阳离子脂质体介导的转染是将外源性遗传物质导入细胞中的最普遍方法之一。尽管第一代脂质体转染试剂依赖于人工脂质体,可包裹核酸,然后与细胞膜融合,并将其内容物沉积在内部(Fraley 等人,1980)。较新的阳离子脂质体试剂通过带负电荷的核酸与合成脂质体试剂带正电荷的头基之间的静电相互作用,自发形成凝聚的核酸-阳离子脂质体试剂复合物。目前认为,这些复合物可通过内吞作用被细胞摄取,然后在细胞质中释放。进入细胞后,转染的 DNA 易位到细胞核并表达,但具体机制尚不清楚。而 RNA 或反义寡核苷酸则跳过易位步骤,留在细胞质中(参见阳离子脂质体介导转染)。

阳离子脂质体介导转染的优点是能够高效转染许多细胞系,适用于高通量筛选,并能够递送任何大小的 DNA 以及 RNA 和蛋白。此外,该方法既可应用于稳定表达,也可应用于瞬时表达,与其他化学方法不同的是,其可用于将 DNA 和 RNA 向动物和人体内转移。阳离子脂质体介导转染的主要缺点是转染效率依赖于细胞类型和培养条件,因此,需要对每种细胞类型的转染条件和转染试剂进行优化(参见阳离子脂质体介导转染的考虑因素)。

Life Technologies™ 提供了广泛的阳离子脂质体介导转染试剂(包括 Lipofectamine 3000 试剂),用于将 DNA、RNA、siRNA 或寡核苷酸有效地导入各种细胞类型中。Lipofectamine 3000 试剂采用先进的脂质纳米颗粒技术,能够在众多难以转染的细胞类型中实现卓越的转染性能和可重现的结果,同时提供更高的细胞活力。关于选择适合您应用的转染试剂的更多信息,请参见阳离子脂质体转染试剂

在单独的试管中稀释 RNA、siRNA 或寡核苷酸和转染试剂。

合并核酸和转染试剂以形成复合物。阳离子脂质体上的正电荷有助于与核酸的磷酸主链结合。

向细胞中加入核酸-转染试剂复合物。阳离子脂质体上的正电荷有助于复合物与膜结合。

复合物通过内吞作用进入细胞。

检测转染后细胞的基因表达或沉默情况。

在单独的试管中稀释 RNA、siRNA 或寡核苷酸和转染试剂。

合并核酸和转染试剂以形成复合物。阳离子脂质体上的正电荷有助于与核酸的磷酸主链结合。

向细胞中加入核酸-转染试剂复合物。阳离子脂质体上的正电荷有助于复合物与膜结合。

复合物通过内吞作用进入细胞。

检测转染后细胞的基因表达或沉默情况。

阳离子脂质体介导递送操作流程。

仅供科研使用,不可用于诊断目的。