Pierce蛋白酶抑制剂cocktail和磷酸酶抑制剂

蛋白酶和磷酸酶抑制剂混合物cocktail、片剂和胶囊可在原代细胞、哺乳动物培养细胞、动物组织、植物组织、酵母或细菌细胞的提取或裂解过程中有效保护蛋白质。各类单一蛋白酶抑制剂还可单独订购，有多种规格可选。我们提供含EDTA或不含EDTA的配方，以兼容基于二价阳离子的检测。根据以下产品指南，为您的实验选择合适的蛋白酶抑制剂、磷酸酶抑制剂或复合型抑制剂，每类抑制剂都提供浓缩液和速溶片剂形式、也有适合处理大量样本的蛋白酶抑制剂胶囊。

细胞裂解液  细胞组分分离试剂盒

广谱型蛋白酶抑制剂混合物

 浓缩液浓缩液，不含 EDTA速溶片剂速溶片剂，不含 EDTA速溶胶囊
 Halt蛋白酶抑制剂浓缩液Halt蛋白酶抑制剂浓缩液，不含EDTAPierce蛋白酶抑制剂片剂Pierce蛋白酶抑制剂片剂，不含EDTA速溶胶囊
 Halt 蛋白酶抑制剂浓缩液Halt 蛋白酶抑制剂浓缩液，不含 EDTAPierce 蛋白酶抑制剂 XL 胶囊，不含 EDTA
含 EDTA是，采用单独的瓶装否是否否
含 DMSO是是否否否
需要溶解否（100X 浓缩液）否（100X 浓缩液）是是是
下游应用兼容性与 2D 或 IMAC 不兼容所有与 2D 或 IMAC 不兼容所有所有
所含抑制剂AEBSF、抑肽酶、乌苯美司、E-64、亮抑蛋白酶肽、胃酶抑素 A、EDTA*AEBSF、乌苯美司、E-64、胃酶抑素 A
货号78430 (24 x 100 µL)
78429（5 mL）
78438（10 mL）
87786（1 mL）		78425 (24 x 100 µL)
78437（5 mL）
78439（10 mL）
87785（1 mL）		A32963（每片用于 50 mL 裂解液）
A32953（每片用于 10 mL 裂解液）		A32965（每片用于 50 mL 裂解液）
A32955（每片用于 10 mL 裂解液）		A37989（每个胶囊用于 500 mL 裂解液）

*仅在 EDTA 配方中包含

高效的广谱蛋白酶抑制剂

证明Pierce蛋白酶抑制剂混合物片剂可在各种裂解液中有效抑制广谱蛋白酶的图表

图1.Pierce 蛋白酶抑制剂片剂可以抑制不同组织裂解物和细胞系中的蛋白酶活性。在添加（蓝条）和不添加（黑条）Pierce 蛋白酶抑制剂片剂的情况下，测定细胞和组织裂解物（1mg/mL）的蛋白酶活性。图片显示了蛋白酶抑制的百分比。

有效抑制蛋白酶活性

图 2.三种市售蛋白酶抑制剂片剂之间的性能比较。在分别添加了配方优化的 Thermo Scientific Pierce 蛋白酶抑制剂迷你片剂，Roche™cOmplete™ 蛋白酶抑制剂片剂、含或不含 EDTA 的 Sigma-Aldrich™ SIGMAFAST™ 蛋白酶抑制剂片剂的情况下，胰腺提取物（100μL; 0.5μg/μL）与淬灭的荧光胰蛋白酶、半胱氨酸、金属蛋白酶和组织蛋白酶裂解底物一起孵育。37 °C 下孵育 1 小时，并在相应的发射光下检测荧光信号。图片显示了各品牌蛋白酶抑制剂相应的蛋白酶活性抑制效率。

广谱磷酸酶抑制剂混合物

 浓缩液速溶片剂
 Halt磷酸酶抑制剂浓缩液Pierce磷酸酶抑制剂片剂
 Halt 磷酸酶抑制剂浓缩液Pierce 磷酸酶抑制剂片剂
含 DMSO是否
需要溶解否（100X 浓缩液）是
下游应用兼容性与 2D 或 IMAC 不兼容所有
所含抑制剂氟化钠、正钒酸钠、焦磷酸钠、β-甘油磷酸钠
货号78428 (24 x 100 uL)
78420（1 mL）
78426 (5 x 1 mL)
78427（10 mL）		A32957（每片迷你片剂用于 10 mL 裂解液）


磷酸酶抑制剂能够保持蛋白磷酸化状态

图 3.细胞提取物中的蛋白磷酸化状态被保留。在添加或不添加磷酸酶抑制剂的情况下提取蛋白，通过蛋白免疫印迹法检测提取物中总蛋白与磷酸化蛋白的相对水平。(A) HCT116 细胞经血清饥饿处理后，用 IGF 处理 15 分钟或作为对照细胞留置。使用 IP 裂解液和配方优化的 Thermo Scientific 蛋白酶和磷酸酶复合型抑制剂（不含 EDTA）制备细胞裂解物。将 500μg 裂解物与 5μg 磷酸化 AKT 抗体在 4ºC 下孵育过夜。然后将复合物与 Thermo Scientific Pierce 蛋白 A/G 磁珠在室温下孵育 1 小时。漂洗磁珠并在低 pH 下洗脱。（B）在分别添加 Pierce 磷酸酶抑制剂迷你片剂、Roche™ PhosStop™ 磷酸酶抑制剂片剂以及 Sigma-Aldrich™ 磷酸酶抑制剂混合液 2 和 3 的配方情况下，通过将提取物与可测量磷酸酶活性的荧光底物（MFP 或 FDP）一起孵育，从而测定肾脏提取物（25μL；0.5 μg/μL）中对蛋白磷酸酶、碱性磷酸酶和酸性磷酸酶活性的抑制程度。37 °C 下孵育 1 小时，并在相应的发射光下测定荧光信号。图片显示了各品牌磷酸酶抑制剂相应的磷酸酶活性抑制效率。


抑制磷酸酶活性以保持磷酸化状态

Pierce磷酸酶抑制剂对肝脏和脾脏蛋白提取物的磷酸酶活性的抑制作用
图 4.Thermo Scientific Pierce 磷酸酶抑制剂可保护细胞和组织提取物中的蛋白磷酸化状态免受磷酸酶的影响。在不添加 (-) 或添加 (+) 磷酸酶抑制剂的情况下提取蛋白质，测定了 (A) AKT 和 PDGFR 在血清饥饿处理、PDGF刺激 (100 ng/mL) 的 NIH 3T3 细胞提取物中和 (B) ERK1/2 在肝脏和脾脏组织提取物中总蛋白和磷酸化蛋白的相对水平。使用 (C) Pierce 磷酸酶抑制剂片或另一种市售的磷酸酶抑制剂片处理后，测定小鼠脑提取物对蛋白磷酸酶、碱性磷酸酶和酸性磷酸酶活性的抑制程度。

复合型蛋白酶和磷酸酶抑制剂混合物

 浓缩液浓缩液，无 EDTA速溶片剂速溶片剂，无 EDTA
 Halt 蛋白酶和磷酸酶抑制剂浓缩液Halt 蛋白酶和磷酸酶抑制剂浓缩液，不含 EDTAPierce 蛋白酶和磷酸酶抑制剂片剂Pierce 蛋白酶和磷酸酶抑制剂片剂，不含 EDTA
含 EDTA是的，采用单独的瓶装否是否
所含抑制剂抑肽酶、乌苯美司、E-64、亮抑蛋白酶肽、氟化钠、正钒酸钠、焦磷酸钠、β-甘油磷酸钠、EDTA*
含 DMSO是是否否
需要溶解否（100X 浓缩液）否（100X 浓缩液）是是
下游应用兼容性与 2D 或 IMAC 不兼容所有与 2D 或 IMAC 不兼容所有
货号78442 (24 x 100 μL)
78440（1 mL）
78444 (5 x 1 mL)
78446 (10 mL)		78443 (24 x 100 μL)
78441（1 mL）
78445 (5 x 1 mL)
78447 (10 mL)		A32959（每片迷你片剂用于 10 mL 裂解液）A32961（每片迷你片剂用于 10 mL 裂解液）

*仅在 EDTA 配方中包含

这些复合型蛋白酶和磷酸酶抑制剂浓缩液与片剂含有靶向和抑制丝氨酸、苏氨酸、酪氨酸磷酸酶，以及丝氨酸、半胱氨酸和天冬氨酸蛋白酶和氨基肽酶的化合物。EDTA 可以抑制金属蛋白酶的活性，液体抑制剂中的 EDTA 为独立瓶装，片剂中的 EDTA 直接包含于配方中。这些广谱抑制剂可同时防止蛋白质降解和保持磷酸化状态，只需一管或一片，即可全面保护蛋白完整性。

Pierce蛋白酶和磷酸酶复合型抑制剂cocktail对胰腺组织中蛋白酶和磷酸酶活性的有效性
图 5.使用复合型片剂有效抑制蛋白酶和磷酸酶。加入抑制蛋白酶和磷酸酶活性的片剂，然后检测酶活性的抑制程度。加入胰腺组织提取物的淬灭荧光底物，底物裂解后检测荧光信号。图片显示了酶活性的抑制程度。(A) 蛋白酶检测反应在 37℃ 下孵育两小时。(B) )酸性磷酸酶检测反应在 37℃ 下孵育一小时。
蛋白酶

广谱型蛋白酶抑制剂混合物

 浓缩液浓缩液，不含 EDTA速溶片剂速溶片剂，不含 EDTA速溶胶囊
 Halt蛋白酶抑制剂浓缩液Halt蛋白酶抑制剂浓缩液，不含EDTAPierce蛋白酶抑制剂片剂Pierce蛋白酶抑制剂片剂，不含EDTA速溶胶囊
 Halt 蛋白酶抑制剂浓缩液Halt 蛋白酶抑制剂浓缩液，不含 EDTAPierce 蛋白酶抑制剂 XL 胶囊，不含 EDTA
含 EDTA是，采用单独的瓶装否是否否
含 DMSO是是否否否
需要溶解否（100X 浓缩液）否（100X 浓缩液）是是是
下游应用兼容性与 2D 或 IMAC 不兼容所有与 2D 或 IMAC 不兼容所有所有
所含抑制剂AEBSF、抑肽酶、乌苯美司、E-64、亮抑蛋白酶肽、胃酶抑素 A、EDTA*AEBSF、乌苯美司、E-64、胃酶抑素 A
货号78430 (24 x 100 µL)
78429（5 mL）
78438（10 mL）
87786（1 mL）		78425 (24 x 100 µL)
78437（5 mL）
78439（10 mL）
87785（1 mL）		A32963（每片用于 50 mL 裂解液）
A32953（每片用于 10 mL 裂解液）		A32965（每片用于 50 mL 裂解液）
A32955（每片用于 10 mL 裂解液）		A37989（每个胶囊用于 500 mL 裂解液）

*仅在 EDTA 配方中包含

高效的广谱蛋白酶抑制剂

证明Pierce蛋白酶抑制剂混合物片剂可在各种裂解液中有效抑制广谱蛋白酶的图表

图1.Pierce 蛋白酶抑制剂片剂可以抑制不同组织裂解物和细胞系中的蛋白酶活性。在添加（蓝条）和不添加（黑条）Pierce 蛋白酶抑制剂片剂的情况下，测定细胞和组织裂解物（1mg/mL）的蛋白酶活性。图片显示了蛋白酶抑制的百分比。

有效抑制蛋白酶活性

图 2.三种市售蛋白酶抑制剂片剂之间的性能比较。在分别添加了配方优化的 Thermo Scientific Pierce 蛋白酶抑制剂迷你片剂，Roche™cOmplete™ 蛋白酶抑制剂片剂、含或不含 EDTA 的 Sigma-Aldrich™ SIGMAFAST™ 蛋白酶抑制剂片剂的情况下，胰腺提取物（100μL; 0.5μg/μL）与淬灭的荧光胰蛋白酶、半胱氨酸、金属蛋白酶和组织蛋白酶裂解底物一起孵育。37 °C 下孵育 1 小时，并在相应的发射光下检测荧光信号。图片显示了各品牌蛋白酶抑制剂相应的蛋白酶活性抑制效率。
磷酸酶

广谱磷酸酶抑制剂混合物

 浓缩液速溶片剂
 Halt磷酸酶抑制剂浓缩液Pierce磷酸酶抑制剂片剂
 Halt 磷酸酶抑制剂浓缩液Pierce 磷酸酶抑制剂片剂
含 DMSO是否
需要溶解否（100X 浓缩液）是
下游应用兼容性与 2D 或 IMAC 不兼容所有
所含抑制剂氟化钠、正钒酸钠、焦磷酸钠、β-甘油磷酸钠
货号78428 (24 x 100 uL)
78420（1 mL）
78426 (5 x 1 mL)
78427（10 mL）		A32957（每片迷你片剂用于 10 mL 裂解液）


磷酸酶抑制剂能够保持蛋白磷酸化状态

图 3.细胞提取物中的蛋白磷酸化状态被保留。在添加或不添加磷酸酶抑制剂的情况下提取蛋白，通过蛋白免疫印迹法检测提取物中总蛋白与磷酸化蛋白的相对水平。(A) HCT116 细胞经血清饥饿处理后，用 IGF 处理 15 分钟或作为对照细胞留置。使用 IP 裂解液和配方优化的 Thermo Scientific 蛋白酶和磷酸酶复合型抑制剂（不含 EDTA）制备细胞裂解物。将 500μg 裂解物与 5μg 磷酸化 AKT 抗体在 4ºC 下孵育过夜。然后将复合物与 Thermo Scientific Pierce 蛋白 A/G 磁珠在室温下孵育 1 小时。漂洗磁珠并在低 pH 下洗脱。（B）在分别添加 Pierce 磷酸酶抑制剂迷你片剂、Roche™ PhosStop™ 磷酸酶抑制剂片剂以及 Sigma-Aldrich™ 磷酸酶抑制剂混合液 2 和 3 的配方情况下，通过将提取物与可测量磷酸酶活性的荧光底物（MFP 或 FDP）一起孵育，从而测定肾脏提取物（25μL；0.5 μg/μL）中对蛋白磷酸酶、碱性磷酸酶和酸性磷酸酶活性的抑制程度。37 °C 下孵育 1 小时，并在相应的发射光下测定荧光信号。图片显示了各品牌磷酸酶抑制剂相应的磷酸酶活性抑制效率。


抑制磷酸酶活性以保持磷酸化状态

Pierce磷酸酶抑制剂对肝脏和脾脏蛋白提取物的磷酸酶活性的抑制作用
图 4.Thermo Scientific Pierce 磷酸酶抑制剂可保护细胞和组织提取物中的蛋白磷酸化状态免受磷酸酶的影响。在不添加 (-) 或添加 (+) 磷酸酶抑制剂的情况下提取蛋白质，测定了 (A) AKT 和 PDGFR 在血清饥饿处理、PDGF刺激 (100 ng/mL) 的 NIH 3T3 细胞提取物中和 (B) ERK1/2 在肝脏和脾脏组织提取物中总蛋白和磷酸化蛋白的相对水平。使用 (C) Pierce 磷酸酶抑制剂片或另一种市售的磷酸酶抑制剂片处理后，测定小鼠脑提取物对蛋白磷酸酶、碱性磷酸酶和酸性磷酸酶活性的抑制程度。
蛋白酶和磷酸酶

复合型蛋白酶和磷酸酶抑制剂混合物

 浓缩液浓缩液，无 EDTA速溶片剂速溶片剂，无 EDTA
 Halt 蛋白酶和磷酸酶抑制剂浓缩液Halt 蛋白酶和磷酸酶抑制剂浓缩液，不含 EDTAPierce 蛋白酶和磷酸酶抑制剂片剂Pierce 蛋白酶和磷酸酶抑制剂片剂，不含 EDTA
含 EDTA是的，采用单独的瓶装否是否
所含抑制剂抑肽酶、乌苯美司、E-64、亮抑蛋白酶肽、氟化钠、正钒酸钠、焦磷酸钠、β-甘油磷酸钠、EDTA*
含 DMSO是是否否
需要溶解否（100X 浓缩液）否（100X 浓缩液）是是
下游应用兼容性与 2D 或 IMAC 不兼容所有与 2D 或 IMAC 不兼容所有
货号78442 (24 x 100 μL)
78440（1 mL）
78444 (5 x 1 mL)
78446 (10 mL)		78443 (24 x 100 μL)
78441（1 mL）
78445 (5 x 1 mL)
78447 (10 mL)		A32959（每片迷你片剂用于 10 mL 裂解液）A32961（每片迷你片剂用于 10 mL 裂解液）

*仅在 EDTA 配方中包含

这些复合型蛋白酶和磷酸酶抑制剂浓缩液与片剂含有靶向和抑制丝氨酸、苏氨酸、酪氨酸磷酸酶，以及丝氨酸、半胱氨酸和天冬氨酸蛋白酶和氨基肽酶的化合物。EDTA 可以抑制金属蛋白酶的活性，液体抑制剂中的 EDTA 为独立瓶装，片剂中的 EDTA 直接包含于配方中。这些广谱抑制剂可同时防止蛋白质降解和保持磷酸化状态，只需一管或一片，即可全面保护蛋白完整性。

Pierce蛋白酶和磷酸酶复合型抑制剂cocktail对胰腺组织中蛋白酶和磷酸酶活性的有效性
图 5.使用复合型片剂有效抑制蛋白酶和磷酸酶。加入抑制蛋白酶和磷酸酶活性的片剂，然后检测酶活性的抑制程度。加入胰腺组织提取物的淬灭荧光底物，底物裂解后检测荧光信号。图片显示了酶活性的抑制程度。(A) 蛋白酶检测反应在 37℃ 下孵育两小时。(B) )酸性磷酸酶检测反应在 37℃ 下孵育一小时。
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技术文档

产品手册

蛋白酶抑制剂

磷酸酶抑制剂

复合型蛋白酶和磷酸酶抑制剂

应用指南

  • 蛋白样品制备中的蛋白酶和磷酸酶抑制方法概述

    • 相关产品及下游应用

    蛋白透析和浓缩

    如果蛋白浓度过低而无法进行后续实验和分析，您可以使用离心浓缩管快速浓缩样本。

    ELISA试剂盒和试剂

    高质量优化的 Invitrogen ELISA试剂盒使您能够从容、可靠和一致地测量靶标特异性蛋白质。

    蛋白电泳

    蛋白凝胶电泳（SDS-PAGE）是一种在进行下游检测或分析前分离蛋白混合物的常用方法。

    蛋白免疫印迹

    Western Blot工作流程旨在提升处理效率、重现性和结果准确性，有助于以更短的时间和更简单的操作，实现卓越的免疫印迹结果，为课题研究提供可靠的数据基础。

    仅供科研使用，不可用于诊断目的。