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选择要使用的最佳 SPE 固定相取决于分析物的物理/化学性质(例如 pH、pKa 和溶解度 log P)。有多种 SPE 固定相可供选择,包括:反相、正相、离子交换和混合模式,其中混合模式是正相和反相的混合。此页面可帮助您确定应使用哪一种相以及何时使用。
表 1 显示了每种相的基本分离机制,而图 1 则显示了相的选择首先要确定样品是否可溶于水或有机溶剂、分析物的特性,以及每种情况所使用的 SPE 固定相。图 1 还显示了用于不同应用的典型 SPE 固定相。图 1 是 SPE 相选择流程图,显示了根据分析物的溶解度和电荷应使用哪种 Thermo Scientific SPE 相。
表格 1:SPE 相分离的机制 | |||
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反相 | 正相 | 离子交换 | |
保留机制 |
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分析物特性 |
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样品基质 |
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洗脱注意事项 | 破坏与具有足够强的非极性的溶剂之间的相互作用 | 破坏与具有更强极性的溶剂之间的相互作用 | 通过以下方式破坏相互作用:
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常见吸附剂 |
| 裸硅胶、氧化铝、键合硅胶(氨丙基、二醇基)Florisil | 键合硅胶(SAX、WAX;SCX、WAX) |
图 1. 显示了相(吸附剂),具体取决于样品是否可溶于极性、中等极性或非极性有机溶剂,或者样品是否可溶于水(如果样品是离子型或非离子型)。
聚合物 | 反相硅胶相 | 正相硅胶相 | 离子交换相 |
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SPE 相 | 功能 | 表面积 | 粒径 | 孔径 | 分析物 | 典型应用 |
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SOLA & SOLAµ HRP | 使用吡咯烷酮对苯乙烯-二乙烯基苯共聚物材料进行表面官能化 | 700 至 900m2/g | 19 至 25µm | 30 至 110Å | 保留极性和非极性分析物 |
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HyperSep Retain PEP | 脲基团改性的二乙烯基苯填料表面 | 550 – 750m2 /g | 40 – 60μm | 55 – 90Å | 保留极性和非极性分析物 |
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使用非极性相互作用进行分离:范德华力或分散力
SPE 相 | 功能 | 表面积 | 粒径 | 孔径 | 分析物 | 典型应用 |
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HyperSep C18 | 高保留能力的烷基键合硅胶相 | 470 – 530m2 /g | 40 – 60μm | 60Å | 保留非极性到中等极性化合物 |
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HyperSep C8 | 保留能力更弱的替代C18方案 | 470 – 530m2 /g | 40 – 60μm | 60Å | 保留非极性到中等极性化合物 | |
HyperSep 苯基 | 硅基材料,对碱性化合物具有替代选择性 | 470 – 530m2 /g | 40 – 60μm | 60Å | 结构中含有苯环的芳香族化合物 |
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混合模式相包括两种官能团:非极性和离子交换,或疏水性和离子保留,非常适用于结构复杂的样品。
SPE 相 | 功能 | 表面积 | 粒径 | 孔径 | 分析物 | 典型应用 |
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SOLA & SOLAµ SCX(混合模式) | 使用磺酸盐基团对新一代苯乙烯-二乙烯基苯共聚物材料进行表面官能化 | 550 – 750m2 /g | 19 至 25µm | 30 至 110Å | 一种多功能聚合物材料,可增强对弱碱的保留 |
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SOLA & SOLAµ SAX(混合模式) | 使用季氨基团对新一代苯乙烯-二乙烯基苯共聚物材料进行表面官能化 | 550 – 750m2 /g | 40 – 60μm | 55 – 90Å | 适用于保留弱酸的聚合物材料 |
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SOLA & SOLAµ WCX(混合模式) | 使用羧酸基团对新一代苯乙烯-二乙烯基苯共聚物材料进行表面官能化 | 550 – 750m2 /g | 19 至 25µm | 30 至 110Å | 一种多功能聚合物材料,可增强对强碱的保留 |
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SOLA & SOLAµ WAX(混合模式) | 使用叔胺基团对新一代苯乙烯-二乙烯基苯共聚物材料进行表面官能化 | 550 – 750m2 /g | 19 至 25µm | 30 至 110Å | 一种多功能聚合物材料,可增强对强酸的保留 |
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HyperSep Retain-CX | 用于保留碱性化合物的多用途聚合物材料 | 550 – 750m2 /g | 40 – 60μm | 55 至 90Å | 一种多功能聚合物材料,可增强对碱性化合物的保留 | 生物基质中的一系列违禁药物 |
HyperSep Retain-AX | 用于保留酸性化合物的多用途聚合物材料 | 550 – 750m2 /g | 40 – 60μm | 55 – 90Å | 一种多功能聚合物材料,可增强对酸性化合物的保留 | 生物基质中的各种酸性违禁药物,如 THC 及其代谢物 |
HyperSep Hypercarb | 用于保留高极性化合物的独特材料 |
| 保留强极性化合物 | 难题分析物的理想选择 |
SPE 相 | 功能 | 表面积 | 粒径 | 孔径 | 分析物 | 典型应用 |
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HyperSep Silica | 一种极性吸附剂,主要用于保留非极性基质中分析物 | 530m2/g | 40 – 60μm | 60Å | 从非极性溶剂中萃取分析物,例如碳氢化合物、极性较小的酯类和醚类 |
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HyperSep Florisil | 氧化镁包裹的硅胶 | 289m2/g | 40 – 60μm | 60Å | 从非极性基质中分离极性化合物 |
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HyperSep Cyano | 疏水性较低的硅胶基质材料,比硅胶或二醇基具有更好的保留性。 | 470 – 530m2 /g | 40 – 60μm | 60Å | 从非极性基质中保留极性化合物 |
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HyperSep Diol | 用于萃取极性化合物的硅胶基质材料 | 470 – 530m2 /g | 40 – 60μm | 60Å | 保留极性化合物 | 正相萃取和净化极性化合物 |
HyperSep Aminopropyl | 硅胶基质材料,可用作极性吸附剂和弱阴离子交换剂 | 470 – 530m2 /g | 40 – 60μm | 60Å | 石油分馏、糖类、药物和药物代谢物 |
SPE 相 | 功能 | 表面积 | 粒径 | 孔径 | 分析物 | 典型应用 |
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HyperSep SAX(强阴离子交换剂) | 用于萃取弱酸的强阴离子交换填料 | 470-530m2 /g | 40 – 60μm | 60Å |
| 去除
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HyperSep SCX(强阳离子交换剂) | 用于提取带电荷的碱性化合物的强阳离子交换吸附剂 | 470-530m2 /g | 40 – 60μm | 60Å | 从水性基质和非水溶性基质中萃取带正电荷的化合物 | 萃取抗生素、药物、有机碱、氨基酸、儿茶酚胺类和除草剂 |
SPE 相 | 功能 | 表面积 | 粒径 | 孔径 | 分析物 | 典型应用 |
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HyperSep Verify-CX | 反相 C8 基团和强阳离子交换剂 | 470-530m2 /g | 40 – 60μm | 60Å | 用于改善碱性违禁药物分析的非极性和阴离子特性 | 生物基质中的一系列碱性违禁药物 |
HyperSep Verify-AX | 反相 C8 基团和强阴离子交换剂 | 470-530m2 /g | 40 – 60μm | 60Å | 分析酸性违禁药物 | 生物基质中的各种违禁药物,包括 THC 及其代谢物 |
固定相的粒径和分布各不相同,可以装在纯化柱、96 孔板甚至移液器吸头中。
表 3.用于不同 SPE 纯化柱尺寸的典型吸附剂质量、样品量和洗脱体积
纯化柱体积 | 吸附剂质量 | 样品量 | 最低洗脱体积 |
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1mL | 50-100mg | 2.5-10mg | 100-200mL |
3mL | 500mg | 25-100mg | 1-3mL |
6mL | 500-1000mg | 25-100mg | 2-6mL |
12mL | 2000mg | 100-200mg | 10-12mL |
溶剂的选择取决于样品基质的性质和吸附剂机制。此表格列出了 SPE 中常用溶剂的不同极性。
萃取分析物所用溶剂的选择取决于分析物的性质。