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MicroRNA(miRNA)是一种小片段非编码RNA分子，直接转录后抑制基因表达。它们在许多基本的生物过程，比如发育、细胞增殖、分化和细胞周期中一直都是关键的调节因子。最新证据还显示miRNA还和人类疾病发病机制有关，这些疾病包括癌症、代谢疾病、神经障碍和感染。

常见miRNA研究应用：

  • miRNA 分析—使用qPCR鉴定差异表达的成熟miRNA，应用领域包括肿瘤、代谢疾病和自身免疫疾病等
  • miRNA 定量—使用 qPCR 进行成熟 miRNA 特异性定量分析
  • miRNA 验证—使用 qPCR 验证 miRNA 分析结果。
  • miRNA 功能分析—使用 miRNA 模拟物和 miRNA 抑制物进行功能研究。
  • 非编码 RNA (ncRNA)分析—对于片段大于200碱基的非编码人、大鼠或小鼠转录本的可靠检测和定量分析。
  • 小 RNA 分析—发现和测量任何小 RNA
  • Pri-miRNA分析—发现和测量来自人、大鼠或小鼠的 Pri-miRNA

Applied Biosystems TaqMan MicroRNA 检测试剂盒是一种 miRNA 研究的创新工具，可用于从提取到发现，分析，定量，验证和功能分析等所有与 miRNA 有关的操作。我们研发了两种能够基于 TaqMan 探针的实时荧光定量 PCR分析方法，实现 miRNA 高灵敏度检测，精准定量和分析。

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实时荧光定量 PCR microRNA 流程：

第 1 步：
分离 RNA		第 2 步：
设计和优化引物		第 3 步:
逆转录		第 4 步：
扩增 cDNA		第 5 步：
运行 qPCR		第 6 步：
分析

分离 RNA

 

使用能保持 RNA 完整性和表达谱的方法提取 RNA

  • RNA 提取试剂盒
    创新的 Ambion 和 Invitrogen RNA 提取产品

  • mirVana miRNA 提取试剂盒
    这些试剂盒能够从组织和细胞中快速提取总 RNA，包括小 RNA。提取的小 RNA 种类有 miRNA，小干扰 RNA (siRNA)和核小 RNA (snRNA)。  我们的试剂盒能够处理多目标或者高通量样本。

  • TaqMan miRNA ABC 纯化试剂盒
    和经典的 TaqMan MicroRNA 检测试剂盒共同使用，能够从不同样本类型，包括血液，血清，血浆，FFPE，固体组织，培养细胞，唾液或尿液中获得高质量的miRNA，进行灵敏度高的特异性miRNA表达分析。

设计和优化引物

非 Applied Biosystems TaqMan 检测所必需。这些分析已达到我们业界领先的生物信息学设计标准。

逆转录

将各种浓度范围的 RN A转化为 cDNA

TaqMan Advanced miRNA cDNA 合成试剂盒
使用通用引物和预混液进行miR-Amp通用扩增，可增加各个目标片段cDNA的量，从1pg总RNA或2 μL 血清/血浆中检测出低至60的拷贝数。TaqMan Advanced miRNA 检测试剂盒预扩增步骤

注意在RT之后还有一步预扩增。TaqMan Advanced miRNA cDNA 合成试剂盒包含了 miR-Amp 扩增混合物和 miR-Amp 混合引物。

TaqMan MicroRNA 逆转录试剂盒
经典的 TaqMan microRNA 试剂盒，与 TaqMan MicroRNA 检测试剂盒共同用来将 miRNA 转换成 cDNA（miRNA 特异性 RT）  适合 1-10 个目标片段与 TaqMan Advanced miRNA 产品不可共用。

Megaplex RT 引物（适合 TAC 和 OpenArray）
可简化实验流程。Megaplex RT 引物能够一步完成 TaqMan MicroRNA 芯片实时 PCR 分析的 cDNA 准备。

Megaplex PreAmp 引物
预扩增和逆转录引物和经典 TaqMan MicroRNA 检测试剂盒（而不是 TaqMan Advanced MicroRNA产品）共同使用，非常适合于检测灵敏度优先重要的分析实验。Megaplex PreAmp引物极大地增强了低表达水平的miRNA检测，使得微量样品的全方位表达分析成为了可能。最少样品量只需要1ng总RNA。

注意：能和OpenArray，少于350ngRNA的 TAC共同使用，适合大于350ng RNA 的TaqMan Array Cards。对于单管分析，可以使用合适的方案预扩增。

TaqMan PreAmp扩增混合物
使得低至1ng cDNA足够完成200次real-time PCR反应，然后可以进一步使用 TaqMan 基因表达试剂盒进行基因表达分析

扩增 cDNA

运行 qPCR

实时PCR和数字PCR设备

设备比较›

分析

使用直观的软件数据分析工具处理和解读 qPCR 数据，以满足各种应用需求

Step 1 : 分离 RNA

分离 RNA

 

使用能保持 RNA 完整性和表达谱的方法提取 RNA

  • RNA 提取试剂盒
    创新的 Ambion 和 Invitrogen RNA 提取产品

  • mirVana miRNA 提取试剂盒
    这些试剂盒能够从组织和细胞中快速提取总 RNA，包括小 RNA。提取的小 RNA 种类有 miRNA，小干扰 RNA (siRNA)和核小 RNA (snRNA)。  我们的试剂盒能够处理多目标或者高通量样本。

  • TaqMan miRNA ABC 纯化试剂盒
    和经典的 TaqMan MicroRNA 检测试剂盒共同使用，能够从不同样本类型，包括血液，血清，血浆，FFPE，固体组织，培养细胞，唾液或尿液中获得高质量的miRNA，进行灵敏度高的特异性miRNA表达分析。
Step 2 : 设计和优化引物

设计和优化引物

非 Applied Biosystems TaqMan 检测所必需。这些分析已达到我们业界领先的生物信息学设计标准。

Step 3 : 逆转录

逆转录

将各种浓度范围的 RN A转化为 cDNA

TaqMan Advanced miRNA cDNA 合成试剂盒
使用通用引物和预混液进行miR-Amp通用扩增，可增加各个目标片段cDNA的量，从1pg总RNA或2 μL 血清/血浆中检测出低至60的拷贝数。TaqMan Advanced miRNA 检测试剂盒预扩增步骤

注意在RT之后还有一步预扩增。TaqMan Advanced miRNA cDNA 合成试剂盒包含了 miR-Amp 扩增混合物和 miR-Amp 混合引物。

TaqMan MicroRNA 逆转录试剂盒
经典的 TaqMan microRNA 试剂盒，与 TaqMan MicroRNA 检测试剂盒共同用来将 miRNA 转换成 cDNA（miRNA 特异性 RT）  适合 1-10 个目标片段与 TaqMan Advanced miRNA 产品不可共用。

Megaplex RT 引物（适合 TAC 和 OpenArray）
可简化实验流程。Megaplex RT 引物能够一步完成 TaqMan MicroRNA 芯片实时 PCR 分析的 cDNA 准备。

Megaplex PreAmp 引物
预扩增和逆转录引物和经典 TaqMan MicroRNA 检测试剂盒（而不是 TaqMan Advanced MicroRNA产品）共同使用，非常适合于检测灵敏度优先重要的分析实验。Megaplex PreAmp引物极大地增强了低表达水平的miRNA检测，使得微量样品的全方位表达分析成为了可能。最少样品量只需要1ng总RNA。

注意：能和OpenArray，少于350ngRNA的 TAC共同使用，适合大于350ng RNA 的TaqMan Array Cards。对于单管分析，可以使用合适的方案预扩增。

TaqMan PreAmp扩增混合物
使得低至1ng cDNA足够完成200次real-time PCR反应，然后可以进一步使用 TaqMan 基因表达试剂盒进行基因表达分析

Step 4 : 扩增 cDNA

扩增 cDNA

Step 5 : 运行 qPCR

运行 qPCR

实时PCR和数字PCR设备

设备比较›

Step 6 : 分析

分析

使用直观的软件数据分析工具处理和解读 qPCR 数据，以满足各种应用需求


其他 miRNA 类别

我们提供更多有关 real-time PCR microRNA 和 ncRNA 研究的选择。

  • 定制 TaqMan 小 RNA 检测试剂盒
    当没有预先设计好的分析可用时，定制分析对于您的小 RNA定量分析是最为理想的。您唯一需要提供的就是感兴趣的序列。

  • miRNA 模拟物和抑制物
    50,000 多条 miRNA 模拟物能够模拟内源 miRNA，通过上调 miRNA活性进行 miRNA 功能分析。而抑制物能够特异性地结合内源 miRNA分子，通过下调miRNA 活性进行 miRNA 功能分析。


仅供研究使用。不可用于诊断程序。