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Molecular Probes®は、データの完全性を損なうことなしに測定データから死細胞を 排除することは重要です。Molecular Probes®のLIVE/DEAD® Fixable Dead Cell Stain Kitは、固定・透過処理後のサンプルにおける、細胞生存率の正確な評価ができるようデザインされています。 |
これらのフローサイトメトリーベース試薬には以下のツールが含まれています
LIVE/DEAD® Fixable Dead Cell Stain Kit | 励起波長 (nm) | 蛍光波長 (nm) | カタログ番号 |
---|---|---|---|
Blue Dead Cell Stain | UV | 450 | L23105 |
Violet Dead Cell Stain | 405 | 440 | L34955 |
Aqua Dead Cell Stain | 405 | 525 | L34957 |
Yellow Dead Cell Stain | 405 | 570 | L34959 |
Green Dead Cell Stain | 488または532 | 530 | L23101 |
Red Dead Cell Stain | 488または561 | 615 | L23102 |
Far Red Dead Cell Stain | 633/635 | 665 | L10120 |
Near-IR Dead Cell Stain | 633/635 | 775 | L10119 |
Dead Cell Stain Sampler | 各種 | 450–775 | L34960 |
Molecular Probes®のLIVE/DEAD® Fixable Dead Cell Stain Kitは、反応性蛍光色素と細胞性タンパク質(アミン)との反応に基づいてます。
生細胞群と死細胞群の蛍光強度差は、通常50倍を超えるため、細胞群を完全かつ同時に区別することが可能となります。
さらに、色素はタンパク質へ共有結合するため、一般に細胞内免疫表現型検査および病原体活性のための条件であるホルムアルデヒド固定処理後もサンプルの生死解析が可能です。
図1LIVE/DEAD® Fixable Dead Cell Stain Kitの原理。 さらに表示 + 生細胞(上)では、細胞表面のみで蛍光色素との反応が起こるため、全体で弱い蛍光を発します。損傷膜を持つ死細胞(下)は表面と細胞内で反応し、明るい蛍光を発します。 |
LIVE/DEAD® Fixable Dead Cell Stain Kitには、以下のような幅広い利点があります:
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| LIVE/DEAD® Fixable Violet Dead Cell Stain Kit を用いた生細胞のゲーティングにより、染色のアーティファクトを排除することが可能。散乱光(A)を使用した生細胞ゲーティングと、LIVE/DEAD® Fixable Violet 色素(B)を使用した生細胞ゲーティングの比較において、散乱光ゲーティングで生じる染色副産物が示されている。続けて行った解析において、LIVE/DEAD® Fixable Violet色素(D)を使用した場合には死細胞が排除されているのに対し、散乱光(C)を使用した後続の解析では多数の死細胞が確認された。( Elsevier社の許可を得て転載。 )(Amine reactive dyes: an effective tool to discriminate live and dead cells in polychromatic flow cytometry.Perfetto SP, et.al., J Immunol Methods 313:199(2006))。 |
LIVE/DEAD® Fixable Dead Cell Stainを使用した実験におけるコンベンセーションの設定には、ArC™ Amine Reactive Compensation Bead Kitが最適なツールであると、多くの研究者が賛同しています。
製品名 | サイズ | カタログ番号 |
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ArC™ Amine Reactive Compensation Bead Kit | 1キット | A10346 |