NanoDrop 分光光度计的在线和可下载材料

本节提供各种手册、宣传册、应用资料、技术指南、视频、网络讲座以及其他资源,可帮助您充分利用 Thermo Scientific NanoDrop One/OneC、Eight 或 Lite Plus 分光光度计或者 3300 荧光光度计。

 

有关 NanoDrop 2000/2000c、8000、Lite 和 1000 分光光度计的类似材料,请参阅本页底部的已停产 NanoDrop 仪器资源 。


NanoDrop 产品选择指南

Thermo Scientific NanoDrop 仪器为微量分析设定了标准,可提供准确的核酸和蛋白质样品浓度以及样品纯度信息,深受世界各国科学家的信赖。

使用 NanoDrop One 在 205 nm 波长下对蛋白质和肽制备物进行定量分析

生命科学家们使用 A205 预编程直接吸光度法,在 Thermo Scientific NanoDrop One /Oneᶜ 微量紫外-可见分光光度计上定量分析肽和蛋白质样品。

常见问题:NanoDrop One 样品污染物鉴定

Thermo Scientific NanoDrop One 微量紫外-可见分光光度计仅需 1-2 µL 样品即可对 DNA、RNA 和蛋白质样品进行准确的定量分析,从而帮助研究科学家在下游应用中获得成功。

生物制药和生物科学领域的紫外-可见分光光度计解决方案

了解生物制药和生物科学研究中紫外-可见分光光度法的新应用和进展。免费注册即可访问所有五个部分。

研究热点:NanoDrop 分光光度计用于 SARS-CoV-2 研究

SARS-CoV-2(COVID-19 的致病病毒)是一种具有包膜的不分节段单股正链 RNA (+ssRNA) 病毒,属于 β 冠状病毒。SARS-CoV-2 病毒的生命周期尚未确定,这是研究感染进展的关键步骤。

 

NanoDrop 分光光度计是 Thermo Fisher Scientific 研究 SARS-CoV-2 的众多工具之一,在传染病研究中发挥了重要作用,因为定量病毒 RNA/DNA 与鉴定污染物是确保下游结果准确的必要步骤。

简单、方便、快速的核酸和蛋白质定量

NanoDrop 定量技术的突出特点或许正是使用简单、便捷。开创性的 NanoDrop 基座系统有助于显著减少分析所需的样品体积并简化操作。只需移取一滴(约 1.0-2.0 µL)DNA、RNA 或蛋白质样品到基座上,然后下拉检测臂即可。不需要使用比色皿或毛细管,结果将在几秒钟内显示。

1.打开检测臂,将样品直接移取到基座上。

2.关闭检测臂。将自动生成样品液柱。

3.基座移动,自动调整到合适光程。

4.测量完成后,只需用实验室无绒擦巾擦拭表面,然后即可继续分析下一个样品。


通过紫外吸光度法准确定量核酸和蛋白质

NanoDrop 分光光度计的设计基于紫外-可见光谱(UV-Vis)吸光度的原理。核酸的吸光度峰位于 260 nm 处。纯化蛋白质的吸光度峰位于 280 nm 处,而不含色氨酸及酪氨酸残留的肽和蛋白质的吸光度峰位于 205 nm 处。许多提取方案残留污染物的吸光度峰位于 280 nm 处或 230 nm 处。

光信号的产生

核酸(DNA 和 RNA)和蛋白质的光度测量基于其固有的吸光特性。当测量吸收光谱时,核酸的特征吸光度峰位于 260 nm 处。

核酸和蛋白质样品的定量

根据在所需波长下测量的吸光度值,使用比尔-朗伯方程自动计算核酸和蛋白质的浓度,其中:

  • c = 摩尔浓度 (M)
  • A = 以吸光度单位 (AU) 表示的紫外吸光度
  • e = 波长相关的摩尔吸光系数(或消光系数),单位为 M-1cm-1
  • L = 以厘米为单位的光程长度

根据比尔-朗伯方程可知,对于低浓度样品,光程越长,准确度和信噪比越高。NanoDrop 仪器能够自动优化液体样品柱的长度,从而可在较宽的浓度范围内实现出色的准确度。

对比参考仪器验证的 NanoDrop One dsDNA 定量准确度。制备浓度范围为 3-28,000 ng/µL 的一系列 dsDNA 稀释液,使用 NanoDrop One 和 Evolution 300 分光光度计在 260 nm 下进行分光光度法定量。(A) 绘制了整个仪器浓度范围内的线性度对比图。回归线表明,NanoDrop One dsDNA 浓度结果与在参照仪器 Thermo Scientific Evolution 300 分光光度计上获得的结果具有良好的一致性(R2 = 0.9991)。(B) 还绘制了低浓度范围 (3-495 ng/μL) 内的特写线性度对比图。回归线表明,NanoDrop One 与 Evolution 300 的结果密切相关(R2 = 1),且检测范围的下端显示出极高的线性度。有关方法说明和更多详细数据,请参阅 NanoDrop One 核酸技术指南

核酸和蛋白质样品的纯度分析

样品纯度可通过不同波长下的吸光度比值来进行评估。样品污染可能会导致核酸浓度过高和/或下游过程或测量结果不准确。

 

紫外吸光度法的关键纯度比值

比值

分析物

视为“纯净”

可能导致比值异常的因素

A260/A280

核酸

DNA:~1.8
RNA:~2.0

低比值指示有污染物:

·    蛋白质

·    来自提取方案的残留苯酚或其他试剂

A260/A230

核酸

DNA/RNA:~2.0­2.2

低比值指示的污染物:

·    蛋白质

·    碳水化合物残留(通常出现在植物中)

·    核酸提取中的残留苯酚

·    胍类残留(通常用于色谱柱试剂盒中)

·    用于沉淀的糖原

高比值指示的因素:

·    空白测量问题

A260/A280

蛋白质

~0.6

高比值指示的污染物:

·    核酸

除纯度比值外,杂质还可能改变光谱曲线,导致峰谷偏移(如图所示)。

污染物导致光谱曲线发生偏移

不含有染污物的纯化 DNA 样品的光谱(A,红色),以及含胍类(B,绿色)和苯酚(C,棕色)污染物的同一样品的光谱。

运行 Acclaro 样品智能软件的 NanoDrop 仪器可以使用此类全光谱数据来鉴别各种污染物,如特征中所述。


NanoDrop One/Oneᶜ 分光光度计的文档

NanoDrop 分光光度计视频


NanoDrop 分光光度计网络讲座

网络讲座:使用 NanoDrop One 紫外-可见分光光度计进行蛋白质样品评估

蛋白质样品评估是许多蛋白质工作流程中的一个重要步骤。本网络讲座解释了 NanoDrop 仪器如何简化该过程,比较了现有的不同蛋白质检测方法,并回顾了准确蛋白质定量的最佳实践。

网络讲座:mRNA 疫苗的开发和制造,以及 NanoDrop Eight 在此过程中的作用

该网络讲座简要讨论了 mRNA 疫苗的历史和工作流程,并介绍了 NanoDrop 分光光度计如何帮助研究人员和生产工程师评估核酸浓度和纯度,同时遵守 21 CFR Part 11 法规要求。

网络讲座:保持制药 QA/QC 实验室的合规性

了解新的软件工具如何帮助制药公司执行高度准确的 QA 测试,同时确保整个药物开发过程中的数据完整性。

网络讲座:NanoDrop 创新和课堂:激励下一代科学家

利用新技术推动当今教育行业的发展。了解学校教师如何将 NanoDrop 仪器集成到课堂和实验室中,从而为学生提供学习行业领先技术的机会。

网络讲座:为下游 GMO 检测定量分析大豆 DNA 提取物

本网络讲座将简要介绍如何利用 qPCR 进行 GMO 检测,并重点介绍 NanoDrop Eight 分光光度计如何帮助确保反应成功。

NanoDrop 分光光度计的支持和教育资源

在美国和加拿大,如需技术支持,请致电 877-724-7690(按 4),或发送电子邮件至 nanodrop@thermofisher.com,联系 NanoDrop 技术支持。如需国际协助,请发送电子邮件至 nanodrop@thermofisher.com 或联系您当地的 NanoDrop 经销商

 

通过查阅上述文档、文献、视频和网络讲座,您应该能够自行解决许多技术支持问题。此外,我们还提供许多免费在线教育材料,包括这些 涵盖光谱学、蛋白质生物学以及核酸定量的学习中心和网站页面。

 

光谱分析、元素与同位素分析学习中心

深入了解旨在为工业、教育、环境和健康市场提供快速、高效的定量和定性分析的技术。与核酸和蛋白质定量相关的主题包括:NanoDrop One 教学动画,以及针对制药行业的光谱学、流变学、挤出和 X 射线解决方案

蛋白质生物学学习中心

我们免费提供各种蛋白质分析方法和技术的简介,包括蛋白质分析的相关文章、视频、引导式学习教程等资源以及学习方法。蛋白检测方法综述可能是较好的入门材料。

RNA/DNA 定量页面

RNA/DNA 定量页面对比介绍用于进行核酸定量分析的紫外-可见光度法与荧光测定法,并比较了 NanoDrop 和 Qubit 仪器以及用于进行这两种测量的酶标仪。

已停产 NanoDrop 仪器的资源

查找有助于您充分利用 NanoDrop 2000/2000c、8000、Lite 或 1000 分光光度计的手册、宣传册、应用资料、技术指南、视频和其他资源。

NanoDrop 1000 分光光度计的资源

NanoDrop 2000/2000c 分光光度计的资源

NanoDrop 3300 分光光度计的资源

NanoDrop 8000 分光光度计的资源

NanoDrop Lite 分光光度计的资源