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由于背景值较高,克隆平末端和较长的 PCR 产物一直十分困难,而且重组体的产率通常很低。我们独特的 Zero Background 技术使用 ccdB 致死基因(控制细胞死亡)来实现高效克隆。
ccdB 基因整合进入 Zero Background 载体的克隆位点。CcdB 蛋白能使细菌促旋酶中毒,从而导致宿主染色体降解和细胞死亡。当一个插入片段连接至载体时,ccdB 基因被破坏,只有重组体克隆能够生长。Zero Background 技术可消除较高的载体背景,得到接近 100% 的重组体,将您从筛选庞杂的背景克隆这一繁重的工作中解脱出来。
Zero Blunt 克隆试剂盒中现添加了 ExpressLink T4 DNA 连接酶,只需在室温下反应 5 分钟即可完成连接,通常 80% 以上的重组体包含插入片段。
使用 Zero Blunt TOPO 技术,从 PCR 到克隆仅需 5 分钟时间。Zero Blunt TOPO 可生成高达 95% 的、含有正确插入片段的克隆,无需使用连接酶、PCR 反应后处理步骤或者包含特定序列的 PCR 引物。