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因为磷酸钙共沉淀所需组分易于获得且价格低廉，自20世纪70年代初问世以来，磷酸钙共沉淀一直是普遍的转染方法（Graham 和 van der Eb，1973）。另外，该技术易于掌握，对多种类型的培养细胞有效，既可用于多种培养细胞类型的瞬时转染，也可用于稳定转染。然而，磷酸钙共沉淀对 pH 值、温度和缓冲盐浓度的轻微变化敏感，容易产生变异性，可能对多种类型的细胞培养物具有细胞毒性，尤其是对原代细胞有细胞毒性。此外，该方法不适合在体内将核酸转移到动物全身中，与脂质体介导的转染等其他化学转染方法相比，转染效率相对较差。
磷酸钙共沉淀的原理是在缓冲盐水/磷酸盐溶液中将 DNA 与氯化钙混合，生成磷酸钙-DNA 共沉淀物，然后分散到培养细胞上。磷酸钙有利于共沉淀物中凝聚的 DNA 与细胞表面结合，DNA 通过内吞作用进入细胞。加入 DNA-氯化钙溶液的同时对磷酸盐缓冲液通气有助于确保形成尽可能细密的沉淀，这一点非常重要，因为 DNA 团块不会有效地粘附到细胞上或进入细胞。
将 DNA 与氯化钙混合，并以受控方式加入缓冲盐水/磷酸盐溶液中。
室温孵育，以生成含有凝聚 DNA 的极小不溶性颗粒沉淀。
将 DNA-磷酸钙共沉淀物加入细胞中，其会粘附到细胞膜上。共沉淀物通过内吞作用进入细胞质。
检测细胞的瞬时基因表达，或对其进行选择以实现稳定转染。
将 DNA 与氯化钙混合，并以受控方式加入缓冲盐水/磷酸盐溶液中。
室温孵育，以生成含有凝聚 DNA 的极小不溶性颗粒沉淀。
将 DNA-磷酸钙共沉淀物加入细胞中，其会粘附到细胞膜上。共沉淀物通过内吞作用进入细胞质。
检测细胞的瞬时基因表达，或对其进行选择以实现稳定转染。
磷酸钙共沉淀操作流程。
仅供科研使用，不可用于诊断目的。