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膜电位增加和减少在许多生理过程(包括神经冲动传播、肌肉收缩以及细胞信号转导)中发挥核心作用。电位探针是研究这些过程的重要工具,通常分为慢响应探针或快响应探针。
根据周围电场改变结构的分子可以作为快响应探针用于检测瞬态(毫秒)电位变化。慢响应染料的作用原理为进入去极化细胞并与蛋白或膜结合。
增强去极化效果,可增加染料通量进而增加荧光强度,而超极化则表现为荧光强度下降。快响应探针通常用于对完整心脏组织的电活动进行成像或测量药物刺激引起的膜电位变化。慢响应探针通常用于探索线粒体功能和细胞活力。
使用 FluoVolt 膜电位染料对人 HEK 293 细胞进行染色。采用10毫秒的照明脉冲进行细胞成像,并通过 2X 像素合并法采集图像。当细胞在 -100 mV 至 +30 mV 范围内以2秒间隔去极化 (A) 或从 -80 mV 至 0 mV 范围内以2秒间隔单步去极化 (B) 时,迹线显示荧光反应。
使用 FluoVolt 膜电位染料对分化的 NG-108 细胞进行染色。采用10毫秒的照明脉冲进行细胞成像,并通过 2X 像素合并法采集图像。三条选定迹线 (B) 显示了当选定细胞 (A) 在培养中自发去极化和复极化时来自染料的荧光反应。
FluoVolt 膜电位染料是一种具有卓越电位依赖性荧光响应的快响应探针。该探针可快速响应,足以检测可激发细胞的瞬态(毫秒)电位变化,并产生超过 25%/100 mV 的信号变化。FluoVolt 膜电位染料可用于对完整心脏组织的电活动进行成像、绘制神经元和肌肉纤维的膜电位图或测量药物刺激引起的膜电位变化。
ANEP 染料会因环境中的电位变化而发出荧光。这些探针为快响应探针,会随着周围电场的变化发生电子结构变化,进而发生荧光特性变化。响应速度足以检测可激发细胞(包括单神经元、心脏细胞和完整大脑)的瞬时(毫秒)电位变化。然而,它们的电位依赖性荧光变化量级通常很小(每 100 mV 发生 2–10% 荧光变化)。
DiBAC4(3) 是慢响应电位敏感型探针,可以进入去极化细胞,并从中与胞内蛋白或膜结合,呈现出增强的荧光和红色光谱迁移。增强去极化效果,可增加阴离子染料通量进而增加荧光强度。而超极化则表现为荧光强度下降。这种 bis-oxonal 的最大激发波长为 490 nm,最大发射波长为 516 nm。由于整体带负电荷,DiBAC 染料会被排除在线粒体之外,因而比羰花青更适合测定细胞膜电位。
细胞凋亡早期阶段的一个独特特征是线粒体的破裂,包括膜和氧化还原电位的变化。我们提供一系列专门设计用于检测线粒体膜电位的 Molecular Probes 产品。
FluoVolt 膜电位染料 | di-3-ANEPPDHQ | 双(1,3-二巴比妥酸)-三次甲基氧烯洛尔 (DiBAC4(3)) | 电压传感器探针组,DiSBAC2(3) 和 CC2-DMPE | |
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响应类型 | 快响应 | 快响应 | 慢响应 | 慢响应 |
结果 | 去极化时荧光强度增加 | 2个激发波长;比率式读数 | 去极化时荧光强度增加 | 2个发射波长;比率式读数 |
检测范围 | 25%/100 mV | 2–10%/100 mV | 1%/1 mV | 1%/1 mV |
响应时间 | 亚毫秒 | 亚毫秒 | 20 ms | 500 ms |
标准滤光片组 | FITC | FITC/Cy5 | FITC | FITC/Cy5 |
激发/发射波长 (nm) | 522/535 | 465/635 | 490/516 | 490/516 |
参考文献 | 文献列表 | 文献列表 | 文献列表 | 文献列表 |
检测平台 | 成像 | 成像 | 成像、微孔板 | 微孔板 |
使用说明 | 明亮的信号和更高的信噪比可加快采样速率,从而实现亚毫秒级响应 | 较低的信号强度需要较慢的采样速率以获得足够的信噪比 | DiBAC 染料被排除在线粒体之外,使其成为测量细胞膜电位的理想选择 | 针对高通量应用而优化的基于 FRET 的检测 |
产品规格 | 1 个试剂盒 | 1 mg | 25 mg | 1 mg |
货号 | D36801 | B438 | K1046 |
仅供科研使用,不可用于诊断目的。