Countess 全自动细胞计数仪样本数据

机器学习算法可对成团细胞和细胞碎片的准确计数。

在明场模式下使用 Countess 3 FL 全自动细胞计数仪对 RAW 细胞（小鼠巨噬细胞）进行了计数，这些细胞体积小且容易成团。使用了台盼蓝染料来确定细胞活性。该图显示了原始图像（左侧）和增强图像（右侧），其中活细胞具有绿色轮廓，死细胞具有红色轮廓。计数算法能分辨细胞团块中的细胞并正确圈出细胞并对细胞进行计数。细胞碎片会被识别并自动排除在计数范围之外。

明场和荧光模式下小鼠 PBMC 的活性。

在明场和荧光模式下使用 Countess 3 和 Countess 3 FL 全自动细胞计数仪对小鼠 PBMC（体积可能小到仅有 5 µm）进行了计数。在明场计数（左侧）中，使用了台盼蓝染料 (0.4%) 来区分活性。Countess 3 细胞计数器用绿色轮廓（圆圈）圈出活（半透明）细胞，用红色轮廓圈出死（深染）细胞，以指示其活性。

在荧光模式（右侧）下，吖啶橙和碘化丙啶 (AO/PI）检测可提高活/死状态的特异性。AO 将所有有核活细胞染为绿色，可通过 EVOS GFP 2.0 光立方检测，而 PI 将死细胞染为红色，可通过 EVOS Texas Red 2.0 光立方检测。这是反映荧光染色是比台盼蓝更准确的活性指标的一个例子。

荧光模式下的凋亡和死亡细胞检测。

在使用 2 和 4 µM 十字孢碱孵育后，用 1:400 CellEvent Caspase-3/7 绿色检测试剂标示了 USO2（人类骨肉瘤上皮）细胞以识别凋亡细胞，然后用 1:1,000 SYTOX Red 死细胞染料表示所有死细胞。将细胞在室温下培养 30 分钟，然后在配备 EVOS LED 光立方、GFP 2.0 和 Cy5 2.0 的 Countess 3 FL 全自动细胞计数仪上计数。随着药物剂量的增加，绿色和远红外信号均增强，这分别表明凋亡和细胞死亡显著增加。4µL 十字孢碱的百分比总和超过 100%，因为表达这两种染料的细胞中有 16% 在所有三个类别中都有计数。

scRNA-Seq 和 scATAc-Seq 的单细胞和细胞核的准确自动计数。 

使用基于 FL 的计数在 Countess 3 FL 全自动细胞计数仪上对细胞核进行计数，可通过测序获得准确的计数结果。从 GM12878 细胞系 (A) 和 PBMC (B) 分离的细胞核的基于 FL 的计数比基于 BF 或 Countess II 仪器计数的细胞核计数更多。(C) 从脑组织中分离细胞核可获得准确的基于 FL 的计数，与 Cellaca™ MX 高通量自动细胞计数仪的计数相当。(D) 下一代测序 (NGS) 确认了可从基于 FL 的计数中准确加载2,000个目标细胞核。基于 FL 的计数可通过软件更新3在 Countess 3 FL 仪器上使用。通过 10x Genomics R&D 获得的数据。

通过流式细胞术与自动化细胞计数测量转染效率的对比。

U2OS 细胞使用 Invitrogen CellLight Nucleus-GFP、BacMam 2.0 进行了转导，并培养了 36 小时。通过（左侧曲线图）流式细胞术和（右侧图像）配备 GFP 光立方的 Countess II FL 全自动细胞计数仪评估了细胞的荧光蛋白表达。两种方法测定的转染率几乎完全相同——分别为 49.5% 和 49%。

CAR-T 细胞培养质量控制。

使用 Dynabeads 非接触式人类 T 细胞试剂盒分离了 CAR-T 细胞，并使用用 Dynabeads 人类 T 活化剂 CD3/CD28对T 细胞进行了扩增和激活。扩增前后在 Countess 3 FL 全自动细胞计数仪上使用台盼蓝染色通过明场计数对细胞培养物进行了监控。在图像（左）和柱状图（右）中，T 细胞和磁珠自动分化，T 细胞显示为活细胞（绿色），磁珠显示为死细胞（红色）。如果需要，也可根据大小和强度手动设门区分磁珠。

通过 GFP 表达测定的慢病毒转导效率。 

表达 Cas9 蛋白的 U2OS 细胞用 Lentiary CRISPR 阳性对照慢病毒、人类 HPRT、GFP 和阴性对照慢病毒（GFP 杂乱）按感染复数 (MOI) 1 和 2 进行了转导。两天后，在 Countess II FL 细胞计数仪上对细胞进行了 GFP 表达计数。（左）Countess II FL 仪器上显示的代表性计数结果。（右）柱状图显示 GFP 阳性细胞的百分比，表明转导成功。