ターゲットの抗原に免疫組織化学染色を施した後、二次的な染色を行い、色彩対比を作り出すことにより一次染色を際立たせます。他の染色法では細胞全体が染色されるのに対して、一般に対比染色では、細胞内の各コンパートメントや抗原が特異的に染色されます。免疫組織化学(IHC)には、発色色素または蛍光色素いずれも利用できます。多種多様な試薬が取り揃えられており、あらゆる実験デザインに対応します。

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IHC対比染色の実例

000013_IHC_Vimentin-500px扁桃組織中のビメンチンの免疫組織化学的検出。固定化されたヒト扁桃組織中でビメンチンを検出しました;検出にあたり、抗ビメンチン抗体で細胞をインキュベートした後、Thermo Scientific DyLight 549-Conjugated Goat Anti-Mouse Secondary Antibody(赤)で細胞をインキュベートしました。ヘキスト染色によって細胞核を対比染色しました(青)。

発色性の対比染色

ヘマトキシリンは、IHCにおける一般的な核対比染色であるだけでなく、診断組織学で用いられる主要な色素の一つです。酸化ヘマトキシリンは、アルミニウムイオンと結合すると、活性金属-色素複合体を形成します。この複合体は核ヒストン上のリジン残基に結合することによって、哺乳動物の細胞核を青色に染色します。これは、核酸を標的とした核酸染色とは異なります。

Nuclear fast red (別称: ケルネクトロート色素)も核染色のひとつです。この色素とヘマトキシリンの違いとして、Nuclear fast redを使用すると、わずか5分で核酸の染色(赤色に染色)が完了します。一方、ヘマトキシリンを用いた場合、同じ染色に1時間かかります。メチルグリーン も核酸色素の一種であり、核酸を緑色に短時間で染色します。


蛍光性の対比染色

DAPI(4', 6-ジアミジノ-2-フェニルインドール)およびヘキストは、蛍光IHCに用いられる一般的な核色素です。これらの色素はDNAにインターカレートして、UV励起下で強い青色の染色を行います。ヨウ化プロピジウムも核酸色素の一種であり、核酸の赤染色に一般的に使用されています。

ファロイジンは真菌毒素であり、繊維状アクチンに結合しますが、球状(フリー)アクチンには結合しません。一般に、タンパク質は、フルオロフォアを修飾し、、蛍光顕微鏡法において細胞内アクチン細胞骨格の標識に使用します。使用する色は結合されるフルオロフォアに依存します。多種多様なフルオロフォア結合のファロイジン製品が販売されています。


対比染色の一覧表

一般的な対比染色および各標的
タイプ色素標的カラー
発色性ヘマトキシリン青から紫
発色性Nuclear fast red (ケルネクトロート)核酸
発色性メチルグリーン核酸
蛍光性ヘキスト染色核酸
蛍光性4 ', 6-ジアミジノ-2-フェニルインドール(DAPI)核酸
蛍光ヨウ化プロピジウム核酸
蛍光フルオロフォアタグ付きファロイジン繊維状アクチンフルオロフォア特異的

For Research Use Only. Not for use in diagnostic procedures.