Bigfoot Spectral Cell Sorter 성능 및 애플리케이션 데이터

성능 데이터는 Bigfoot Spectral Cell Sorter가 형광 신호를 정확하고 정밀하게 해결함을 보여줍니다. 애플리케이션 데이터는 면역표현형분석 및 마커 발현 연구에 필요한 게이팅 분해능 및 분류 순도의 수준을 보여줍니다.

 

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8-peak bead 분해능

Spherotech™ 8-peak bead는 Bigfoot Spectral Cell Sorter의 주요 채널에서 실행되며, 좁고 잘 정의된 피크를 보여줍니다.

주요 채널에서 8-peak bead 분해능.

위의 Treg 게이트와 같은 게이트된 분류 영역을 사용하여 6개 집단을 분류하였습니다. CD8+ 및 세포독성 T 세포, B 세포, NK 세포, 단핵구 및 Treg. 분류 후 검증을 위해 각 채취 튜브는 순도를 위해 재분석되었습니다. 분류 집단(이 중 4개는 그림에 나와 있음)을 분석한 결과 Bigfoot Spectral Cell Sorter의 spectral unmixing 기능이 높은 효율 및 98% 이상의 순도로 결과를 산출한 것으로 나타났습니다. 이러한 분류 성능은 기존 보상(traditional compensation)을 사용하는 분류 방법과 동일하며, 실험 복잡성이 증가함에 따라 사용자가 두 가지 방법 사이를 원활하게 전환할 수 있습니다.

채취 튜브의 재분석.

그런 다음, 채취 튜브의 순도를 위해 재분석하여 (A) CD8 T 세포(CD8strong), (B) 단핵구(CD14+), (C) B 세포(CD19+CD20+) 및 (D) 세포독성 T 세포(CD8dimCD56+)으로 잘 정의된 집단을 보여주었습니다.


light scatter를 이용한 혈액 세포 분화

편광화는 유세포분석에서 종종 무시되는 레이저 광원의 속성이지만, 특정 세포 유형을 구별하는 데 유용할 수 있습니다. 예를 들어, 인체 혈액의 호산구 과립백혈구는 복굴절 특성 때문에 side scatter(SSC) 검출기에서 상대적으로 더 높은 수준의 탈편광 레이저 광선을 나타냅니다. 또한 말라리아 진단 및 해양 플랑크톤 연구에 편광 분석이 유용한 것으로 나타났습니다.

 

Bigfoot Cell Sorter의 모든 모델에는 추가적인 FSC(front scatter) 및 탈편광 광검출을 위한 SSC 검출기가 포함됩니다. 이 그림은 SSC 탈편광 검출기를 사용하여 용해된 human whole blood에서 호산구를 식별하는 방법을 보여줍니다. 이러한 분화는 염색이 필요하지 않아 세포가 방해를 받지 않고 fluorophore 비용이 절약됩니다. CD16에 대한 염색을 추가하면 다른 세포 집단도 식별됩니다.

light scatter 및 CD16을 사용한 혈액 세포 집단의 분석

용해된 정상적인 human whole blood을 Bigfoot Spectral Cell Sorter에서 획득하여 분석했습니다. (A) SSC x SSC 극성 도트 플롯은 더 높은 탈편광 SSC를 사용하여 빨간색으로 강조하여 호산구를 나타내었습니다. (B) FSC x SSC 윤곽 플롯은 다른 셀에 비해 크기가 커서 FSC 및 SSC 신호가 높은 호산구를 나타냅니다. (C) 비염색 샘플은 BV510 채널에서 호산구의 자가형광을 보여줍니다. (D) CD16 BV510 염색 세포의 도트 플롯은 CD16 음성 호산구를 표시하고 CD16 발현을 기반으로 다른 세포 집단을 강조 표시하였습니다.


재판매용이 아닙니다. Super Bright Polymer Dyes는 Becton, Dickinson and Company의 허가를 받아 판매됩니다.
연구용으로만 사용하십시오. 진단용으로는 사용할 수 없습니다.