病毒转染

对于不适合脂质体介导转染的细胞类型，通常使用病毒载体进行转染。病毒介导转染也称为转导，这种转染方式可在难以转染的细胞类型中实现蛋白过表达或敲低，是临床研究中最常用的方法（Glover 等人，2005；Pfeifer 和 Verma，2001）。腺病毒、致癌逆转录病毒和慢病毒载体已广泛用于哺乳动物细胞培养物和体内的基因递送。病毒基因转移的其他知名示例包括基于杆状病毒和牛痘病毒的载体。有关各种病毒递送系统的更多信息，请参见病毒载体。

虽然病毒能整合到宿主基因组中，体内转染效率高且能持续基因表达，因而成为临床试验中基因递送的首选系统，但也存在许多缺点，包括其免疫原性和细胞毒性、载体方面存在技术挑战且生产程序耗时费力、生物安全要求导致高成本、低包装能力（大多数病毒载体约为 10 kb，而非病毒载体约为 100 kb）以及病毒载体制剂的感染性存在变异性（Glover 等人，2005；Kim 和 Eberwine，2010；Vorburger 和 Hunt，2002）

典型的转导方案涉及改造携带转基因的重组病毒、在包装细胞系中扩增重组病毒颗粒、纯化和滴定扩增后的病毒颗粒以及随后感染目标细胞。虽然在原代细胞和细胞系中实现的转导效率相当高（约为 90%-100%），但只有携带病毒特异性受体的细胞才能被病毒感染。同样重要的是应注意，用于病毒扩增的包装细胞系需要用非病毒转染方法转染。

病毒递送操作流程。