アコースティックフォーカシングテクノロジーに関する概要

各Attune flow cytometerのランを始める際に、懸濁細胞のサンプルを機器内へ吸引させて、アコースティックフォーカシングを適用します。アコースティックフォーカシングでは、超音波放射圧（2 MHz超）を適用して、サンプル流の中心部分へ粒子を輸送することができます。このフォーカシングされた流れは、その後シース流へ注入され、サンプルに対して流体力学的な圧力をさらに加えます。これら2つの効果（アコースティックアシストハイドロダイナミックフォーカシングと呼ばれる）によって、サンプル入力速度に関わらず、コアストリームが狭小となり、レーザー照射が均一化されます。ハイドロダイナミックフォーカシングのみに依存する従来型サイトメーターでは、流速の上昇に応じてサンプルコアが広がるため、レーザー光照射の均一性が欠けることになります。

サンプルコアが広がると、細胞はレーザー通過時に広範囲へ分布するため、細胞がレーザー焦点に対して正確に整列することはほとんどありません。 シグナル検出において従来型フローサイトメーターから最小限の変動値で最適データを得るには、最低サンプル流速（通常10〜20 μL /min）で機器を動作させなければなりません。 サンプル流速が上がると、変動幅が広がり正確な測定につながりません。 アコースティックフォーカシングを活用すれば、細胞配置をシース流からの影響を無くすことにより、データやサンプル流速に関するこうした妥協点を回避できます。

あらゆる細胞型とサンプルに対応できます

アコースティックアシストによるハイドロダイナミックフォーカシングを適用するAttune NxT flow cytometerは、サンプルのスループットレートが12.5～1 mL/minに達し、従来型のハイドロダイナミックフォーカシングシステムよりも最大10倍まで高速化します。また、1秒間あたりに最大 35,000個分のイベントデータを取得できます。つまり、今まで以上に素早くあらゆるサンプル処理が行えます。また、本機器のこうした特性は、細胞濃度が本質的に低いサンプル（脳脊髄液（CSF）や幹細胞）、十分なイベント収集のためにサンプル全体の解析を要する類の貴重サンプル（マウス血液、骨髄、および穿刺吸引液）に有用となります。

Attune NxT Flow Cytometerは、あらゆるサイズの粒子に対応します。本機器の仕様書には「最大粒径50 μm」という旨を記載していますが、最大100 μmサイズの細胞（目詰まりを起こさない）から最小100nmの粒子まで、検出と解析に成功したお客様の事例が弊社へ報告されています。

処理時間を短縮—データ品質はそのままに、10倍に高速化

アコースティックアシストによるハイドロダイナミックフォーカシングを適用するAttune NxT flow cytometerは、サンプルのスループットレートが12.5～1 mL/minに達し、従来型のハイドロダイナミックフォーカシングシステムよりも最大10倍まで高速化します。また、1秒間あたりに最大 35,000個分のイベントデータを取得できます。

高速プロトコルで、時間を節約して細胞処理を最小限に

Attune NxT flow cytometerは、全血の洗浄不要・溶血不要プロトコルに対応するため、実行すべき工程数、洗浄工程中のサンプル損失量を大幅に減少させられます。また、細胞の処理量を飛躍的に減らして、細胞劣化を防ぐことができます。

洗浄不要・溶血不要オプションのサンプルデータをご覧になるにはこちら

全血のイムノフェノタイピングの各プロトコルに関する比較

	工程数	サンプル調製の総所要時間
従来型のイムノフェノタイピングプロトコル	10	1～2時間
洗浄不要・溶血不要のイムノフェノタイピングプロトコル	3	15～20分間

以下のアプリケーションノートをダウンロードできます：

• Attune NxT Flow Cytometerによる、ヒト全血中白血球の、洗浄不要・溶血不要検出
  
• pHrodo™ BioParticles™機能アッセイを介した、Attune NxT Flow Cytometerによるヒト全血中食細胞の洗浄不要・溶血不要検出