Dicer siRNA

BLOCK-iT™ Dicer 키트는 RNAi 녹다운(knockdown)에 사용할 매우 효과적인 siRNA 풀을 제공합니다. Diced siRNA(d-siRNA) 풀은 같은 타겟으로 여러 가지 실험을 완료할 수 있는 비용 효율적인 방식입니다. Dicer를 사용한 실험은 강력한 녹다운 결과를 제공하며 여러 개의 관심 대상 유전자의 RNAi 효과를 평가하거나 마이크로어레이 분석의 후속 작업을 할 때 특히 유용합니다. RNAi 효과를 확인하고 나면 합성 또는 벡터 방식을 포함해 추가로 평가할 수 있습니다.

• Dicer 및 siRNA 풀(pool) 생성 시약 주문하기

• 녹다운으로 다루기 힘든 유전자를 다른 방식으로 억제합니다.
• 여러 가지 유전자를 연구하는 동시에 여러 개의 합성 염기서열을 주문하는 비용은 들지 않습니다.
• 각 반응에서 생성된 대량의 d-siRNA를 사용하여 여러 개의 형질 주입 실험을 동시에 진행할 수 있습니다.
• 특정 타겟 부위를 알아내는 것이 어려운 경우 타겟 mRNA를 녹다운합니다.
• 임의의 유전자 또는 유전자 계열에서만 나타나는 독특한 d-siRNA 풀을 생성하여 특히 강력한 녹다운을 얻어낼 가능성을 극대화합니다.

BLOCK-iT™ Complete Dicer RNAi 키트를 사용하면 긴 dsRNA를 생성하고 이를 d-siRNA 풀로 절단하는 데 필요한 모든 기술과 시약을 제공합니다. 이 키트 내에 d-siRNA 풀을 생성 및 정제하고 강력한 유전자 억제를 위해 포유류 세포를 형질 주입하는 데 필요한 모든 것이 포함되어 있습니다(그림 1).

그림 1. 풀을 Dicer로 절단하면 성공적인 RNAi를 얻을 수 있습니다. siRNA를 Dicer 절단한 풀(d-siRNA)은 β-갈락토시다아제(β-gal) 또는 루시페라아제 dsRNA 전사체로부터 생성되며 유전자 활동만 독점적으로 녹다운하는 dsiRNA의 기능을 측정하는데 사용됩니다. GripTite™ 293 MSR 세포가 다음과 같이 공동 형질주입되었습니다. 양성 대조군 플라스미드 pcDNA™1.2/V5-GW/lacZ 및 pcDNA™5/FRT/luc가 각각 β-갈락토시다아제 및 루시페라아제 리포터를 발현하고, 양성 대조군 플라스미드에 lacZ d-siRNA 50ng가 더해지거나 양성 대조군 플라스미드에 luc d-siRNA가 더해집니다. 각 리포터(reporter)에 대하여, 상응하는 d-siRNA가 성공적으로
리포터 활동의 발현을 줄인 반면 다른 전사체에서 유래한 d-siRNA의 경우 발현에 영향이 없었습니다.

BLOCK-iT™ RNAi Dicer Kit는 시중에 판매되는 시스템 중 재조합 Dicer 효소, 고품질 d-siRNA 정제 모듈 및 RNAi에 가장 대중적인 형질 주입 시약인 Lipofectamine™ RNAiMAX까지 포함한 유일한 시스템입니다. In vitro Dicer 절단 기술을 사용하여 유전자 발현을 강력하게 표적화 억제한다는 목표를 달성하며, 이는 세 가지 간단한 단계를 거쳐 d-siRNA 풀을 생성함으로써 쉽게 이루어냅니다(그림 2). 합성 올리고를 설계하고 주문할 필요가 없습니다. 타겟 유전자의 PCR 파편부터 매우 효율적인 siRNA 풀까지 생성에 필요한 모든 것이 키트마다 빠짐없이 들어 있습니다. 탁월한 순도를 자랑하는 재조합 Dicer 효소의 크기를 더 크게 맞춤 주문할 수도 있습니다.