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SuperScript IV RT-LAMP 预混液，用于等温扩增
产品特点
- 更快 – 借助改进型 Bst DNA 聚合酶，仅需 5 分钟即可完成病毒病原体检测
- 高效 – 借助 SuperScript IV 反转录酶， 可在一步反应中将 RNA 反转录成 cDNA。
- 灵敏 – 借助 RNaseOUT 重组 RNA 酶抑制剂和经优化的缓冲液，增强了反应灵敏度和特异性
- 更简单 – 简化的实验流程：单管反应，仅需要一个 65℃ 的加热模块
- 灵活 – 可使用多种方法评估检测结果，包括实时定量检测方法和终点检测方法。
应用
- 等温扩增
- RNA 或 DNA 靶标检测
- 病原体检测试剂的开发
- 即时检测（POC）设备和现场检测试剂的开发
SuperScript IV RT-LAMP Master Mix 的优点
SuperScript IV RT-LAMP Master Mix 具有更快的 RNA 扩增速度。
借助改进型 Bst DNA 聚合酶可在 5 分钟内完成病毒病原体检测。
使用实时定量检测合成的 SARS-CoV-2
SARS-CoV-2 RNA 的扩增速度。 SuperScript IV RT-LAMP Master Mix 可以最快的速度进行 RNA 靶标扩增。使用合成的 SARS-CoV-2 RNA、相同的引物对（来自 Colorimetric ReadiLAMP™ 试剂盒，SARS-CoV-2，货号 A52539）和 SYTO 9 绿色荧光核酸染料在 Applied Biosystems™ QuantStudio™ 5, 6 Flex 或 7 Flex 实时定量 PCR 系统上进行实时检测来测定扩增速度。按照各生产商推荐的实验方案，同时分别使用 NEB WarmStart® LAMP Kit (DNA & RNA), Optigene GspSSD2.0 Isothermal Master Mix 和 Lucigen LavaLAMP™ RNA Master Mix ，所显示的值是三次实验的平均值。
SuperScript IV RT-LAMP Master Mix 在检测低拷贝 RNA 方面显示出强大的能力，可在不到 10 分钟内检测低至 30 个拷贝。
使用实时定量检测合成的 SARS-CoV-2 RNA。
检测低拷贝 SARS-CoV-2 RNA 。SuperScript IV RT-LAMP Master Mix 可在不到 10 分钟的时间内扩增低至 30 个拷贝的 RNA 靶标。使用合成的 SARS-CoV-2 RNA、相同的引物对（来自Colorimetric ReadiLAMP™ 试剂盒，SARS-CoV-2，货号A52539）和 SYTO 9 绿色荧光核酸染料在 Applied Biosystems™ QuantStudio™ 5, 6 Flex 或 7 Flex 实时定量 PCR 系统上进行实时检测来测定扩增速度。按照各生产商推荐的方案，同时分别使用 NEB WarmStart® LAMP Kit (DNA & RNA), Optigene GspSSD2.0 Isothermal Mastermix 和 Lucigen LavaLAMP™ RNA Master Mix，所显示的值是三次实验的平均值。
SuperScript IV RT-LAMP Master Mix 可使用不同方法用来评估检测结果，包括实时定量方法和终点法。
实时荧光 RT-LAMP 检测
图 1.通过实时荧光 RT-LAMP 分析检测病毒 RNA 靶标。 使用实时定量 PCR 仪和 SYTO™ 9 染料进行实时定量 RT-LAMP，反应时间为 60 分钟。在阳性反应中两条蓝色曲线显示早期扩增信号（< 15分钟）。深蓝色曲线代表纯化的临床 RNA 扩增，浅蓝色曲线相应代表合成的病毒 RNA 扩增。灰色曲线表示无模板对照中的晚期扩增信号。
终点检测方法
通过 SYBR Green I 染色和琼脂糖凝胶电泳带来的颜色变化进行检测
图 2.终点 RT-LAMP 反应结果的目视检测
上排:
SYBR Green I 染色产生的颜色变化。亮绿色（右）表示靶标 RNA 成功扩增。橙色（左）表示没有扩增。
下排:
RT-LAMP 终点检测结果的琼脂糖凝胶电泳验证，所使用的是 E-Gel agarose gel with SYBR Safe stain, 2%。凝胶中出现明显的梯状图案表示阳性反应。没有出现梯状图案表明结果是阴性。M 泳道加入的是 E-Gel 1 Kb Plus Express DNA Ladder
SuperScript IV RT-LAMP Master Mix 还可以检测 DNA 靶标，为病原体研究和监测提供更广泛的应用。
DNA 靶标扩增。SuperScript IV RT-LAMP Master Mix 可用于扩增 DNA 靶标，并表现出卓越的扩增速度。使用合成的 SARS-CoV-2 RNA、相同的引物对（来自 Colorimetric ReadiLAMP™ 试剂盒，SARS-CoV-2，货号 A52539）和 SYTO 9 绿色荧光核酸染料在 Applied Biosystems™ QuantStudio™ 5, 6 Flex 或 7 Flex 实时定量 PCR 系统上进行实时检测来测定扩增速度。按照各生产商推荐的方案，同时分别使用 NEB WarmStart® LAMP Kit (DNA & RNA), Optigene GspSSD2.0 Isothermal Mastermix 和 Lucigen LavaLAMP™ RNA Master Mix，显示的值是三次实验的平均值。
SuperScript IV RT-LAMP Master Mix 具有更快的 RNA 扩增速度。
借助改进型 Bst DNA 聚合酶可在 5 分钟内完成病毒病原体检测。
使用实时定量检测合成的 SARS-CoV-2
SARS-CoV-2 RNA 的扩增速度。 SuperScript IV RT-LAMP Master Mix 可以最快的速度进行 RNA 靶标扩增。使用合成的 SARS-CoV-2 RNA、相同的引物对（来自 Colorimetric ReadiLAMP™ 试剂盒，SARS-CoV-2，货号 A52539）和 SYTO 9 绿色荧光核酸染料在 Applied Biosystems™ QuantStudio™ 5, 6 Flex 或 7 Flex 实时定量 PCR 系统上进行实时检测来测定扩增速度。按照各生产商推荐的实验方案，同时分别使用 NEB WarmStart® LAMP Kit (DNA & RNA), Optigene GspSSD2.0 Isothermal Master Mix 和 Lucigen LavaLAMP™ RNA Master Mix ，所显示的值是三次实验的平均值。
SuperScript IV RT-LAMP Master Mix 在检测低拷贝 RNA 方面显示出强大的能力，可在不到 10 分钟内检测低至 30 个拷贝。
使用实时定量检测合成的 SARS-CoV-2 RNA。
检测低拷贝 SARS-CoV-2 RNA 。SuperScript IV RT-LAMP Master Mix 可在不到 10 分钟的时间内扩增低至 30 个拷贝的 RNA 靶标。使用合成的 SARS-CoV-2 RNA、相同的引物对（来自Colorimetric ReadiLAMP™ 试剂盒，SARS-CoV-2，货号A52539）和 SYTO 9 绿色荧光核酸染料在 Applied Biosystems™ QuantStudio™ 5, 6 Flex 或 7 Flex 实时定量 PCR 系统上进行实时检测来测定扩增速度。按照各生产商推荐的方案，同时分别使用 NEB WarmStart® LAMP Kit (DNA & RNA), Optigene GspSSD2.0 Isothermal Mastermix 和 Lucigen LavaLAMP™ RNA Master Mix，所显示的值是三次实验的平均值。
SuperScript IV RT-LAMP Master Mix 可使用不同方法用来评估检测结果，包括实时定量方法和终点法。
实时荧光 RT-LAMP 检测
图 1.通过实时荧光 RT-LAMP 分析检测病毒 RNA 靶标。 使用实时定量 PCR 仪和 SYTO™ 9 染料进行实时定量 RT-LAMP，反应时间为 60 分钟。在阳性反应中两条蓝色曲线显示早期扩增信号（< 15分钟）。深蓝色曲线代表纯化的临床 RNA 扩增，浅蓝色曲线相应代表合成的病毒 RNA 扩增。灰色曲线表示无模板对照中的晚期扩增信号。
终点检测方法
通过 SYBR Green I 染色和琼脂糖凝胶电泳带来的颜色变化进行检测
图 2.终点 RT-LAMP 反应结果的目视检测
上排:
SYBR Green I 染色产生的颜色变化。亮绿色（右）表示靶标 RNA 成功扩增。橙色（左）表示没有扩增。
下排:
RT-LAMP 终点检测结果的琼脂糖凝胶电泳验证，所使用的是 E-Gel agarose gel with SYBR Safe stain, 2%。凝胶中出现明显的梯状图案表示阳性反应。没有出现梯状图案表明结果是阴性。M 泳道加入的是 E-Gel 1 Kb Plus Express DNA Ladder
SuperScript IV RT-LAMP Master Mix 还可以检测 DNA 靶标，为病原体研究和监测提供更广泛的应用。
DNA 靶标扩增。SuperScript IV RT-LAMP Master Mix 可用于扩增 DNA 靶标，并表现出卓越的扩增速度。使用合成的 SARS-CoV-2 RNA、相同的引物对（来自 Colorimetric ReadiLAMP™ 试剂盒，SARS-CoV-2，货号 A52539）和 SYTO 9 绿色荧光核酸染料在 Applied Biosystems™ QuantStudio™ 5, 6 Flex 或 7 Flex 实时定量 PCR 系统上进行实时检测来测定扩增速度。按照各生产商推荐的方案，同时分别使用 NEB WarmStart® LAMP Kit (DNA & RNA), Optigene GspSSD2.0 Isothermal Mastermix 和 Lucigen LavaLAMP™ RNA Master Mix，显示的值是三次实验的平均值。
SuperScript IV RT-LAMP 预混液
产品说明
| 实验方案中的步骤 | 单管反应，一步 |
| 靶标检测时间 | 5-15 分钟 |
| 聚合酶 | Bst DNA 聚合酶突变体 |
| 反转录酶 | SuperScript IV 反转录酶 |
| 其它酶 | RNaseOUT 重组 RNA 酶抑制剂 |
| 包含的染料 | SYTO 9 绿色荧光核酸染料 |
| 反应温度 | 65℃ |
| 样本类型 | 纯化的 RNA（也可用于 DNA） |
| 已验证的检测靶标 | SARS-CoV-2，流感，麻疹 |
| 结果验证方法 | 实时或终点 |
| 反应次数 | 20、100、400 或 1000 次反应 |
| 试剂盒组分 | SuperScript IV RT-LAMP Master Mix - 1.25ml；SYTO 9 Green Fluorescent Nucleic Acid Stain - 30µL |
| 试剂盒储存温度 | -20℃，避光 |
| 监管分类 | 仅供科研使用（RUO） |
| 货号 | 20 rxn（货号 A51800），100 rxn（货号 A51801），400 rxn（货号 A51802），1000 rxn（货号 A51803） |
RT-LAMP 流程，用于病毒病原体检测试剂开发。
使用 Invitrogen SuperScript IV RT-LAMP Master Mix 进行病毒病原体检测试剂开发的一般流程
使用单酶进行 RT-LAMP 的实验方案和应用指南
利用现有的常规货号产品（包括 Bsm DNA 聚合酶）以及我们的 RT-LAMP 实验方案和技术指南加速病毒病原体（包括 SARS-CoV-2）检测试剂的开发。此 RT-LAMP 实验方案也可作为参照，使用相关引物对检测其它 RNA 靶标。如需了解更多信息，请浏览 thermofisher.com/lamp
现可提供大包装定制化的可冻干酶，了解更多请联系：MDxenzymes@thermofisher.com 或访问网址： www.thermofisher.com/lyo-ready
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仅供科研使用，不可用于诊断目的。