自助式基因合成 | Thermo Fisher Scientific

改善您的自助式基因合成！

我们的解决方案成功地克服了传统自助式基因合成过程中常见的高错误率问题：全新的CorrectASE™ 校正酶或 GeneArt基因合成试剂盒配合CorrectASE™完整工作流程解决方案可将基因合成或片段合成过程中发生突变的概率缩小3至10倍（取决于所使用寡核苷酸的质量）.

省时省钱—CorrectASE™酶有助于减少需要测序的克隆数，从而大幅降低自助式基因合成的成本。GeneArt基因合成试剂盒内含CorrectASE™酶，可提供整个基因合成流程所需的全部试剂，包括寡核苷酸组装、错误校正以及PCR终产物克隆.

	CorrectASE™酶	内含CorrectASE™酶的GeneArt基因合成试剂盒（完整工作流程解决方案）
适用于经验丰富的客户	✓	✓
适用于基因合成初学者	-	✓
CorrectASE™反应缓冲液	-	✓
合成基因对照核苷酸混合物	-	✓
TOPO克隆载体	-	✓
TOPO克隆试剂	-	✓
PicoGreen定量试剂	-	✓
测序引物	-	✓
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CorrectASE™酶

CorrectASE™酶通过检测并校正组装基因上的错配和错误，将基因合成过程中引入的不必要突变控制在最低程度。经CorrectASE™酶处理后，需要测序验证的克隆数从原先的10-16个（工作流程中未使用CorrectASE™酶进行错误校正）缩减到4个以下，大大降低了在克隆挑选、培养基培养、质粒提取、测序PCR、测序反应和序列分析等阶段的测序成本及人力投入.

点击放大		左图大致描绘了引入CorrectASE™ 酶后的自助式基因合成工作流程. 红色点：错误橙色点：CorrectASE™

示例
点击放大		左图是两组实验在使用和未使用CorrectASE™酶进行基因合成时获得的克隆数及相应序列错误率的对比. 用于构成730bp长GFP基因的寡核苷酸通过PCR反应进行组装，并在最终PCR反应前被分为两组，其中一组使用CorrectASE™酶进行了处理，而另一组则未作此处理。PCR终产物经TOPO克隆后被装载到相应载体并分别涂板进行过夜培养。各自的荧光CFU百分比如图所示。B) 11个荧光CFU都是从两块平板中随机抽取，然后进行测序。在未处理样本组中，可以发现缺失突变（标记为红色点）以及错配（标记为绿色点）的位点。错误率的计算方法为发生错误的位点碱基数除以参与测序的总碱基数。未处理样本组中的11个序列中只有1个测序完全正确，而CorrectASE™酶处理样本组中则含有多达9个完全正确的序列.