选择合适的体积排阻色谱树脂和色谱柱尺寸

凝胶过滤色谱常用于借助各种体积排阻色谱树脂进行脱盐和缓冲液置换。脱盐涉及大分子与小分子(如缓冲液成分、盐和未反应的标记试剂)的色谱分离。缓冲液置换用于将蛋白或分子转换至更适合电泳、离子交换、亲和色谱或储存等应用的缓冲液中。

在脱盐和缓冲液置换过程中,在用于平衡凝胶过滤柱内树脂的相同缓冲液中回收大分子组分。如果使用水进行平衡,则将对组分进行脱盐。如果使用另一种缓冲液,将会发生缓冲液置换。用所需缓冲液预平衡后,可使用下列各脱盐产品进行缓冲液置换。

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Zeba 树脂凝胶过滤色谱产品

Thermo Scientific Zeba 脱盐产品含有专有的高性能体积排阻树脂,与其他市售树脂相比具有出色的脱盐和蛋白回收特性。即使是极稀 (25 µg/mL) 的蛋白样本,在经过成功处理后,也可保留(去除)超过 95% 的盐和其他小分子,同时对蛋白和其他大分子保持高回收率。

Zeba 脱盐离心柱(有五种柱尺寸可供选择)和两种 MWCO(7K 和 40K)提供了易于使用的形式,与标准滴柱方法相比,显著改善了结果。无需等待样本从重力流中滤出和监控从中进行蛋白回收的组分。Zeba 脱盐柱不需要色谱分析仪器、繁琐的色谱柱制备或平衡步骤,并且能够在约8分钟内处理多份样本。

Zeba 脱盐树脂还预填充在96孔过滤/离心板和两种尺寸的 Pierce 色谱纯化柱中。

Zeba 脱盐树脂产品和推荐样本量。

7K MWCO40K MWCO树脂床样本量
微量离心柱微量离心柱0.075 mL2-12 µL
0.5 mL 离心柱0.5 mL 离心柱0.5 mL30-130 µL
2 mL 离心柱2 mL 离心柱2 mL200-700 µL
5 mL 离心柱5 mL 离心柱5 mL600-2000 µL
10 mL 离心柱10 mL 离心柱10 mL1500-4000 µL
96孔离心板96孔离心板0.55 mL20-100 µL
1 mL 纯化柱 1 mL50-250 µL
5 mL 纯化柱 5 mL100-1500 µL

备注:此处列出的样本量范围适用于 7K MWCO 产品。40K MWCO 产品的范围略有不同;请参见产品页面了解具体值。

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聚丙烯酰胺体积排阻色谱柱和离心柱

Thermo Scientific 聚丙烯脱盐柱预填充聚丙烯酰胺体积排阻树脂。6K MWCO 色谱柱具有 90-180 µm 的湿微珠直径。1.8K MWCO 色谱柱具有 45-90 µm 的湿微珠直径。这些色谱柱适用于分离低 MW 化合物,分离范围为 0.1-1.8K。聚丙烯酰胺体积排阻树脂不会被酶降解,也不会为微生物生长提供营养物质。该树脂的亲水性很强,因此可极大限度地降低与样本分子的疏水结合。聚丙烯酰胺树脂还可消除使用交联多糖载体时可能发生的低 MW 糖对样本造成的污染。此外,可在不破坏载体的情况下去除氧化剂。在极端 pH 值条件下,该树脂易发生酰胺基团水解,因此建议在室温下 pH 值介于 2-10 时操作。聚丙烯酰胺树脂还可在 120°C、pH 值为 5.5-6.5 的条件下耐受30分钟高压灭菌。

聚丙烯酰胺脱盐柱和推荐样本量。

色谱柱尺寸树脂床样本量
0.7 mL 离心柱0.7 mL30-120 µL
5 mL 重力柱5 mL最高 1.25 mL
10 mL 重力柱10 mL最高 2.5 mL

备注:该基质的最佳样本量为色谱柱树脂床的 1/10。但是,如果不需要进行 100% 脱盐,则可使用 1/4 柱床体积的样本量。


葡聚糖树脂凝胶过滤色谱柱

Thermo Scientific 葡聚糖脱盐柱 (5K MWCO) 预填充交联葡聚糖体积排阻树脂。湿微珠直径为 50-150 µm。树脂具有良好的硬度,易于处理且具有出色的流动特性。葡聚糖树脂在水、盐溶液、有机溶剂、碱性和弱酸性溶液中均稳定。其耐热性强,且在干燥状态下或在保持中性 pH 值的溶液中可耐受 120°C、30分钟的高压灭菌,同时不影响其色谱性能。

葡聚糖脱盐柱和推荐样本量。

色谱柱尺寸树脂床样本量
5 mL 重力柱5 mL最高 1.25 mL
10 mL 重力柱10 mL最高 2.5 mL

备注:该基质的最佳样本量为色谱柱树脂床的 1/10。但是,如果不需要进行 100% 脱盐,则可使用 1/4 柱床体积的样本量。

仅供科研使用,不可用于诊断目的。