Dynabeads®を用いたmRNAの15分間での単離

Isolate the mRNA Transcriptome in 15 minutes with Dynabeads® mRNA Direct Kits
15 minute mRNA isolation protocols are made possible by magnetic Dynabeads coupled with Oligo(dT)₂₅. Dynabeads mRNA分離ビーズは、どのようなクルードライセート液からもmRNA分子を特異的に捕捉します。 mRNA の自動抽出には、磁気ビーズが簡単で結果の再現性が高いので Dynabeads mRNA Direct キットが最適です。

mRNA の場合トータル mRNA の単離は不要
mRNA は、トータルRNA mのうちわずか 1 〜 5 % です。 Dynabeads mRNA精製キットのテクノロジーは、mRNA分子のみを標的として、溶液から直接取り出すことができます。 トータルRNA精製法と比較してください。 トータルRNA精製法の場合には、RNA収量の80%がリボソームRNAです。 Dynabeads mRNA精製キットは、リボソームRNA、tRNA、miRNA、siRNA、non-Poly-A RNAおよびRNA前駆体によるコンタミネーションのないmRNAトランスクリプトームを分離できます。

5000 件の学術論文に引用されています。
Dynabeads mRNA 精製法は、幅広い用途に使用でき、安定した結果が出ることが証明されています。 Dynabeads mRNA Direct Kitは、トランスクリプトームのみを捕捉するので、mRNAを感度良く高い精製率で分離できる方法が不可欠なアプリケーション用に使用できます。

次世代シークエンス用にmRNAトランスクリプトームを分離する場合でも、単にcDNA合成・クローニング用にmRNAの分離を行う場合であっても、Dynabeads mRNA Direct Kitは、代表的なmRNAトランスクリプトーム分離方法であって、超高純度で極めて再現性が高い結果が得られる方法です。

最高のトランスクリプトーム回収率: 単細胞トランスクリプトーム解析 純粋な完全長の遺伝子転写物 偏りのない全poly-A転写物の単離 単細胞または組織全体からcDNAライブラリーを作成 mRNAの直接精製により高収率とプロトコルスケーリングを実現 Dynabeads の特長: カラムフリーシステム ビーズにmRNA結合 迅速で穏やかなビーズ処理 遠心中のmRNAのロスはない。 溶出中にmRNAのカラム膜へのトラップはない。
幅広い溶出オプション: 5ulまでの溶出量を減らせます。 mRNAトランスクリプトーム溶出はオプションです： ダウンストリームの酵素反応はDynabeadsの存在によって抑制されません。 Can synthesize cDNA directly on the beads to create areusable solid-phase cDNA library 直接ビーズに結合したcDNA上で、qRT-PCRを実行します。単一細胞レベルでも可能な精度の高いトランスクリプトーム定量分析です。

Dynabeads® を使用した mRNA の分離の仕組み
この分離法は、A-T 塩基対をもとにしています。 オリゴdTの短かい配列がDynabeads®表面に共有結合していて、mRNAのポリA末端とハイブリダイズするため、簡単・迅速な磁気分離が可能です（15分間）。 RNase inhibition together with stringent hybridization and washing steps ensure the isolation of pure, intact mRNA from crude samples, without the use of strong chaotropic agents.

このプロトコールは、高感度で柔軟性が高く、サンプル量に合わせて簡単にスケールアップまたはスケールダウンが（単一細胞まで）できます。 これにより、高度に特殊化された細胞からのRT-PCRによるmRNAの検出が可能となります。 分離したmRNAは、極めて少量で溶出でき、あらゆる分子生物学アプリケーションの使用に適しています。 ダウンストリームの酵素反応と干渉しないため、ターゲットをビーズから離して溶出する必要はありません。 ビーズ結合オリゴdTは、逆転写および第一鎖cDNA合成のためのプライマーの役割を果たすことができるため、直接RT-PCRや固相cDNAライブラリーの構築が可能です。

独自の磁気ビーズの方法によって、ビーズに結合した分子の洗浄や分離、濃縮が簡単で、遠心分離やカラムも不要です。 優れた分散能と共に残留磁気がないことも、自動化システムやマイクロフルイディクスで要求される要件を満たしています。

Dynabeads® は、ビーズ単独でも、また mRNA トランスクリプトームを簡単に分離するバッファと試薬を組み合わせた mRNA 単離用キットとしてもご利用いただけます。