Search Thermo Fisher Scientific
DNA 定量和 RNA 定量一般称为核酸定量,通常测量样品中 DNA 或 RNA 的平均浓度,然后再进行下游实验。样品纯度也是准确计算样品中 DNA 或 RNA 浓度的重要考虑因素。常用的两种核酸定量光学技术:紫外可见测量和荧光测量。为样品、工作流程和通量选择适合的技术可实现 RNA 或 DNA 准确定量,帮助防止下游实验失败,从而节省大量时间和金钱。
紫外吸收光度法(UV-Vis) | 荧光检测法 | |
---|---|---|
光信号是如何产生的? | 核酸紫外吸收光度法测量基于核酸(DNA 和 RNA)的固有吸收特性。当测量吸收光谱时,核酸在 260 nm 处吸收具有特征峰。 | 核酸荧光检测法测量基于所使用的选择性结合 DNA 或 RNA 的荧光染料。 |
典型的 RNA/DNA 吸收光谱。 | 可选择性结合 DNA、RNA 或蛋白的荧光染料。这些荧光染料仅在与靶标结合时才发出信号。 | |
光信号是如何测量的? |
|
|
|
| |
核酸浓度是如何计算的? |
|
|
优势是什么? |
|
|
缺点是什么? |
|
|
我们提供了一系列基于荧光检测法或分光光度法进行核酸定量的仪器。
RNA/DNA 紫外可见光度法定量广泛使用的 Thermo Scientific 仪器包括:用于轻松进行单个样品微量分析的 NanoDrop One/OneC 分光光度计,用于 8 个样品微量分析的 NanoDrop 8000 分光光度计,以及用于多达 16个微量样品分析的 Multiskan Sky全波长酶标仪或 Varioskan LUX 多功能酶标仪以及 96-384 孔板。下表提供了有关仪器性能的更多详细信息。
NanoDrop One/Onec | Nanodrop 8000 | Multiskan Sky | Varioskan LUX | |
---|---|---|---|---|
检测限下限(dsDNA)是多少? |
| 2.5 ng/µL | 取决于所使用的样品形式和体积(对于微孔板来说)* 查看详细信息
96 孔板(常规)
| 取决于所使用的样品形式和体积(对于微孔板来说)* 查看详细信息
96 孔板(常规)
|
检测限上限(dsDNA)是多少? |
| 3700 ng/µL | 取决于所使用的样品形式和体积(对于微孔板来说) 查看详细信息
96 孔板(常规)
| 取决于所使用的样品形式和体积(对于微孔板来说) 查看详细信息
96 孔板(常规)
|
哪些样品形式可用? |
| Drop (1 µL) |
|
|
一次可以检测多少个样品?(通量) | 一次一个样品 | 多达 8 | 取决于检测形式 查看详细信息
| 取决于检测形式 查看详细信息
|
样品检测体积是多少? | 1 µL | 1 µL | 低至 2 µL(取决于检测形式) 查看详细信息
| 低至 2 µL(取决于检测形式) 查看详细信息
|
测量一个样品需要多长时间? | 8 秒 | <20 秒 | µDrop 板中的 16 个微量样品大约需要 1 分钟 查看详细信息当使用用户界面触摸屏或 SkanIt 软件(快速模式)进行操作时 | µDrop 板中的 16个微量样品大约需要 1.3 分钟 查看详细信息当使用用户界面触摸屏或 SkanIt 软件(快速模式)进行操作时 |
是否提供样品的光谱数据? | 是 | 是 | 是 | 是 |
是否提供样品的纯度信息? | 是 查看详细信息提供完整的光谱数据 (A260/A280 和 A260/A230 的比率)以及 Acclaro 污染物分析 | 是 查看详细信息提供完整的光谱数据 (A260/A280 和 A260/A230 的比率) | 是 查看详细信息提供完整的光谱数据(A260/A280 和 A260/A230 的比率) | 是 查看详细信息提供完整的光谱数据(A260/A280 和 A260/A230 的比率) |
是否检测样品中的特定污染物? | 是 查看详细信息Acclaro 样品智能技术可检测蛋白质、酚盐和胍盐并检测核酸的真实浓度 | 否 查看详细信息根据纯度比可以获取一些信息 | 否 查看详细信息根据纯度比可以获取一些信息 | 否 查看详细信息根据纯度比可以获取一些信息 |
是否可以区分样品中的 DNA 和 RNA? | 否 | 否 | 否 | 否 |
是否支持寡核苷酸定量? | 是 查看详细信息内置应用程序和自定义方法 | 是 查看详细信息内置应用程序和自定义方法 | 是 | 是 |
是否提供预置程序? | 是 查看详细信息含用户界面触摸屏和自定义程序 | 是 | 是 查看详细信息用户界面触摸屏和 SkanIt 软件 Cloud Library 中含预置程序并且 SkanIt 软件免费 | 是 查看详细信息SkanIt 软件 Cloud Library 中含预置程序并且 SkanIt 软件免费 |
是否可连接至 Thermo Fisher Connect? | 是 | 否 | 是 | 否 |
是否符合 21 CFR 第 11 部分中的规定? | 是 | 否 | 是 查看详细信息SkanIt 软件药物研发版 | 是 查看详细信息SkanIt 软件药物研发版 |
是否提供自动化兼容性? | 否 | 否 | 是 | 是 |
仪器如何操作? | 通过触摸屏用户界面 | 使用 PC 软件(Nanodrop 8000 操作软件) | 通过触摸屏用户界面或 PC 软件(SkanIt 软件) | 通过 PC 软件(SkanIt 软件) |
整体易用性评价? | ++++ | +++ | ++++ | +++ |
基本程序是什么? | 查看详细信息
| 查看详细信息
| 查看详细信息
| 查看详细信息
|
仪器价格等级是什么? | 中 | 中 | 中 | 高 |
消耗成本是什么? | 无经常性费用 | 无经常性费用 | 如果使用 µDrop 板,则无经常性费用; 否则使用紫外兼容性透明板 | 如果使用 µDrop 板,则无经常性费用; 否则使用紫外兼容性透明板 |
*理论检测限(LOD),根据 IUPAC 估算,基于空白样品的精密度(3*Sd),根据 Multiskan Sky 和 Varioskan LUX 酶标仪的精密度标准。 |
用于 RNA 或 DNA 荧光定量的高性能常用仪器包括:用于单个样品微量荧光定量的 Invitrogen Qubit 4 荧光计、用于 8 孔样品微量荧光定量的 Invitrogen Qubit Flex 荧光计、基于滤光片进行96-384 孔微孔板荧光定量的 Thermo Scientific Fluoroskan 微孔板荧光分析仪,以及基于光栅进行96-1536孔微孔板进行荧光定量的 Thermo Scientific Varioskan LUX 多功能酶标仪。下表提供了有关仪器性能的更多详细信息。
Qubit 4 | Qubit Flex | Fluoroskan 系列 | Varioskan LUX | |
---|---|---|---|---|
浓度下限(dsDNA)是多少? | 0.005 ng/µL* | 0.005 ng/µL* | 取决于 Quant-iT 检测试剂盒、使用的标准品浓度和曲线拟合** 查看详细信息0.006 ng/µL | 取决于 Quant-iT 检测试剂盒、使用的标准品浓度和曲线拟合** 查看详细信息0.003 ng/µL |
检测限上限(dsDNA)是多少? | 2000 ng/µL* | 2000 ng/µL* | 取决于 Quant-iT 检测试剂盒和检测条件 | 取决于 Quant-iT 检测试剂盒和检测条件 |
哪些样品形式可用? | Qubit 分析管 查看详细信息低荧光薄壁聚丙烯管 | Qubit Flex 八连管 查看详细信息低荧光薄壁 PCR 八连管 | 96384 孔板 | 961536 孔板 |
一次可以检测多少个样品?(通量) | 1 | 多达 8 | 取决于检测形式 查看详细信息
| 取决于检测形式 查看详细信息
|
样品检测体积是多少? | 1-20 µL | 1-20 µL | 根据检测形式、所测荧光团等 | 根据检测形式、所测荧光团等 |
是否提供样品的纯度信息? | 否 | 否 | 否 | 否 |
是否检测样品中的污染物? | 否 | 否 | 否 | 否 |
是否可以区分样品中的 DNA 和 RNA? | 是 查看详细信息使用 DNA 或 RNA 特异性荧光染料 | 是 查看详细信息使用 DNA 或 RNA 特异性荧光染料 | 是 查看详细信息使用 DNA 或 RNA 特异性荧光染料 | 是 查看详细信息使用 DNA 或 RNA 特异性荧光染料 |
是否支持寡核苷酸定量? | 是 查看详细信息使用 ssDNA 检测试剂盒 | 是 查看详细信息使用 ssDNA 检测试剂盒 | 是 查看详细信息使用 Quant-iT OliGreen 检测试剂盒 | 是 查看详细信息使用 Quant-iT OliGreen 检测试剂盒 |
是否提供预置程序? | 是 查看详细信息用户界面触摸屏中含预置程序 | 是 查看详细信息用户界面触摸屏中含预置程序 | 是 查看详细信息SkanIt Cloud Library 中含预置程序并且 SkanIt 软件免费 | 是 查看详细信息SkanIt Cloud Library 中含预置程序并且 SkanIt 软件免费 |
是否可连接至 Thermo Fisher Connect? | 是 | 是 | 是 | 否 |
是否符合 21 CFR 第 11 部分中的规定? | 否 | 否 | 是 查看详细信息SkanIt 软件药物研发版 | 是 查看详细信息SkanIt 软件药物研发版 |
是否提供自动化兼容性? | 否 | 否 | 是 | 是 |
整体易用性评价? | ++++ | ++++ | ++ | ++ |
基本程序是什么? | 查看详细信息
| 查看详细信息
| 查看详细信息
| 查看详细信息
|
仪器价格等级是什么? | 低 | 低-中 | 中 | 高 |
消耗成本是什么 |
Qubit 分析管 |
Qubit Flex 八连管 |
未经处理的 Nunc 板 |
未经处理的 Nunc 板 |
*此处报告的定量上限和下限分别使用 Qubit dsDNA 高灵敏度(HS)试剂盒(32851)和 Qubit dsDNA 宽范围(BR)试剂盒(货 号 Q32850) 以及不同样品量 (1-20 µL) 测得。 **根据说明,使用 Quant-iT dsDNA HS 检测试剂盒(货号 Q33120 )测定检测限(LOD)。基于空白样品的精密度(3*SD),根据 IUPAC 估算 LOD。结果将依曲线拟合、标准品浓度和所使用的试剂盒不同而有所不同。 |
问:紫外和荧光 DNA 定量有什么区别?我应该选择哪种 DNA 定量技术?
答:紫外和荧光技术用于 DNA 定量的工作原理不同。紫外定量基于 DNA 和 RNA 分子的固有吸收率,而荧光定量采用与您研究的靶分子发生特异性结合的染料。紫外定量不是非常灵敏,但具有最宽的动态范围,并且提供了有关样品纯度的数据——而且速度最快,因为不需要试剂制备步骤。荧光技术可以获得更高的灵敏度和分子特异性数据,但动态范围较窄,并且需要试剂制备步骤,因此检测时间略长。您需要采用的技术取决于实验所需的条件。
了解更多
问:哪一种是最佳 DNA 定量仪器?哪一种是最佳 RNA 定量仪器?
答:Thermo Fisher Scientific 提供的所有 DNA 仪器均具有卓越的品质。若要找到适合您实验室的 DNA 或 RNA 定量仪器,请查看紫外可见分光光度计(链接至 #spectrophotometers)和荧光计(链接至 #fluormeters)的详细对比。选择 DNA 定量仪器时,灵敏度、通量和预算等可能是最初考虑因素。可能还需要考虑是否需要靶标特异性、样品纯度信息或较宽的动态范围。
查看紫外可见分光光度计
查看荧光计