在毛细管电泳过程中,将循环测序反应的产物以电动方式进样到填充有聚合物的毛细管中。施加高压后,带负电荷的 DNA 片段便会穿过毛细管中的聚合物移动到正极。

施加高压后,带负电荷的 DNA 片段便会穿过毛细管中的聚合物移动到正极(图 1)。毛细管电泳可分离分子量仅相差一个核苷酸的 DNA 分子。

到达正电极前不久,按大小分离的荧光标记 DNA 片段穿过激光束的路径。激光束会导致片段上的染料发出荧光。Applied Biosystems DNA 分析仪上的光学检测装置可检测荧光(图 2)。

Data Collection 软件将荧光信号转换为数字数据,然后将数据以 *.ab1 文件格式记录。由于每种染料在激光激发下发出不同波长的光,因此可以在一次毛细管进样中检测并区分所有 4 种颜色,由此可检测并区分所有 4 种碱基。

 

毛细管电泳仪器选择指南

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 仪器
毛细管数96482481641
兼容的应用:
(S) 支持;(A) AB 验证;(C) 客户验证;(N) 不支持
BAC 末端测序SSSSSSS
校验克隆构建体SSSSSSS
从头测序SSSSSSS
杂合子检测&重新测序(基于 SNP)SSSSSSA
HLA 分型NNSSSSC
甲基化SSSSSSC
mtDNA 测序SSSSSSS
重新测序
- 比较基因组学SSSSSSS
- 插入/缺失SSSSSSS
SAGE™ 法CCCCCCA
SNP 分析SSSSSSS
PCR 产物常规大小分析SSSSSSS
片段长度多态性
- AFLPSSSSSSS
- RFLPAAAAAAA
大片段分析
- BAC 指纹图谱分析AAAAAAN
- VNTRCCCCCCC
微卫星
- 基因分型SSSSSSS
- 法医学/HID 分析NNSSSSS
- 不稳定性/RERAAAAAAA
嵌合体研究CCCCCCC
验证分析
- SSCPNNNNAAS
相对荧光定量
- 杂合性缺失 (LOH)SSSSSSS
SNP 基因分型
- SNaPshot 系统AASSSSS
- SNPlex™ 系统SSSSSNN
DNA 蛋白结合检测& DNA 指纹图谱分析CCCCCCC

仅供科研使用,不可用于诊断目的。