由于RNA易被各种内源性和外源性RNA酶消化，而且这些RNA酶几乎存在于与人接触的所有物体中，因此必须极其小心，防止样本污染和降解。 审慎并遵循一些简单的原则可以制备出完整且高纯度的RNA，避免形成降解的RNA。 总体目标是保持您的样本mRNA表达谱的完整性，以便在下游应用中生成有意义的数据。

切记

切记佩戴手套并经常更换。 RNA酶可经皮肤分泌，与皮肤接触将会污染制备物。

切记去除移液器、凝胶盒和凝胶梳上的污染。 采用RNaseZap™、去RNA酶污染剂溶液处理是一种快速彻底的方法，可确保您的设备无任何RNA酶。

切记使用无RNA酶的试剂、试管和吸头。

切记快速处理组织，可以采用裂解液裂解、冷冻或保存于RNAlater™组织储存/RNA稳定溶液中。

切记在提取RNA前，使组织维持冷冻或保存于RNAlater中。 这可以防止内源性RNA酶破坏RNA，并保护样本内RNA的表达图谱。

切记用研钵研磨置于干冰上或液氮冻存的冷冻组织。 随后，采用电动匀浆器在裂解缓冲液中匀浆。 保持组织的冷冻状态，可以在裂解过程中使内源性RNA酶保持灭活状态。 (如需了解更多信息，查看“实验小技巧： 组织冻融对RNA完整性的影响”)

切记在处理两个样本之间，用裂解缓冲液冲洗匀浆器，以防交叉
污染。

切记充分裂解并提取。 组织碎片未裂解意味着RNA损失。

切记采用酚萃取时，涡旋振荡至少2分钟。 这将促进紧密结合的蛋白质的去除，这些蛋白质一般与RNA有关 (会抑制下游反应)。

Dont's

切勿用手触摸任何与RNA直接接触的物品。

切勿在样本上方呼气。 一些研究人员甚至应戴面罩。

切勿高压蒸汽灭菌移液器吸头，因为大多数高压灭菌器中的水蒸气含有RNA酶。

切勿在处理前冲洗RNAlater保存的组织

切勿使冷冻组织融解。

如果RNA需要用于下游应用领域，切勿用DEPC重悬RNA。 残留的DEPC会抑制一些酶的活性，且对RT和翻译反应存在不良影响。