StemPro NSC SFM - 无血清人神经干细胞培养基

图1. StemPro NSC SFM中培养的神经干细胞表型标志物的表达。 在 StemPro NSC SFM 中培养 17 代后的 NSC 的表型标志物表达情况。 NSC 表达了常见表型标志物（巢蛋白，Sox2）和增殖标志物 (Ki67)。 没有迹象表明有残存的 hESC (Oct4)。 每幅图中的插图显示了核染料DAPI的染色形态。

StemPro NSC SFM 出众的性能，能使贴壁培养和神经球悬浮培养的 hNSC 保持良好的扩增与多能性。 人NSC中包括极小一部分总CNS细胞群，因此扩增过程十分重要，只有生成足够的细胞，才能用于研究人NSC的分化途径并探索其下游临床应用。hNSC传代的次数有限，其后增殖和分化潜能逐渐下降。 因此，使每代hNSC细胞的总产量最大化十分重要 (图2)。


图2. 与其他同类无血清NSC培养基产品相比，采用StemPro NSC SFM可实现出众的NSC扩增能力。 与标准的 N2 补充培养基配方和竞争产品的神经干细胞培养基配方相比，StemPro NSC SFM 具有更好的细胞扩增能力。 分别测定 hNSC 在 Invitrogen StemPro NSC SFM、竞争产品 SCT 培养基、Sigma 培养基和 N2 补充培养基中的增殖情况。 将ESC来源的hNSC以1 x 10 ⁴个细胞/孔的密度接种于Cellstart™基质包被的96孔板中，在各培养基中分别培养3天。 采用 CyQUANT增殖分析试剂盒 (货号：C35006) 进行间接细胞计数，数据显示了染色细胞的平均相对荧光强度 (n=6)。

图3. hNSC在StemPro NSC SFM中稳定增殖，实现了贴壁和悬浮培养系统的培养。 StemPro NSC SFM 使 hNSC 的多代培养更为灵活，使 hNSC 作为贴壁物 (A) 或神经球培养物 (B) 时均可保持多潜能特性。 hNSC 源自在 CELLstart™ 底物上的 NSC SFM 中培养了 7 代的 hESC。 三级神经元分离自在 NSC SFM 中培养的胎儿组织。

hNSC 被定义为能够分化为三种不同的细胞系，即神经元细胞、少突状胶质和星状胶质细胞。 StemPro NSC SFM提供了一种稳定的无血清神经干细胞培养基，可以维持干细胞的多潜能分化能力以及根据特定的实验要求促进hNSC向理想谱系分化的能力 (图4)。


图4. 人神经干细胞 (hNSCs) 在StemPro NSC SFM培养下的分化潜力。在StemPro NSC SFM培养基中培养的hNSC分化成神经元及胶质细胞。 上图 (A) 神经元以anti-HuC/D抗体 (绿色) 及anti-Dcx抗体 (红色) 标记。(B) 少突细胞谱系的细胞，以anti-GalC抗体 (红色) 标记。 细胞核以DAPI (蓝色) 标记，神经元则以anti-Dcx抗体 (绿色) 标记。(C) 星形胶质细胞谱系的细胞，以anti-CD44抗体 (绿色) 标记。 细胞核以DAPI (蓝色) 标记，神经元则以anti-Dcx抗体 (绿色) 标记。