Sanger 测序反应物纯化

经过测序反应后，务必要去除未结合的染料终止子和可能与毛细管电泳进样液竞争的盐。未结合的染料终止子可能与测序模板共迁移，从而导致碱基识别错误，而过量的盐会转化为不良信噪比。

尽管乙醇沉淀法对模板质量的变化可能很敏感，但 BigDye® XTerminator™ 纯化试剂盒提供了一种强大的化学物质，可产生一致的高质量模板，不受模板类型或浓度的限制。BigDye XTerminator 基于微珠的试剂可隔离测序反应杂质，包括盐离子、未结合的染料和 dNTP，从而防止在毛细管电泳过程中与染料标记延伸产物共同进样。

我们建议使用 BigDye® XTerminator™ 纯化试剂盒进行测序模板纯化。BigDye XTerminator 是一种适用于测序反应的快速、简单的纯化方法，可提供高质量数据，以及较长读段、较强信号和卓越的短片段回收率。纯化过程可在 40 分钟内完成，手动操作时间只需不到 10 分钟，并且无需移液（图 1）。得到的纯化样本不含染料团，并且非常稳定，如果毛细管电泳后不能立即进行纯化，则这一特性就很有帮助。易于遵循的程序适合 96 孔和 384 孔规格的程序。密封的反应板在室温下可稳定保存 48 小时，或者在 4°C 下可稳定保存 10 天。