对于哪怕是 PBMC 和成团细胞等困难样品也可以实现准确的细胞计数

引入人工智能,助力 Countess 3 全自动细胞计数仪像细胞生物学家那样“思考”,从而以简单、快速并且以自动方式生成准确、可重复的计数结果。其应用范围不仅限于计数,还扩展到细胞活性、细胞凋亡、转染效率等方面。


准确且精确

当您使用自动化设备进行细胞计数时,它的准确性和精确度和您一样,甚至更佳。准确性意味着它会正确地进行细胞计数,精确度意味着无论操作者是谁,它每次都会产生相同的结果。

 

引入人工智能。Countess 3(明场)和 Countess 3 FL(明场和荧光)全自动细胞计数仪值得信任,它们使用深度学习神经网络算法开发,每次都能进行准确的计数。该算法是由专业科学家根据包含数十种不同细胞类型和样品的数百个培养板进行细胞识别优化而成。

 

由此打造的细胞计数仪能够像细胞生物学家一样“思考”,即便是外周血单核细胞 (PBMC)、成团细胞以及含细胞碎片等具有挑战性的细胞样品也可轻松胜任。在高分辨率的 Countess 屏幕上,您可以看到正在计数的细胞以及未计数的细胞碎片。

 

与手动血球计数板的计数相比,使用 Countess 3 进行自动化细胞计数可以减少多种原因造成的数据错误和差异,包括操作者主观性、视觉疲劳、计数区域差异和挑战性样本。Countess 3 细胞计数仪兼具手动细胞计数的准确性和流式细胞仪计数的精确度,而又无需流式细胞术所需的支出或培训。

机器学习算法可实现准确的细胞计数,可与流式细胞仪计数媲美。

使用 Attune NxT 流式细胞仪(紫色直方图)、Countess 3 FL 全自动细胞计数仪(红色直方图)以及血球计数板和显微镜(手动计数,灰色直方图)对 CHO-K1、HeLa、HEK293、Jurkat 和人 PBMC 进行了计数。 Countess 3 FL 仪器和血球计数板直方图代表了 6 个独立计数的平均值且高度一致。手动计数的误差(计数的标准差)要比 Countess 3 计数或流式细胞仪计数更宽。

扩展计数区域。为了节省手动计数的时间,许多实验人员只对血球计数板网格上的一个或两个方块进行计数。计算更多方块(更大区域)通常会获得更准确的结果,但需要额外增加时间。Countess 3 全自动细胞计数仪查询的区域接近包含四个方块,通过减少细胞分布变化的影响提高了准确性。并且 Countess 可以在不到 30 秒的时间内完成自动聚焦、自动亮度调整、图像采集和计数。

手动细胞计数与自动化细胞计数的计数区域对比

Countess 3 的计数区域约为标准血球计数板的 3.8 倍。

处理成团细胞和碎片。由于难以辨别细胞之间的边界,因此成团细胞难以进行手动计数,甚至对自动化计数仪也具有挑战性。样品含有碎片则进一步增加了计数的复杂性。Countess 3 全自动细胞计数仪可以在进行细胞计数时自动排除碎片,其先进的算法可以清楚地识别细胞团块内的细胞边界,从而实现高度准确的细胞计数。

先进的算法可实现对成团细胞和样品碎片的准确计数。

在明场模式下使用 Countess 3 FL 全自动细胞计数仪对微小且容易成团的 RAW(小鼠小噬细胞)进行了计数。计数算法能分辨出团块中的细胞,正确圈出细胞并对细胞进行计数。活细胞具有绿色轮廓,死细胞则具有红色轮廓。碎片(未勾勒轮廓)会在计数时自动忽略。

“很棒的仪器。可处理的细胞浓度范围很广。可区分细胞团块并对团块内的细胞计数。”

 

Joanne Rzepka,

兽医医学研究和开发

“一台很准确的细胞计数仪,并且您也可以用它为荧光细胞计数。出色的产品。我对它很满意。我强烈推荐这款产品。”

Massimo Ammirante,

加州大学圣地亚哥分校

“它的一致性非常好!”

Kim Sylvia,

Sanford Burnham Medical Research Institute


快速

Countess 3 全自动细胞计数仪能在不到30 秒的时间内产生结果。通过快速采集、自动亮度调整、自动聚焦和自动保存,用户需要做的就是加入样品和插入细胞计数板。细胞培养实验室的时间十分珍贵,使用 Countess 3 自动细胞计数仪,即可快速完成细胞计数等多种分析。              

 

除了计数速度飞快外,Countess 3 系统还精简了细胞计数的流程,淘汰了许多与手动细胞计数相关的繁琐步骤,其中包括亮度和聚焦调整、计算细胞浓度以及制作报告。节省了更多的时间。      如果您的实验室每天计数五张玻片,可以每月节省 10–15 小时(具体取决于所选玻片);如果您每天计数 25 张玻片,则可以节省 50–75 小时!这些额外获得的时间可以用来完成实验室的细胞培养处理和其他活动,在从手动细胞计数切换到全自动细胞计数方面具有显著优势。        

手动血球计数板与自动化细胞计数过程的比较 

下表显示了手动血球计与 Countess 3 全自动细胞计数仪之间的实操细胞计数步骤比较。使用 Countess 可重复使用计数板时显示出来的省时优势,在使用一次性计数板时更加显著。   

“快速计数的好仪器,简单易用!!我真喜欢这台小计数仪!”

Xin Xu 博士

贝勒医学院


简单

使用 Countess 3 或 Countess 3 FL 全自动细胞计数仪在明场模式下进行细胞计数的过程简单而又轻松。只需准备计数板,启用快速捕获和自动保存,然后插入计数板。其余工作交给仪器自动完成:亮度调整、聚焦和计数。

自动化细胞计数不仅比手动计数操作更简单,而且需要的操作培训也更少。

 

灵敏的触摸屏和直观的界面。直观易用的Countess 3 全自动细胞计数仪软件。灵敏的 LCD 触摸屏不需要外部计算机。该屏幕的 1280 x 800 分辨率提供高质量的细胞图像,可通过辅助工具进行活/死细胞计数,使用 Countess 3 FL 全自动细胞计数仪,可实现荧光可视化。显示屏与整个仪器齐平,便于清洁。

触摸屏界面可以轻松显示计数的细胞群,例如,创建“门”,根据细胞大小、亮度、圆度和/或荧光强度从计数中排除不需要的细胞。  通过选择结果屏幕右上角的图形图标,在直方图或散点图中查看您的细胞信息。当使用滑块控件调整门控参数时,您可以实时查看直方图或散点图的变化。为方便起见,柱状图底部显示平均细胞大小(用于明场计数)或荧光强度(用于荧光计数)。

 

触摸屏界面可以让您从结果屏幕快速移动到直方图和散点图屏幕。 直方图和散点图可根据大小、亮度和圆度显示细胞群和设门。

直观的设门界面

在此散点图中,细胞群被视为活(绿色)和死(红色)群。轴的大小和圆度可以改变。

在此直方图中,根据细胞数量和相对荧光单位 (RFU) 绘制细胞群。使用右侧的设门场和明场 (BF),您可以使用设门菜单左侧的滑块根据大小、亮度和圆度进行设门。如果选择德州红 (TX Red) 或 GFP,则可以执行 RFU 强度的设门。

“维护费用低,细胞计数快速、简单、准确。学生易于使用和理解。”

 

Robert Dean,

D’Youville College


自动

使用 Countess 3 全自动细胞计数仪时,不仅计数自动化完成,系统还会自动调整亮度和聚焦以获得最佳对比度和分辨率,并会自动保存细胞计数和数据(如果您选择该选项)。软件还包括方便的内置预稀释和细胞传代计算器,这些为细胞培养工作提供很大便利。

预稀释计算器

如果您的细胞样品是浓缩样品,您在计数前进行了稀释,请在此处输入样品和缓冲液体积,Countess 3 细胞计数仪会自动重新计算样品浓度。该浓度还将考虑添加台盼蓝进行明场活性测定。

细胞传代计算器

如果您的下游实验确定特定浓度的样本,请在此处输入所需浓度和体积、Countess 3 细胞计数仪将自动计算所需的细胞样品和缓冲液或细胞培养基量。计算时将自动包括您的细胞计数结果。

“它非常简单易用并且让我能更快的更新实验记录以便每次实验都使用相同数量的细胞。快速而且高效。”

Lakeisha Tillery,

Meharry Medical College

保存结果和报告。您可以将细胞计数结果、细胞数据和图像保存到 USB 驱动器,或使用 Wi-Fi 加密狗保存到 Thermo Fisher™ Connect 云端平台。结果保存为兼容电子表格的 CSV 文件,细胞数据保存为流式细胞仪标准 FCS 文件,而图像可以保存为 TIFF、PNG 或 JPG 格式。在实验室内外随时访问这些文件——您可以在需要时随时随地获得数据。

 

您还可以保存包含结果、图像和设置可打印的 PDF 报告。

将结果、图像和设置保存至可打印的 PDF 报告中。

探索交互式 3D 虚拟操作

不局限于计数的应用

Countess 3 全自动细胞计数仪的功能远非单纯的细胞计数。利用台盼蓝染色,您可以评估样本中活细胞的百分比。或者,使用 Countess 3 FL 系统检测荧光染料,进行更复杂的活性分析、检测凋亡和细胞死亡的不同阶段、测量转染效率,以及其他应用。

利用台盼蓝进行细胞活性测定

 

使用 Countess 3 全自动细胞计数仪对体积小、浓度低且通常难以计数的小鼠 PBMC 进行计数。  在此明场计数中,使用了 0.4% 台盼蓝染色剂来区分活性,活细胞保持半透明状态,而死细胞则染为深色。 红色轮廓(圆圈)为按死亡计数的细胞,而绿色轮廓为按存活计数的细胞。  

 

 

利用荧光进行活性测定

 

在第二项实验中,用 ReadyCount Green/Red 细胞活性染料对小鼠 PBMC 进行染色,并用 Countess 3 FL 全自动细胞计数仪进行计数。在荧光模式下,该试剂的吖啶橙和碘化丙啶 (AO/PI) 的预优化混合物具有更高的活/死特异性。死细胞 (38%) 用 PI 染为红色,使用 EVOS Texas Red 光立方检测,而全部有核细胞 (99%) 用 AO 染为荧光绿色,并使用 EVOS GFP 光立方体检测。

“Countess II 让计数变得简单精确快速——它能告诉您死细胞和活细胞数,这一点最棒了。”

Faryal Mir,

麻省理工学院

单细胞数据。Countess 3 全自动细胞计数仪可分析和存储您样品中每个细胞的数据。您可以放大任何细胞并显示其大小、亮度、圆度和荧光值。您还可以流式细胞仪标准 (FCS) 格式生成散点图,并在多种流式细胞仪软件分析程序中分析、转换数据和重新设置数据格式。

对于单细胞数据,放大任何细胞便可获得其大小、亮度、圆度和荧光强度的读数。

样品中所有细胞的单细胞数据都可以导出为 FCS 散点图文件,并像流式细胞仪数据那样进行分析、转换和重新设置格式。该图绘制的是 GFP 荧光强度与圆度的关系图。

多样化的细胞系和细胞样品。Countess 3 全自动细胞计数仪的计数算法已在一组不同的细胞样本上进行了训练,您可以完全相信Countess 3 全自动细胞计数仪能够实现高准确度的细胞计数。下表列示了在 Countess 3 和 Countess 3 FL 全自动细胞计数仪上进行了测试和验证的细胞类型和细胞系。

Countess 3 全自动细胞计数仪上验证过的细胞系


兼容可重复使用计数板

两种 Countess 3 自动细胞计数仪均可使用 Invitrogen Countess 可重复使用计数板,可重复计数板可避免一次性计数板的浪费。即使您的实验室每天只使用五张计数板,通过使用可重复使用的计数板,可显著减少每年造成的浪费。这使得实验室能够负担起细胞计数自动化的成本,不会产生一次性计数板的持续性花费。

Invitrogen Countess 细胞计数板一次性计数板,无需像可重复计数板那样进行清洁,然后在细胞样品的处理间隔等待其干燥。需要处理大量细胞样品,为了减少污染风险或处理有害样本时,一次性计数板使用方便,可快速处理细胞样品。


符合 21 CFR 第 11 部分要求的支持软件

Countess SAE 软件解决方案是一个选配软件模块,支持电子记录保存,符合美国食品和药品监督管理局(FDA)的“电子记录和签名规则”、“联邦法规”第 21 篇第 11 部分(21 CFR 第 11 部分)的要求。该法规对使用电子文件代替纸质文件做出了规定。

 

21 CFR 第 11 部分合规性包括规程要求和技术要求。

  • 规程要求是最终用户机构所制定的标准操作程序。

  • 技术要求是所使用的合规性管理软件的功能特征。

仅满足技术要求并不能保证 21 CFR 第 11 部分合规性。合规性由机构的工作流程和所用系统两者决定。

 

软件的功能包括限制未经授权的用户、密码策略和失效日期、定义的用户权限和角色、通过审计日志、审计报告以及机载电子签名工作流程跟踪所有数据更改。购买 Countess SAE 软件许可证后,所有 Countess 3 和 Countess 3 FL 全自动细胞计数仪都可以在 SAE 模式下运行。要实现 21 CFR 第 11 部分合规性,机构还需要以合规方式制定和记录标准操作程序。

组成

Countess SAE 软件解决方案由三个相互通信的组件组成。

  1. SAE 软件用于配置 Countess 全自动细胞计数仪的安全性、审计和电子签名 (SAE) 设置。SAE 软件由 SAE 管理员控制台(安装在具有静态 IP 地址的联网计算机服务器上)和 SAE 应用配置文件组成。
  2. SAE 许可证用于激活 Countess 全自动细胞计数仪的 SAE 设置。
  3. SAE 模式在 Countess 全自动细胞计数仪上运行,并远程连接到 SAE 管理员控制台。

1.SAE 软件 – SAE 管理员控制台

SAE 管理员控制台是适用于 21 CFR 第 11 部分合规性支持的 Countess SAE 软件解决方案的组件,可通过它对 Countess 仪器进行配置来满足用户特有要求。另一个组件 Countess 应用配置文件必须先安装在 SAE 管理控制台上,然后才能使用 Countess 仪器上的 SAE 设置。在 SAE 管理员控制台上安装 Countess 应用配置文件软件后,将使用 SAE 服务器(网络计算机)连接到 Countess 仪器。SAE 管理员控制台必须通过具有静态 IP 地址的网络计算机运行。

SAE 管理员控制台和 Countess 应用配置文件的界面视图。

2.适用于 21 CFR 第 11 部分合规性支持的 Countess SAE 软件解决方案的 SAE 许可证

适用于 21 CFR 第 11 部分的 Countess SAE 软件许可证用于 Countess 3 和 Countess 3 FL 全自动细胞计数仪,并支持利用 SAE 管理员控制台遵守 21 CFR 第 11 部分的 FDA 安全性、审计和电子签名 (SAE) 准则。在每台 Countess 全自动细胞计数仪上激活 SAE 模式都需要一个 SAE 软件许可证。

3.Countess 3 全自动细胞计数仪上的 SAE 模式

SAE 管理员控制台软件通过在 Countess 仪器上启用 SAE 模式实现 21 CFR 第 11 部分支持。当 SAE 模式启用时,Countess 仪器会通过 SAE 服务器连接至 SAE 管理员控制台。根据 SAE 管理员控制台中的定义,在 Countess 仪器上实现安全性、审计和电子签名设置。

 

其功能包括未经授权用户的系统访问限制、密码策略和有效日期、规定用户权限和角色、通过审计日志、可用审计报告和机载电子签名工作流程跟踪所有数据更改。所有 Countess 3 和 Countess 3 FL 全自动细胞计数仪都可以通过购买 Countess SAE 软件许可证在 SAE 模式下运行。

启用 Countess 3 或 3 FL 仪器上的 SAE 模式

功能

SAE 管理员控制台的功能

 

系统安全通过用户 ID、密码、角色和权限控制用户对软件的访问。提供三个默认用户角色:一个具有完全权限(管理员),一个具有部分权限(首席科学家),另一个没有权限(技术人员)。可以编辑默认用户角色,并可额外创建用户角色和权限。
审计跟踪用户执行的操作和对 SAE 管理员控制台设置的更改。软件自动以静默方式审计某些操作。您可以选择其他项目进行审计并指定审计模式。审计功能为经审计的 SAE 管理员控制台更改和操作提供报告。
电子签名(e-signature)确定要求用户提供用户名和密码的功能。您可以配置电子签名,以便用户可以导出签名文件并打印签名报告。您还可以将电子签名事件配置为需要多个签名,以及要求具有特定权限的用户进行签名。

系统安全

仅授权人员才能通过用户 ID 和密码进行访问。

显示创建新用户帐户的 SAE 管理员控制台界面

审计

SAE 管理员控制台的审计功能包括跟踪用户执行的操作以及对 SAE 设置的任何更改。该软件以静默方式跟踪的操作包括登入和退出、图像采集和图像导出。

SAE 管理员控制台审计历史记录。

SAE 管理员控制台的 Audit History (审计历史记录)选项卡 (1) 列出操作、系统配置和应用程序对象记录。对于每个事件,它显示(2) 应用程序、(3) 操作和(4)日期和用户。您也可以用可读或可打印(.txt 或 PDF)格式 (5) 导出记录。

在审计功能内,可对特定用户进行审计操作以及提供静默、可选或必需性质审计选项。此外,可以为用户操作、SAE 模块更改以及软件或仪器操作和事件生成报告。

电子签名(e-signature)

SAE 管理员控制台的电子签名功能决定用户必须满足签名要求的功能。

SAE 管理员控制台电子签名设置。

SAE 管理员控制台的 e-Signature (电子签名)选项卡允许您:(1) 自定义电子签名的含义、(2) 按含义和角色选择需要的签名数以及 (3) 选择为特定含义签名的数据类型。

在电子签名功能内,您可以配置每个电子签名事件必须有多少不同角色的用户签名。您也可以创建单独的含义并自定义对每个事件的签名要求。

订购信息

要将 Countess SAE 软件解决方案与 Countess 3 全自动细胞计数仪一起使用,您可以单独购买软件许可证,也可以购买包含成套 Countess 3FL 全自动细胞计数仪和软件许可证包。


仅供研究使用。不可用于医疗诊断。