不会受30-45 kGy伽马辐照的影响。
监管机构通常将伽马辐照作为灭活动物血清中天然存在的病毒，以及降低病毒风险的最佳方法。我们以现货提供少量的伽马辐照产品。我们大多数的标准目录产品均可依照客户的要求来定制伽马辐照操作。我们所提供的定制工艺覆盖了多种照射剂量范围，并经过完整的效果验证。
热灭活步骤能够灭活补体系统。补体会参与以下事件中：溶解细胞事件，平滑肌收缩，肥大细胞与血小板释放组胺，吞噬作用增强，趋化作用，淋巴细胞与巨噬细胞的活化等。
您可将解冻后的产品置于56°C的恒温控制下孵育30分钟。我们所提供塑料和玻璃瓶装的血清产品均能胜任热灭活处理。警告：不要试图以更高的温度和更长的时间来热灭活血清产品，这样的条件会导致蛋白变性，进而降低产品性能。
Gibco™ FBS有100 mL、500 mL和1000 mL的瓶装规格，也有3.5 L和4 L体积的产品可供特殊订购
BVD会造成牛的病毒性腹泻。该病症是牛最为常见的病毒感染症状之一。据估计在世界范围内，牛种群中估计有百分之七十至九十的个体血清为BVD阳性。该病毒会导致牛发病和流产。也有部分现存的BVD毒株是非致病性的。
在细胞培养应用中，联邦法规（9CFR）对生物制品生产所用细胞系和原料提出了一些要求。用于生产生物制品的血清要求具有阴性的BVD病毒检测结果。
GibcoTM血清的BVD病毒测试均按照9CFR中的检测方案来进行。我司内部划分为0至4级（根据检测结果）。结果为0意味着遵照9CFR测试方案，本批血清的病毒检测结果为阴性。1-4级的检测结果表明本批血清为病毒阳性。A+1表明病毒发出较低荧光，a+4表示病毒荧光较强。该批次的质检报告中会标记“经测试（tested）”一词，而非实际的BVDV抗体荧光强度。
某一批次的血清产品按照9CFR方案测试结果为0，而在使用PCR一类更新更灵敏的技术测试时则可能出现阳性结果。为了确保该批次血清“真正”为BVD病毒阴性，需对其进行伽马辐照等的处理。
在国内销售的血清进行了四环素水平的抽检，浓度也均低于19.7ng/mL。
这些FBS在进行透析时通过使用分子量为10000的分子筛在0.15M NaCl溶液中进行正切流动过滤，直至葡萄糖水平低于5 mg/dL。由于这一操作非彻底透析，因此氨基酸一类的低分子量透析组份可能无法完全去除。这些产品未经彻底透析的原因是该操作可能会导致血清中肽类的沉淀和失活。
该蛋白是一个能够反应快速收集和加工效果的标记物。
通常确认是否需要此操作的最好办法是咨询您获取细胞的来源。举例来说，ATCC对于他们所销售的细胞就有血清方面的要求。多数昆虫细胞系与胚胎干细胞系都需要应用热灭活的血清。
酚红在组织培养物中具有较弱的类雌激素作用。细胞培养中雌激素响应情况的相关研究结果请参见Proc Natl Acad Sci U S A 83:2496 (1986)。
酚红在极小孔径的凝胶中被做为示踪染料，可以显示真实的离子前端（ion-front），尤其适合应用于Tricine胶。酚红比Coomassie™ Blue G-250的分子量更小。在高浓度凝胶中，这一大小区间内的分子将会基于分子量大小而被解离开来，酚红伴随离子前端共同泳动，而G-250会滞后离子前端2 cm处泳动。在适于分离更大蛋白的凝胶中——如NuPAGE™凝胶——G-250会伴随离子前端共同泳动，通常也是最为常用跟踪染料。
是的，请访问此页面浏览我们的无酚红培养基页面。
丙酮酸钠可以做为细胞培养中的补充能量来源。我们通常在低葡萄糖配方（1.0 g/L葡萄糖）中加入丙酮酸钠，有时也向高糖配方中添加。细胞会对丙酮酸钠表现出“依赖”，一旦从培养基中突然撤走丙酮酸钠，细胞的生长将会经历一个短暂的延迟。
丙酮酸钠（目录编号11360070）是一款细胞培养基的液体添加剂，浓度是100 mM（100X），即11,004 mg/L。
GlutaMAX™-I 添加剂是一款能够改善细胞培养效果的添加剂，是您细胞培养基中L-谷氨酰胺的直接替代品。请点击此处来阅读更多关于GlutaMAX™添加剂性能的详细信息。
MEM维生素溶液（目录编号11120-052或11120-037，视您所在国家而定-）是细胞培养基中的促生长添加剂。本溶液的浓度是标准MEM培养基中的维生素成份浓度的100倍。请点此处查询完整的溶液配方。
Gibco MEM氨基酸溶液是一种细胞培养中生长添加剂，能够促进细胞生长和存活。本溶液的配方中包含了50倍标准MEM培养基中的必需氨基酸成份（L-谷氨酰胺除外）。请点击 此处查询完整的溶液配方。
颗粒状细胞培养基是一类以颗粒形式提供，便于使用的干式培养基，我们将流化床造粒技术应用于细胞营养培养基制造领域，从而生产出此款产品。这一专利工艺能够将各类无血清、无蛋白和化学成分确定配方的培养基制成完整的干式颗粒状产品。
AGT™能够为用户提供与液体培养基相同的培养效果，同时减少了成本、储存和运输方面的问题。该产品是一种完全培养基，pH与渗透压均经过预先调整。由于颗粒吸水迅速，因此制备培养基的过程比传统干粉培养基更快捷。AGTTM培养基能够帮助用户减少整个周期的运行成本，减少原料计划、采购、测试以及培养基制备所需的时间和成本。本品不仅保持了与液体培养基同等的细胞生长效果，还成功将以上优势变成了现实。
完整的配方
颗粒形式
MEM非必需氨基酸是一种细胞培养添加剂，能够促进细胞生长和存活。MEM非必需氨基酸产品以100倍浓度形式为用户提供与标准MEM培养基相同的非必需氨基酸组份。用户可点击此处查阅其完整配方。
我们推荐您使用这款产品进行外泌体相关的分析，您也可在分析前用这款产品来培养细胞，以最大限度地降低细胞背景信号。我们推荐您优化使用浓度，最常用的浓度范围是5-10%的使用浓度。
与我们其他的血清产品一样，去外泌体的FBS也经过彻底的无菌测试。此外，本款产品还通过了外泌体清除测试和专门的细胞培养性能等附加测试。
在我们为您提供的去外泌体FBS产品中，包含≤10%的起始原料的FBS中外泌体成分。我们使用了一项专为定量外泌体而开发的内部荧光分析方案，以确定每批产品中外泌体的清除水平。
是的，相关操作均通过了测试。您可在解冻本品后，对其进行分装，再重新冻存。
我们研发了一套专利工艺，以在去除外泌体的同时最大限度地保留血清的促生长性能。
我们专门测试了Jurkat、MCF-7、HeLa、PC3、HEK293与A549细胞，所有这些种类的细胞都生长良好。HeLa细胞对于去外泌体FBS的存在最为敏感。您可能需要对去外泌体FBS的浓度进行调整，以匹配特定细胞系与培养系统的需要。我们推荐您以10%做为去外泌体FBS应用的起始浓度，在需要时进行上调或下调。同时，去外泌体FBS通过了单次传代后48小时的培养测试和验证（我们也成功完成了对HeLa、MCF-7和HEK293等细胞系长达96小时的培养测试）。
Dynamis™ 培养基以干式AGTTM进行设计，比CD FortiCHOTM液体培养基更方便进行扩展。尽管两者在配方上有许多相似之处，其关键的差别在于使用了某些等摩尔的替代成份，以及少量添加了一些其他基础培养基中的组份。
当使用除Lonza的GS基因表达系统™（GS Gene Expression System™）的CHO细胞系时，推荐添加2-8 mM的L-谷氨酰胺或等量GlutaMAX™添加剂。此外，我们建议您在必要时添加葡萄糖以维持不低于2 g/L的葡萄糖水平（参见更为详细的产品说明书）。
当您使用不添加完全补料的流加培养进行生产时，我们建议您在需要时补充葡萄糖的培养条件下，维持不低于2 g/L的葡萄糖水平（参见更为详细的产品说明书）。我们发现EfficientFeed™ A+，B+和/或C+添加剂能够与Dynamis™培养基配合良好，进而获得最大效价。我们推荐您优先试用1X和2X EfficientFeed™ C+，如果目的蛋白产率在培养后期下降，则可尝试添加Function™ Titer Enhancer产品。对于未使用EfficientFeed™添加剂一类完全型添加剂培养的细胞而言，在细胞密度到达一半峰值之前无需添加任何添加剂。
我们针对两类培养基开展的一些研究显示这两款产品具有类似的结果；当您的监管团队认为有必要从一款培养基换用另一款时，可将这一信息在机构中存档以支持您的工作。从技术转化至生产的过程中，如果您观察到效价没有改变，您所表达的蛋白的性状也有可能没有差异，可能仅需要做CMC更新或将补料程序进行微调。当然如果能够帮助您简化转换过程，我们的监管团队也很乐于与您的团队进行探讨。
请通过此选择列表来比较我们的细胞解离试剂。
TrypLE™试剂不含动物源性与人源成份，纯度极高且对细胞的作用十分温和。该产品无需使用胰酶抑制剂对其进行终止。在含血清和不含血清的培养条件下，TrypLE™试剂都是解离各类贴壁培养的哺乳动物细胞系的理想之选，能够直接做为胰酶替代品而应用于您当前的实验方案。
TrypLE™试剂在常温下十分稳定，可随时按需取用。TrypLETM细胞解离试剂能够在室温下稳定保存24个月，储存与操作都更为容易方便。
这两款产品均含有重组蛋白酶，这是一款类似胰酶的非动物源性产品，可用于解离贴壁细胞。这款产品是利用微生物生产的重组酶，可替代猪源的胰酶产品。
Express与Select产品在生产与测试方法，以及提供的文件方面都有差别。TrypLETM Select主要面向工业市场，通过了内毒素和酶活性的出厂测试。同时该产品也具有药物主文件记录。这款产品使用AOF专用设备进行生产，指定用途为研究级应用及进一步的细胞培养生产。
TrypLE™Express未使用专门设备进行生产，用途仅为科学研究。不适用于诊断操作。
如需阅读更多关于TrypLE™产品的信息以及使用该试剂所需的细胞解离时间，请点击here.
是的，TrypLE™产品含有重组蛋白酶，这是一款类似胰酶的非动物来源的重组酶，可用于解离贴壁细胞。经验证TrypLE™能够有效解离无血清和含血清两种培养体系内的细胞。TrypLE™ Select的目录编号为12563-011（100 mL）和12563-029（500 mL）。TrypLE™ Express的部分目录编号包括不含酚红的12604-013（100 mL）与含酚红的12605-010（100 mL）。这两种配方均提供其他多种规格的产品。所有这些产品均不含动物源性成份。
For Research Use Only. Not for use in diagnostic procedures.