TaqMan® 测定的特异性和灵敏度 - 目前可用于蛋白研究

Revolutionary TaqMan® 蛋白定量将抗体的灵敏、特异性蛋白结合能力和 5' 核酸酶实时荧光定量 PCR 卓越的相对定量能力结合在一起。它们能够以同质检测形式快速轻松地对小样本量或数量有限的细胞中的蛋白进行鉴定和相对定量测定。使用 TaqMan® 蛋白测定开放试剂盒,您可以使用生物素化抗体构建您自己的 TaqMan® 蛋白定量,用于检测目标蛋白。

  • 能够在同一实时荧光定量 PCR 平台上直接建立 mRNA 和/或 miRNA 表达与蛋白表达的关联
  • 与 蛋白质免疫印迹 (Western Blot)和免疫染色相比,可提供更高的灵敏度和更准确的定量读数—无需细胞固定或染色
  • 使用 TaqMan® 蛋白测定开放试剂盒,您可以通过生物素化抗体对您的目标蛋白进行简单的检测开发—即使使用单个多克隆抗体亦是

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不了解基于化学试剂的 TaqMan® 蛋白定量?从这里开始!

选择您感兴趣的领域:

Protein Analysis on Small Samples

Determine protein expression in small samples such as stem cells or germ cell tumors.

Analysis of Post-Translational Modifications

Characterize expression of endogenous phosphorylation sites in samples.

Validation of Gene Transfection/Transduction

Confirm protein expression or characterize induced pluripotent stem cell (iPSC) colonies.

Correlation of RNA and Protein Results

Helpful for validating results from mRNA and/or microRNA (miRNA) assays.

Validation of siRNA Induced Silencing

Confirm knockdown of gene targets with siRNAs.

实验工作流程:查找每一步所需的产品

可利用免疫原纯化多克隆抗体制备液(可分成两个池)或适合 ELISA 的匹配抗体对(通常由 一个 个多克隆抗体和 1 个单克隆抗体组成)构建检测试剂盒。

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TaqMan® 蛋白测定开放试剂盒

在浓度为 1,000 个细胞/µL 细胞裂解液中裂解细胞。

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蛋白表达样本制备试剂盒

检测探针是通过生物素-链霉亲和素键与寡核苷酸偶联在一起的靶标特异性抗体。探针对中的每个寡核苷酸代表 5' 或 3' 端,当检测探针对上的抗体成分与靶蛋白上的两个不同的抗原决定簇相对结合时,它们相互邻接。

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TaqMan® 蛋白定量

连接酶的底物是第三寡核苷酸杂交到检测探针对的寡核苷酸端而形成的桥接结构。当检测探针彼此接近时,会优先形成此结构。后续的蛋白酶处理会使连接酶失活。

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TaqMan® 蛋白表达核心试剂盒(含预混液)

连接产物可作为实时荧光定量 PCR 的模板,使用 TaqMan® 测定进行蛋白检测和相对定量测定。

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StepOnePlus™ 实时荧光定量 PCR 系统
7500 Fast 实时荧光定量 PCR 系统
7900HT Fast 实时荧光定量 PCR 系统
ViiA™ 7 实时荧光定量 PCR 系统

将仪器数据文件中的 Ct 值导入数据分析软件,以获得相对定量测定的倍数变化结果。

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ProteinAssist™ 软件

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