MeltDoctor High-Resolution Melting試薬

HRM解析は、標準的な融解曲線解析（SYBR Green色素などを使用）と次の2つの点で異なります。

• ケミストリー：HRM解析では、高濃度でPCRを阻害しない、より明るいdsDNA結合色素を使用します。
• ソフトウェア：HRM解析では、特定のデータ解析アルゴリズムとプロットを用いる、より特殊なソフトウェアが必要とされます。

TaqMan SNPジェノタイピングアッセイが現在のゴールドスタンダードとして正確性と再現性に優れたPCRベースのジェノタイピングを行えるのに対して、HRMは特定のケースでの利用が適しています。たとえば固有の配列制限によりTaqManプローブを設計できない場合や、ジェノタイピングを行うサンプルの変異性が高く、プローブの特異度により一部の種が見落とされる可能性のある場合は、HRMの方が成功率は高くなります。同様に、少ないサンプル数で多くのSNPを解析する場合や、未知のSNPを含む可能性のあるサンプルの核酸変動を解析する場合は、HRMを検討すべきです。

HRMの恩恵を受けられるその他のジェノタイピング研究には次のものがあります。

• 非モデル生物におけるジェノタイピングで、配列知識が低い場合
• 大規模な領域マッピングを必要とする関連研究
• プロジェクト集団における全米バイオテクノロジー情報センター（NCBI）由来のSNPの妥当性チェック

MeltDoctor HRMマスターミックスには、HRM-PCRに必要なすべてのコンポーネントが含まれています（テンプレートとプライマーを除く）。広範なゲノムターゲットに対して優れたHRMパフォーマンスを発揮するよう配合されています。市販のミックスとは異なり、MeltDoctor HRMマスターミックスは使用前の追加混合を必要とせず、HRMアプリケーション専用に開発、最適化されています。マスターミックスは便利な2倍濃度で提供されており、成分として次のものが使用されています。

MeltDoctor HRMマスターミックスには必要なすべてが含まれているため、実験のセットアップが大幅に簡素化されます。サンプルとPCRプライマーのペアを追加するだけで、反応を実行するための準備が整います。

キットには、高分解能融解解析に必要なPCRコンポーネントとMeltDoctor HRM色素が含まれています。独自に実験のカスタマイズができるよう、試薬は混合せず個別の容器に入れた状態で供給されます。

この陽性コントロールキットには、フォワードとリバースPCRプライマーおよび対立遺伝子AA、AB、BBを表す3つのDNAテンプレートなど、HRM解析のデモンストレーションとトラブルシューティングを行うためのコンポーネントが含まれています。