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細胞株構築サービス
お客様の発見を加速するパートナーとしてのコラボレーション
安定した細胞株の作成は複雑で時間がかかります。Invitrogen™ GeneArt™ TAL および GeneArt™ CRISPR 製品の経験豊富で信頼されている開発者が、市場でもっとも堅牢で信頼できるテクノロジーを用いて、安定した細胞株をカスタム設計します。すべてのプロセスにおいて高品質の製品を使用し、当社の専門家がお客様といっしょに安定した細胞株をデザインし品質管理テストを行うことで、お客様の細胞に対する要件を満たすお手伝いをします。
カスタム哺乳類細胞株の作成
当社は、トランスフェクションが容易な細胞株（HEK 293、293FT、HCT116、HeLa など）から困難な細胞株（線維芽細胞、神経芽腫由来細胞、肝細胞癌細胞、骨髄由来細胞、内皮由来細胞など）まで、さまざまな由来の細胞を扱ってきました。編集プロジェクトは必要な修飾や細胞由来に基づいてお客様ごとに異なります。そのため当社は、お客様のご希望の細胞株における編集の技術的実現の可能性を評価する相談サービスを提供しています。当社は時間を割いてお客様の目標を理解いたします。
当社の包括的なソリューションポートフォリオは際立っており、これにより最大限の効率を達成できます。当社は細胞培養条件およびトランスフェクションメソッドを最適化し、お客様の仕様に従って検証し、お客様のご希望どおりの編集細胞株を確実に提供できるようにいたします。当社のサービスは、お客様を最優先として開発されました。お客様専属のプロジェクトマネージャーを充当し、研究目標とタイムラインの達成をサポートします。当社はお客様の成功へのお手伝いに注力しています。
当社が提供するサービス
当社は、安定プールまたは安定細胞株フォーマットでほぼすべてのタイプの細胞株の構築できる、包括的な編集ツールセットを提供します。GeneArt TAL エフェクターおよび CRISPR は、哺乳類細胞の正確なゲノム編集を可能にする効率的なツールです。経験豊富な細胞工学チームがお客様のプロジェクトに基づいて、最適なテクノロジーの決定をお手伝いします。以下の表は利用可能なサービスのリストです。
お客様の研究に適した細胞株の設計に関する無料相談は、当社のサービスチームにお問い合わせ下さい。
| 修飾オプション | 概要 | 細胞株 |
|---|---|---|
| ノックイン | 目的とする遺伝子へのタグ付け（ルシフェラーゼ、GFP など）、点突然変異の導入／修正、セーフハーバーノックイン、SNP 編集 | ほぼすべての哺乳類細胞株（初代細胞なし／iPSC なし） |
| ノックアウト | 内在性遺伝子のノックアウトまたは欠失の導入 | ほぼすべての哺乳類細胞株（初代細胞なし／iPSC なし） |
| 遺伝子活性化 | 内在性遺伝子発現の活性化／発現増強 | ほぼすべての哺乳類細胞株（初代細胞なし／iPSC なし） |
| 遺伝子抑制 | 内在性遺伝子発現の抑制／発現減少 | ほぼすべての哺乳類細胞株（初代細胞なし／iPSC なし） |
| 外来性遺伝子発現 | ランダムインテグレーションによる外来性遺伝子の導入 | 哺乳類細胞発現ベクター |
| 外来性遺伝子発現 | ランダムインテグレーションによる外来性遺伝子の導入 | pLENTI6.3V5-DEST（BSD） pLENTI7.3V5-DEST（emGFP） |
| 外来性遺伝子発現 | Flp-In による外来性遺伝子の導入 | 誘導型： Flp-In T-REx 293 細胞株 構成型：
|
| 外来性遺伝子発現 | Jump-In による外来性遺伝子の導入 | 誘導型：
構成型：
|
注記：お客様のご希望の細胞株でプラットフォームの作成も可能です。上述のすべてのパッケージで、以下のサービスが受けられます。
- プロトコル転移とトランスフェクション最適化サービス
- カスタム TALEN または CRISPR の作成
- カスタム TALEN または CRISPR の有効性の検証
- 安定細胞株の品質管理分析
ご要望に応じてカスタム設計パッケージを提供いたします。
当社の細胞株設計およびエンジニアリングプロセス
カスタムの安定プールまたは安定細胞株の提供までに要する時間は、細胞株、生育特性、および培養要件により異なります。安定細胞株構築サービスは、最短 10 週間で完了します。
| ツール検証サービス | プール検証サービス | クローン検証サービス |
|---|---|---|
| GCD アッセイによる TALEN／CRISPR の検証 | オンターゲット NGS 解析による TALEN／CRISPR の有効性の検証 | オンターゲット NGS 解析による編集のon-target |
| オンターゲット NGS アッセイによる TALEN／CRISPR の有効性の検証 | Ion AmpliSeq™ テクノロジーを用いた NGS による、オフターゲット効果がないことの検証（CRISPR のみ） | Ion AmpliSeq テクノロジーを用いた NGS による、オフターゲット効果がないことの検証（CRISPR のみ） |
| Ion AmpliSeq テクノロジーを用いた NGS による、オフターゲット効果がないことの検証（CRISPR のみ） | GUIDE-Seq によるオフターゲット効果の検証 | |
| 遺伝子抑制 | PCR 生成物のオンターゲットサンガーシーケンシング | PCR 生成物のオンターゲットサンガーシーケンシング |
| TALEN アクティベーターおよびリプレッサーの検証サービス | 挿入および／または除去 PCR 分析 | 挿入および／または除去 PCR 分析 |
| Applied Biosystems™ TaqMan® アッセイを用いた遺伝子発現解析 | TaqMan アッセイを用いた遺伝子発現解析 | TaqMan アッセイを用いた遺伝子発現解析 |
| ウェスタンブロッティングによるタンパク質発現の解析 | ウェスタンブロッティングによるタンパク質発現の解析 | |
| フローサイトメトリー解析 | フローサイトメトリー解析 | |
| 機能解析（相談に応じて提供、当社のポートフォリオは幅広い検出戦略およびプローブをサポート） | 機能解析（相談に応じて提供、当社のポートフォリオは幅広い検出戦略およびプローブをサポート） |
- 安定細胞株の作成に用いるゲノム編集ツールを適切に提供するためのトランスフェクション最適化サービス
- 安定細胞株の作成に必要な抗生物質最適濃度を決定するための抗生物質殺菌曲線の検証（ノックイン（KI）プロジェクト用）
オンターゲット／オフターゲット分析
より厳密な QC メソッドで、カスタムプロジェクトを加速し、細胞株構築の品質向上を実現できます。シングルセルの蛍光活性化セルソーティング（FACS）を実施しない場合は、NGS 解析により、編集済み増殖細胞株をテストすることによって、限界希釈クローニングからクローンの曖昧さを排除できます。
トランスフェクションの最適化
DNA 試薬や消耗品の Invitrogen™ 製品ポートフォリオは最も引用され信頼されているトランスフェクションおよび選別システムで、その背後には細胞生物学および分子生物学における専門知識があります。当社は、お客様の細胞株に最適なトランスフェクションメソッドを決定する前に、複数のメソッドをテストします。細胞株構築サービスの一環として、トランスフェクションの最適なメソッドおよび条件に関する詳細を提供します。
カスタム哺乳類細胞株の作成
当社は、トランスフェクションが容易な細胞株（HEK 293、293FT、HCT116、HeLa など）から困難な細胞株（線維芽細胞、神経芽腫由来細胞、肝細胞癌細胞、骨髄由来細胞、内皮由来細胞など）まで、さまざまな由来の細胞を扱ってきました。編集プロジェクトは必要な修飾や細胞由来に基づいてお客様ごとに異なります。そのため当社は、お客様のご希望の細胞株における編集の技術的実現の可能性を評価する相談サービスを提供しています。当社は時間を割いてお客様の目標を理解いたします。
当社の包括的なソリューションポートフォリオは際立っており、これにより最大限の効率を達成できます。当社は細胞培養条件およびトランスフェクションメソッドを最適化し、お客様の仕様に従って検証し、お客様のご希望どおりの編集細胞株を確実に提供できるようにいたします。当社のサービスは、お客様を最優先として開発されました。お客様専属のプロジェクトマネージャーを充当し、研究目標とタイムラインの達成をサポートします。当社はお客様の成功へのお手伝いに注力しています。
当社が提供するサービス
当社は、安定プールまたは安定細胞株フォーマットでほぼすべてのタイプの細胞株の構築できる、包括的な編集ツールセットを提供します。GeneArt TAL エフェクターおよび CRISPR は、哺乳類細胞の正確なゲノム編集を可能にする効率的なツールです。経験豊富な細胞工学チームがお客様のプロジェクトに基づいて、最適なテクノロジーの決定をお手伝いします。以下の表は利用可能なサービスのリストです。
お客様の研究に適した細胞株の設計に関する無料相談は、当社のサービスチームにお問い合わせ下さい。
| 修飾オプション | 概要 | 細胞株 |
|---|---|---|
| ノックイン | 目的とする遺伝子へのタグ付け（ルシフェラーゼ、GFP など）、点突然変異の導入／修正、セーフハーバーノックイン、SNP 編集 | ほぼすべての哺乳類細胞株（初代細胞なし／iPSC なし） |
| ノックアウト | 内在性遺伝子のノックアウトまたは欠失の導入 | ほぼすべての哺乳類細胞株（初代細胞なし／iPSC なし） |
| 遺伝子活性化 | 内在性遺伝子発現の活性化／発現増強 | ほぼすべての哺乳類細胞株（初代細胞なし／iPSC なし） |
| 遺伝子抑制 | 内在性遺伝子発現の抑制／発現減少 | ほぼすべての哺乳類細胞株（初代細胞なし／iPSC なし） |
| 外来性遺伝子発現 | ランダムインテグレーションによる外来性遺伝子の導入 | 哺乳類細胞発現ベクター |
| 外来性遺伝子発現 | ランダムインテグレーションによる外来性遺伝子の導入 | pLENTI6.3V5-DEST（BSD） pLENTI7.3V5-DEST（emGFP） |
| 外来性遺伝子発現 | Flp-In による外来性遺伝子の導入 | 誘導型： Flp-In T-REx 293 細胞株 構成型：
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| 外来性遺伝子発現 | Jump-In による外来性遺伝子の導入 | 誘導型：
構成型：
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注記：お客様のご希望の細胞株でプラットフォームの作成も可能です。上述のすべてのパッケージで、以下のサービスが受けられます。
- プロトコル転移とトランスフェクション最適化サービス
- カスタム TALEN または CRISPR の作成
- カスタム TALEN または CRISPR の有効性の検証
- 安定細胞株の品質管理分析
ご要望に応じてカスタム設計パッケージを提供いたします。
当社の細胞株設計およびエンジニアリングプロセス
カスタムの安定プールまたは安定細胞株の提供までに要する時間は、細胞株、生育特性、および培養要件により異なります。安定細胞株構築サービスは、最短 10 週間で完了します。
| ツール検証サービス | プール検証サービス | クローン検証サービス |
|---|---|---|
| GCD アッセイによる TALEN／CRISPR の検証 | オンターゲット NGS 解析による TALEN／CRISPR の有効性の検証 | オンターゲット NGS 解析による編集のon-target |
| オンターゲット NGS アッセイによる TALEN／CRISPR の有効性の検証 | Ion AmpliSeq™ テクノロジーを用いた NGS による、オフターゲット効果がないことの検証（CRISPR のみ） | Ion AmpliSeq テクノロジーを用いた NGS による、オフターゲット効果がないことの検証（CRISPR のみ） |
| Ion AmpliSeq テクノロジーを用いた NGS による、オフターゲット効果がないことの検証（CRISPR のみ） | GUIDE-Seq によるオフターゲット効果の検証 | |
| 遺伝子抑制 | PCR 生成物のオンターゲットサンガーシーケンシング | PCR 生成物のオンターゲットサンガーシーケンシング |
| TALEN アクティベーターおよびリプレッサーの検証サービス | 挿入および／または除去 PCR 分析 | 挿入および／または除去 PCR 分析 |
| Applied Biosystems™ TaqMan® アッセイを用いた遺伝子発現解析 | TaqMan アッセイを用いた遺伝子発現解析 | TaqMan アッセイを用いた遺伝子発現解析 |
| ウェスタンブロッティングによるタンパク質発現の解析 | ウェスタンブロッティングによるタンパク質発現の解析 | |
| フローサイトメトリー解析 | フローサイトメトリー解析 | |
| 機能解析（相談に応じて提供、当社のポートフォリオは幅広い検出戦略およびプローブをサポート） | 機能解析（相談に応じて提供、当社のポートフォリオは幅広い検出戦略およびプローブをサポート） |
- 安定細胞株の作成に用いるゲノム編集ツールを適切に提供するためのトランスフェクション最適化サービス
- 安定細胞株の作成に必要な抗生物質最適濃度を決定するための抗生物質殺菌曲線の検証（ノックイン（KI）プロジェクト用）
オンターゲット／オフターゲット分析
より厳密な QC メソッドで、カスタムプロジェクトを加速し、細胞株構築の品質向上を実現できます。シングルセルの蛍光活性化セルソーティング（FACS）を実施しない場合は、NGS 解析により、編集済み増殖細胞株をテストすることによって、限界希釈クローニングからクローンの曖昧さを排除できます。
トランスフェクションの最適化
DNA 試薬や消耗品の Invitrogen™ 製品ポートフォリオは最も引用され信頼されているトランスフェクションおよび選別システムで、その背後には細胞生物学および分子生物学における専門知識があります。当社は、お客様の細胞株に最適なトランスフェクションメソッドを決定する前に、複数のメソッドをテストします。細胞株構築サービスの一環として、トランスフェクションの最適なメソッドおよび条件に関する詳細を提供します。
