酪胺信号放大技术

提高低丰度靶标的成像质量

Invitrogen SuperBoost TSA试剂盒的灵敏度是标准ICC/IHC/ISH方法的10-200倍,可为低丰度靶标的高分辨成像提供优质的信号放大、明确性和清晰度。SuperBoost试剂将Invitrogen Alexa Fluor 染料的亮度与值得信赖的poly-HRP酪胺信号放大技术结合,与标准处理方法(包括TSA试剂)相比,使灵敏度提高2-10倍。当对清晰度有一定要求时,SuperBoostTSA试剂盒可助您的靶标在背景中脱颖而出。

选择SuperBoost TSA试剂盒

SuperBoost技术

  • 用于低丰度、难检测靶标的高度灵敏的荧光成像检测方法
  • 易于使用,生成的信号兼容标准滤镜
  • 所得图像分辨率高,与荧光蛋白、DAPI、二抗和其他 SuperBoost 试剂盒兼容
SuperBoost试剂盒具有卓越的灵敏度

图1. SuperBoost试剂盒具有卓越的灵敏度。使用不同浓度的抗prohibitin抗体(生产商建议按1:150稀释或稀释至终浓度5 µg/mL)孵育HeLa细胞,随后使用下列试剂标记:(1)Invitrogen™ Alexa Fluor 488 Tyramide SuperBoost试剂盒 (山羊抗兔IgG和Alexa Fluor 488 Tyramide);(2)我们的经典Invitrogen™ TSA试剂盒#12 (山羊抗兔IgG和Alexa Fluor 488 Tyramide);或(3)Invitrogen™ F(ab′)2兔抗山羊IgG (H+L)二抗。使用Invitrogen™ EVOS™ FL自动成像系统采集各种处理方法生成的细胞图像(采用相同的曝光和增益)。这些图像表明,Alexa Fluor 488 Tyramide SuperBoost试剂盒的灵敏度高于经典TSA试剂盒或直接标记二抗。


多重检测能力

SuperBoost试剂盒可兼容多种其他标志物检测和细胞染色技术,可用于多重检测实验和荧光共定位研究。例如,SuperBoost试剂可搭配:

  • 荧光标志物复染,如DAPI
  • 荧光蛋白(如:GFP&RFP)
  • 标准ICC/IHC
  • 其他SuperBoost试剂盒

产品手册中包含详细方案。

工作流程简单

可兼容ICC、IHC和FISH

SuperBoost试剂盒适用于标准ICC、IHC和FISH法常用的细胞类型和荧光成像系统。我们使用甲醛固定的2D 和 3D 培养的细胞系、FFPE 组织和冷冻切片组织,测试了 SuperBoost 试剂盒的性能。

免疫细胞化学(ICC)
免疫组织化学(IHC)
荧光原位杂交(FISH)

工作流程与标准ICC/IHC/FISH相似

SuperBoost试剂盒基于酪胺信号放大(TSA),使用辣根过氧化物酶(HRP)的催化活性,生成高密度的靶蛋白或核酸序列原位标记。SuperBoost试剂盒的工作流程与标准ICC、IHC和FISH相似。在该工作流程中,荧光基团结合的二抗被poly-HRP结合的二抗取代。增加的步骤仅有:结合型酪胺孵育2-10分钟,并在检测到特异性信号后加入终止液终止HRP活性。此外,终止液也有助于维持荧光信号的特异性和分辨率。

SuperBoost试剂盒的信号放大工作流程

图2. SuperBoost试剂盒的工作流程。该试剂盒的工作流程与标准ICC/IHC/FISH相似,只需几步即可灵敏检测到目标蛋白。

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何时使用酪胺信号放大(TSA)技术?

我们提供全套的荧光成像检测技术,您可针对靶标丰度从中选择最佳的检测技术,使用最合适的检测波长匹配您的多色标记实验。

  • 高丰度靶标 —— 直接标记,无需进行信号放大
  • 中等丰度靶标 —— 二抗标记,适度信号放大
  • 中低丰度靶标 —— 链霉亲和素偶联物,显著增强信号
  • 低丰度靶标 —— 酶学放大,以获得最大的信号增强效果
 

酪胺 SuperBoost试剂盒的订购信息

酪胺标记(Ex/Em)
酪胺 SuperBoost试剂盒*
抗鼠IgG(宿主:山羊)
抗兔IgG(宿主:山羊)
链霉亲和素
Alexa Fluor 488 (495/519 nm)B40912
B40941 (50 个盖玻片)
B40922
B40943 (50 个盖玻片)
B40932
Alexa Fluor 555 (555/565 nm)B40913B40923B40933
Alexa Fluor 594 (591/617 nm)B40915
B40942(50 个盖玻片)
B40925
B40944(50 个盖玻片)
B40935
Alexa Fluor 647 (650/668 nm)B40916B40926B40936
生物素-XX偶联物B40911B40921B40931
*除非另有说明,最多可用于150片18 mm x 18 mm玻片(假设关键孵育步骤使用150 µL)。可根据样品大小调整使用体积。
资源

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