帕金森病 (PD) 是研究得最多的神经系统疾病之一，这种疾病既有神经系统运动并发症，又伴有全身性非运动并发症。目前 PD 的发病机制和病因还有待查明，同时缺乏适当的治疗和治愈手段。尽管目前有多种药物能够帮助缓解运动症状。帕金森病的发病机制和疾病进展还需进一步研究。研究表明，通常泛素-蛋白酶体系统 (UPS) 缺陷、线粒体功能障碍、氧化应激以及异常或错误折叠蛋白质积聚是引发这种疾病的主要潜在途径。


帕金森病的研究靶标与抗体

遗传因素一直是研究帕金森病发病的重点。研究人员已发现几种致病基因，这些基因的突变可导致常染色体显性 (AD) 或常染色体隐性 (AR) 的帕金森病。

一抗PARK遗传特征
α 突触核蛋白PARK1AD
ParkinPARK2AR
PGP9.5PARK5AD
PINK1PARK6AR
DJ-1PARK7AR
LRRK2PARK8AD
ATP13A2PARK9AR
GIGYF2PARK11AD
HTRA2PARK13AR
PLA2G6PARK14AR
FBXO7PARK15AR
VPS35PARK17AD
eIF4GPARK18AD
DNAJC6PARK19AR
突触伸蛋白1PARK20AR
DNAJC13PARK21AD

虽然 PD 与其他神经系统具有不同的临床和病理特征，但是它们的病因可能是相同的（如突变基因、蛋白质、氧化应激和线粒体功能障碍）。证据表明，SOD1、OPTN、DRP1、SPG11 和 Ataxin 3 是神经保护信号级联反应的关键组成部分。这些蛋白的任何突变都可能导致神经退行性疾病（如阿尔茨海默病、肌萎缩侧索硬化症 (ALS)、PD 等）。下面列出了用于研究这些蛋白的抗体。

其他关键的帕金森病抗体靶标：


应用数据

A

B

图 1.PGP9.5 抗体用于免疫荧光和 Western 印迹中的 。A) 使用 PGP9.5 免疫荧光分析SH-SY5Y 细胞。先用 PGP9.5 单克隆抗体 (BH7)（货号480012，稀释比为 1:500）孵育细胞，然后用驴抗小鼠 IgG (H+L) 高交叉吸附二抗、Alexa Fluor Plus 488（货号 A32766，稀释比为 1:2000）标记（Panel a：绿色）。细胞核（Panel b：蓝色）用含 DAPI 的 ProLong Diamond 抗淬灭封片剂（货号 P36962）进行复染。（Panel c：红色）F 肌动蛋白用罗丹明鬼笔环肽（货号 R415，稀释比为 1:300）染色。Panel d 代表合并图像，表示细胞核和细胞质的共定位情况。Panel e 代表未表达 PGP9.5 的 Hep G2 细胞。Panel f 代表一抗不处理的对照组。这些图像是在放大60倍的情况下采集的。B) 使用 PGP9.5 单克隆抗体 (BH7)（货号480012）进行 Western 印迹分析，在 DU 145（泳道1）、SH-SY5Y（泳道2）、K-562（泳道3）、HeLa（泳道4）、Hep G2（泳道5）、Neuro-2A（泳道6）、RSC96（泳道7）的全细胞提取物（30 µg 裂解物）以及大鼠大脑（泳道8）、大鼠肝脏（泳道9）、大鼠心脏（泳道10）和小鼠大脑（泳道11）的组织提取物中观察到与 PGP9.5 对应的 24 kDa 条带。通过检测靶标在受检细胞系和组织中的差异基础表达，验证了抗体的特异性。 在 DU 145 和 SH-SY5Y 中观察到 PGP9.5 的表达（相对于 K-562、HeLa 和 Hep G2），还在大鼠大脑中观察到表达（相对于大鼠肝脏和大鼠心脏）。
 

A

B

图 2. DNM1L 抗体应用于Western 印迹。A) 对 SH-SY5Y（泳道1）和 NTERA-2（泳道2）的全细胞提取物（30 µg 裂解物）以及小鼠大脑（泳道3）、大鼠大脑（泳道4）、小鼠心脏（泳道5）和大鼠心脏（泳道6）的组织提取物进行 Western 印迹分析。用 DNM1L 重组兔单克隆抗体 (2H15L40)（货号702782，稀释比为 1:200）孵育样本，然后用山羊抗兔 IgG (H+L) Superclonal 重组二抗、HRP（货号 A27036，稀释比为 1:4000）通过化学发光进行检测。在所有样本中观察到与 DNM1L 对应的 ~80 kDa 条带。B) 通过 CRISPR-Cas9 介导的靶蛋白敲除验证抗体特异性。在 DNM1L 敲除 (KO) 细胞系中，使用 DNM1L 兔单克隆抗体 (2H15L40)（货号702782）检测后没有信号。


相关资源