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Thermo Scientific Zeba 脱盐离心柱广泛用于各种涉及从可溶性低分子量物质(例如盐)中分离蛋白和其他大分子的研究应用,这些物质可能对分析物的稳定性产生不利影响,或干扰下游应用。Zeba 脱盐离心柱也可应用于蛋白溶液缓冲液置换,以在进行蛋白免疫印迹、免疫沉淀反应、活性测定和质谱分析等下游应用之前,转换到更合适的缓冲体系。
Zeba 脱盐离心柱具有出色的脱盐和蛋白回收特性,可在宽范围的样品含量和蛋白浓度下保持一致的性能。即使是处理稀释的蛋白样品,也可以实现高蛋白回收率和超过 95% 的杂质去除率。
使用 Zeba 脱盐离心柱可加快脱盐过程,因为无需等待样品从重力柱中流出。Zeba 提供了一种快速高效的方案,可在单一组分中收集和浓缩除杂后的样品,无需色谱柱系统,并可同时处理多个样品。
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Zeba 离心脱盐柱 | Zeba 96 孔离心板 | Zeba 离子色谱柱 | |
样品体积范围 | 2 μL–4 mL | 20-100 μL | 15-250 μL |
树脂填料体积 | 75 μL-10 mL | 550 μL | 1 mL-5 mL |
树脂 MWCO* | 7 kDa、40 kDa | 7 kDa、40 kDa | 7 kDa、40 kDa |
自动化 | 否 | 是 | 否 |
兼容 FPLC | 否 | 否 | 是 |
*截留分子量 (MWCO)
凝胶过滤层析基于分子量截留 (MWCO) 原理,可根据分子量来区分大小分子。与透析相比,该技术具有速度快、可兼容有机溶剂和其他溶剂的优势,并能够将含杂质的原液浓缩至体积相对更小的产物,这对处理有毒/放射性物质是有利的。
图1.Zeba 微量脱盐离心柱 (7K MWCO) 回收性能。不同浓度的 BSA 和泛素样品均使用 Zeba 微量脱盐离心柱 (7K MWCO) 以及其他品牌的产品进行处理。数据表明,即使在蛋白浓度极低的情况 (250 ng) 下,Zeba 脱盐柱的性能仍优于其他品牌,对 BSA 和泛素能实现更高的蛋白回收率。
Zeba 40K 脱盐离心柱含有一种新型且强劲的高性能尺寸排除色谱树脂,可提高蛋白回收率,并且提供比以往更高的脱盐和分子量回收率。
图2.使用 Zeba 40K 离心柱可在低蛋白上样量下实现出色的样品回收率。将不同浓度的 BSA 和 IgG 以 50µl 等分,上样至 0.5 mL Zeba 40K、其他品牌 C 或其他品牌 B 的离心柱中。所有色谱柱均用 PBS 进行平衡,然后按照各制造商对每种树脂的说明进行离心分离。通过 BCA 测定确定每个流过样品的回收蛋白 (%)。在 SDS-PAGE 上对流出产物进行分析,并用考马斯蓝或银染色剂染色。尽管所有三种树脂都高效回收了 12.5 μg 总蛋白上样量,但使用其他品牌的树脂在 1 μg 和 250 ng 蛋白上样量下观察到较低的回收率。
图 3.新型增强 Zeba 40K 树脂在去除小蛋白方面比竞品更有效。将不同分子量的纯化蛋白样品 (0.5mg/mL) 以 50 ul 等分,分别上样至已在 PBS 中平衡的 0.5 mL Zeba 40K、其他品牌 C 或其他品牌 B 离心柱中。按照制造商对各树脂的说明对离心柱进行离心分离,并通过 BCA 对每份流出产物中的回收蛋白进行定量 (%)。与其他品牌的离心柱相比,Zeba 40K 树脂在去除较小蛋白时更加高效(较低的小蛋白回收率值可证明这一点)。
仅供科研使用,不可用于诊断目的。