B-27添加剂

将近20年的时间内，研究人员发布的一直是采用B-27添加剂的实验结果。 B-27无血清添加剂是第一款商品化的神经细胞培养无血清添加剂，适用于大鼠海马和皮质神经元的长期培养。 自B-27添加剂问世以来，其文献历史显示，研究人员不断扩展了这些添加剂的使用，远超过其最初的应用领域。

阅读文献了解Wisconsin大学Madison团队如何使用不含胰岛素的 B-27用于心肌分化研究。

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B-27 神经培养添加剂组分包含什么？

B-27 添加剂是一款成分确定的无血清添加剂，包含抗氧化剂、蛋白、维生素和脂肪酸，这些组分以最优比例混合后可支持神经细胞的培养。原始的无血清神经细胞培养添加剂配方由Gregory Brewer博士 和同事研发得到，可参考文献 Brewer et al., J Neuroscience Res 35: 567-576, 1993 and Brewer and Cotman, Brain Res 494: 65-74, 1989 [1,2].

赛默飞优化了Brewer博士的配方，可提供便于使用、经过批量测试的B-27添加剂，以支持全球的神经科学研究者。B-27神经培养添加剂系列还包括去除维生素A的配方和去除胰岛素的配方。

视频：认识原代神经元细胞培养的先驱

采访生物医学工程研究员 Greg Brewer 博士


B-27添加剂选择指南

选择下面的相关应用方向以查找和订购推荐的 B-27 添加剂以供您的研究使用。

所有 Gibco 神经元细胞培养试剂都经过优化，可作为一个完整的培养基系统协同工作。 了解有关Gibco 神经细胞培养基或原代神经元的更多信息。

表1. 基于细胞类型和应用的B-27添加剂的选择指南

应用产品货号
产前/胎儿原代神经元的维持和生长B-27 Plus 添加剂A3582801
产后和成人脑神经元的维持和生长B-27 Plus 添加剂A3582801
神经干细胞的扩增培养去除维生素A的B-27添加剂12587010
干细胞来源神经元的分化和维持B-27添加剂17504044
干细胞来源神经元的生长及维持B-27 Plus 添加剂A3582801
氧化应激及损伤、凋亡的研究，及自由基对神经元损伤的研究去除抗氧化剂的B-27添加剂10889038
胰岛素分泌不足或胰岛素受体的研究去除胰岛素的B-27添加剂A1895601
电生理学研究B-27 Plus神经培养系统A3653401

促进神经元存活、成熟和神经网络活动

维持原代神经元的健康长期培养（三周及以上）可能具有挑战性，因为这些细胞非常敏感，并且在培养过程中往往会经历渐进式细胞死亡。 B-27 Plus 补充剂可促进培养中原代神经元的存活和成熟。

在 B-27 Plus 补充剂中培养三周的原代大鼠皮层神经元表现出高活性的神经突网络（左）和突触蛋白的高表达（右）

图 1. 在 B-27 Plus 补充剂中培养三周的原代大鼠皮层神经元表现出高活性的神经突网络（左）和突触蛋白的高表达（右）。

认识新一代 B-27 添加剂

对更可靠的生物学相关模型的需求已经增加，因此也需要新一代培养体系，该系统可以在体外更长时间促进功能神经元的成熟并维持最佳密度。

由 B-27 Plus 添加剂和 Neurobasal Plus 培养基组成的下一代 Gibco B-27 Plus 神经元培养系统通过原材料和工艺升级以及微小的配方修改优化了经典的培养环境。 总之，这些微小的变化在初级神经元的维持和成熟方面产生了巨大的结果，从而提供了以下优化的好处：

  • 与竞争对手相比，神经元存活率提高了 50% 以上
  • 促进神经突生长
  • 促进电生理活动和成熟

了解有关 B-27 Plus 神经元培养系统的更多信息

使用 B-27 添加剂推进 3D 神经细胞培养

复杂的 3D 模型正在成为研究胚胎发育和疾病的首选系统，相比传统的 2D 培养更准确地重现体内神经结构和生理学功能。 B-27 神经元培养添加剂已拓展到大量不同的应用方向，涵盖广泛的细胞类型。

神经干细胞 (NSC) 在 B-27添加剂中形成球状体

图 2. 神经干细胞 (NSC) 在 B-27添加剂中形成球状体。 从 Gibco 人Episomal iPSC 系或 H9 hESC 产生的 NSC 在由含有B-27 添加剂的Neurobasal培养基或 由B-27 Plus 神经元培养系统组成的成熟培养基中培养。 接种在 Gibco Nunclon Sphera 96 孔微孔板中的细胞在 24 小时内形成了单个神经球状体。

3D培养中使用B-27添加剂的文献

科学家们发现 B-27 添加剂可以支持神经细胞和其他细胞类型的3D培养，从而能够使用 3D 细胞培养进行各种实验。

表 2. 在 3D 类器官或球状体培养中使用 B-27 添加剂的文献。

细胞类型文献标题引用
脑、多能干细胞Modeling Parkinson’s disease in midbrain-like organoids Smits et al. NPJ Parkinsons Dis. 2019;5;5 (1)1–8.
Modeling G2019S-LRRK2 sporadic Parkinson's disease in 3D midbrain organoids Kim et al. Stem Cell Reports. 2019;12(3):518–531.
乳腺A CD146 FACS protocol enriches for luminal keratin 14/19 double positive human breast progenitors Ísberg et al. Sci Rep. 2019; 9:14843.
结肠Modeling the effect of prolonged ethanol exposure on global gene expression and chromatin accessibility in normal 3D colon organoids Devall et al. PLoS ONE. 2020;15(1):e0227116.
食道Esophageal 3D organoids of MPV17-/-mouse model of mitochondrial DNA depletion show epithelial cell plasticity and telomere attrition Guha et al. Oncotarget. 2019;10(58):6245–6259.
输卵管Chronic Chlamydia infection in human organoids increases stemness and promotes age-dependent CpG methylation Kessler et al. Nat Commun. 2019; 0(1):1–4.
心脏Generation of Heart Organoids Modeling Early Human Cardiac Development Under Defined Conditions Israeli et al. (2020), BioRxiv 10.1101/2020.06.25.171611
小肠Extracellular vesicle release from intestinal organoids is modulated by Apc mutation and other colorectal cancer progression factors Szvicsek et al. Cell Mol Life Sci. 2019; 76:2463–2476.
肾脏Stem cell-derived kidney organoids: engineering the vasculature Koning et al. Cell Mol Life Sci. 2020;77(12):2257–73.
Organoids as a new model for improving regenerative medicine and cancer personalized therapy in renal diseases  Grassi et al. Cell Death Dis. 2019; 10(3):1–5.
肺Modeling of fibrotic lung disease using 3D organoids derived from human pluripotent stem cells Strikoudis et al. Cell Rep. 2019;27(12):3709–3723.
胰腺Prostate organoid cultures as tools to translate genotypes and mutational profiles to pharmacological responses Pappas et al. J Vis Exp. 2019;152:e60346
视网膜Transcriptome-based molecular staging of human stem cell-derived retinal organoids uncovers accelerated photoreceptor differentiation by 9-cis retinal Kaya et al. Mol Vis. 2019; 25:663–678.
汗腺Sweat gland organoids contribute to cutaneous wound healing and sweat gland regeneration Diao et al. Cell Death Dis. 2019;10:238.

文献引用

  1. Brewer, G.J.; Torricelli, J.R.; Evege, E.K.; Price, P.J. Optimized survival of hippocampal neurons in B27-supplemented Neurobasal, a new serum-free medium combination.Neurosci Res. 1993 Aug 1;35(5):567-76. doi: 10.1002/jnr.490350513.
  2. Brewer, G.J.; Cotman, C.W. Survival and growth of hippocampal neurons in defined medium at low density: advantages of a sandwich culture technique or low oxygen. Brain Res. 1989 Aug 7;494(1):65-74. doi: 10.1016/0006-8993(89)90144-3.

B-27添加剂的相关资源和支持

引用次数最多的神经细胞培养添加剂

Gibco专有产品B-27添加剂系列是文献中应用最广泛的神经细胞添加剂。 B-27添加剂曾在数千篇同行评审文献中引证过，适用于各种不同的细胞类型，且已在多种不同的神经性疾病模型中使用过。

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标准应用/原代神经元

应用产品名称目录编号
神经元生长及维持B-27无血清补充剂17504044

干细胞与前体细胞

应用产品名称目录编号
干细胞增殖B-27补充剂，减去维生素A12587010
干细胞分化B-27添加剂、无外源成分的CTS™A14867-01

 

专业应用

应用产品名称目录编号
须满足无外源化合物成分要求的研究B-27添加剂、无外源成分的CTS™A14867-01
氧化应激及损伤、凋亡的研究，
，以及自由基对神经元损伤的情形		B-27添加剂,
无 AO (抗氧化剂)		10889038
胰岛素分泌不足或胰岛素受体的研究B-27补充剂，
减去胰岛素		A1895601
电生理学研究B-27电生理学试剂盒A1413701
视网膜神经节细胞的生长和扩增B-27定制补充剂0080085SA
标准/原代神经元

标准应用/原代神经元

应用产品名称目录编号
神经元生长及维持B-27无血清补充剂17504044
干细胞/前体细胞

干细胞与前体细胞

应用产品名称目录编号
干细胞增殖B-27补充剂，减去维生素A12587010
干细胞分化B-27添加剂、无外源成分的CTS™A14867-01

 

专业应用

专业应用

应用产品名称目录编号
须满足无外源化合物成分要求的研究B-27添加剂、无外源成分的CTS™A14867-01
氧化应激及损伤、凋亡的研究，
，以及自由基对神经元损伤的情形		B-27添加剂,
无 AO (抗氧化剂)		10889038
胰岛素分泌不足或胰岛素受体的研究B-27补充剂，
减去胰岛素		A1895601
电生理学研究B-27电生理学试剂盒A1413701
视网膜神经节细胞的生长和扩增B-27定制补充剂0080085SA

表1. Gibco神经细胞培养试剂应用文献中引用的细胞类型和疾病模型

原代细胞脑干、小脑、皮质、多巴胺能、DRG、肠神经、GABAergic、谷氨酸能、海马、运动、神经祖细胞、胰腺、副交感神经、视网膜、中膈、纹状体、黑质体、交感神经节
干细胞诱导多功能干细胞，神经前体，神经干细胞，神经上皮
神经胶质细胞星形胶质细胞、小神经胶质细胞、少突胶质细胞、放射状胶质细胞、卫星状胶质细胞、施万细胞
疾病模型阿尔茨海默病、肌萎缩性脊髓侧索硬化症 (ALS)、脑部肿瘤、脑性瘫痪、癫痫、神经胶质瘤、亨廷顿氏病、多发性硬化症、帕金森病、精神分裂症、脊髓损伤、中风

细胞培养资源

仅供科研使用，不可用于诊断目的。