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使用实时荧光定量 PCR 进行 Pre-miRNA 分析
工作流程特点
- 适用于对前体 miRNA 或“pre-miRNA”进行定量测定
- 与 Applied Biosystems TaqMan Pri-miRNA 检测试剂盒和 TaqMan MicroRNA 检测试剂盒配合使用时，可进行 miRNA 生物合成研究
工作原理
MicroRNA“基因”在可产生一个较长的 pri-miRNA 转录本的细胞核中转录。pri-miRNA 序列包含一个或多个茎环序列。这些 pri-miRNA 在细胞核中被 Drosha 剪切，以生成 pre-miRNA，然后由 Exportin-5 导出至细胞质中，在细胞质中 pre-miRNA 进一步被 Dicer 剪切，从而产生成熟的 miRNA 序列。
TaqMan Pre-miRNA 检测试剂盒使用 Applied Biosystems 先进的生物信息学流程设计而成，专门设计用于在 Sanger miRBase 序列存储库中识别的个别茎环序列的特异性。这可帮助确保前体 miRNA 测量的准确性。
Pre-miRNA 分析实验工作流程
Applied Biosystems 提供多种保存小 RNA（如 miRNA）的试剂盒。尽管由于原代 miRNA 转录本较大，并非必须要使用这些试剂盒，但这些试剂盒确实能够从同一 RNA 样本中进行 pre-miRNA 和成熟 miRNA 的定量测定。每个试剂盒均适用于 miRNA 分析，因为它们能够定量回收所有长度为 >10 nt 的 RNA 并维持所有 RNA 的代表性量（消除实验偏差）。为了能通过 TaqMan Pre-miRNA 检测试剂盒进行准确定量测定，样本必须不含基因组 DNA。
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TaqMan Pre-miRNA 检测试剂盒可定量测定前体 microRNA (pre-miRNA) 转录本（miRNA 生物合成通路中的中间 RNA 分子）。TaqMan Pre-miRNA 检测试剂盒使用先进的生物信息学流程设计而成，可为 pri-miRNA 研究提供金标准测定性能和数据质量。
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仅供研究使用。不可用于诊断程序。