概要
ピーク
ピーク面積の精度
圧力
保持時間
ベースライン

HPLC分析やUHPLC分析で問題が発生しましたか？以下のセクションではLCでのトラブルシューティングのヘルプとして、UHPLCとHPLCで一般的な問題の症状および根本原因と解決策のリスト、そしてナノLC、蛍光、荷電化粒子検出などの特殊なテクノロジーを利用する場合の包括的なソリューションを紹介しています。以下の追加リソースも用意されています。

HPLC装置マニュアル ›
各装置のマニュアルにはトラブルシューティングのセクションがあり、そこにはThermo Scientific HPLC装置や関連機器のオペレーション中に発生する可能性のある問題を特定してトラブルシューティングを行うために必要な、具体的なエラーコードとメッセージのリストが掲載されています。

HPLCナレッジベース ›
当社のナレッジベースには、トラブルシューティングの最新のヒント、コツ、ツールが多数掲載されています。ナレッジベースを用いたトラブルシューティング情報の検索では、すでに提供が停止されたThermo Scientific製品についても調べることもできます。

Chromeleon CDSのリリースノート ›
Thermo Scientific Chromeleon 7.3.2クロマトグラフィーデータシステム（CDS）のリリースを契機に、Thermo Scientific Vanquish HPLCおよびUHPLC装置用に組み込み型のトラブルシューティングツールが導入されました。このツールは、Chromeleon 7.3.1 CDSに接続されたVanquishデバイスのエラーコードやエラーメッセージについて、それらを解決するためのソリューションを提示します。診断テストが利用できれば、原因の特定や問題の解決に役立ち、最後のテスト結果やステータスが表示されます。このテストは、Chromeleon 7.3.2のトラブルシューティングツールから直接開始することもできます。

ピークが出現しない
考えられる原因解決方法
装置の故障、間違った溶出条件検出器は標準的なベースラインノイズを示していますか？検出器の出力が単なる平坦な線の場合は、検出器またはデータ転送の障害です。

カラムなしで既知の試験物質を注入し、検出器の反応を確認します。
注入が行われていないか、サンプル容量が不十分サンプルがサンプルループに取り込まれていることを確認します。注入が行われていたか確認します（分析開始時の圧力低下）。
高いバックグラウンド電流／ノイズ（荷電化粒子検出、CAD）移動相の品質を確認します。ベースラインのセクションを参照してください。テクニカルノートをご覧ください。
サンプルが過度に揮発（荷電化粒子検出、CAD）フローインジェクション解析による応答性を確認します。分析対象物の蒸気圧を確認します。テクニカルノートをご覧ください。
ピークのテーリング
考えられる原因解決方法
塩基性化合物とシラノール基の相互作用タイプB（高純度）シリカまたはシールド相（極性埋め込み基など）を使用します。トリエチルアミン（TEA）などの競合塩基を使用します。あるいは（タイプAシリカカラムの場合）、ポリマーカラムを使用します。高イオン強度バッファーを使用します（置換効果 – LC/MSに非対応）。
バッファーの容量不足バッファー濃度を上げます。
固定相で微量金属とキレート化競合するキレート剤（EDTAなど）を移動相に追加します。
カラム外ボリュームが過剰短いキャピラリー接続を使用します。接続キャピラリーの内径を確認します。0.13 mm（0.005インチ）はUHPLCカラム用で、0.18 mm（0.007インチ）は従来のHPLCカラム用です。カラム外ボリュームは最小ピークボリュームの1/10を超えないようにします。Thermo Scientific ViperまたはnanoViperフィンガータイトフィッティングシステムのキャピラリーを使用します。
カラムの劣化カラムを交換します。高温の場合：高温と強力なバッファー（リン酸塩など）との組み合わせを避けます ― 非臨界温度に低下させ（40℃など）、カラムタイプを置き換えます（ハイブリッドカラムなど）。pHが高い場合：高pH対応のカラムタイプを使用します。
カラムのボイド（特にUHPLC圧力下）カラムを交換します。逆方向へのカラムのフラッシュを試してみます（排出口から廃棄口）。予防措置：カラム流量をゆっくりと増加させてカラムへの圧力ショックを回避します。過剰なpHを避けます（カラムの仕様を確認してください）。仕様圧力の70～80%未満で定期的にカラムを動作させます。
不適切なキャピラリー接続フェルールが正しく配置されているかフィッティングを確認します。ViperまたはnanoViperフィンガータイトフィッティングシステムのキャピラリーを使用します。
ピークのフロンティング
考えられる原因解決方法
フリットの目詰まり、カラムヘッドの粒子プレカラムフリットを交換します。フロンティングがすぐに再発する場合は、粒子発生源の特定を試みます（サンプル、溶離液、ポンプ機構、注入バルブ）。
カラム内のチャンネルカラムを交換します。使用条件がカラム仕様の範囲内であるか確認します（圧力やpH範囲など）。
カラムのオーバーロードサンプル量を減らします。カラム容量を増やします（内径の大きいものを使用）。
強力な溶離液にサンプルが溶解開始移動相でサンプルを溶解します。サンプルの溶媒強度または注入量を減らします。次のアプリケーションノートを参考にします：メソッド移行時の強力な溶媒の影響の解消およびピーク結果を向上させるためのカスタム注入プログラムの使用。
幅広いピーク
考えられる原因解決方法
検出器のセル容量が過度に大きいフローセル容量は最小ピークボリュームの1/10を超えないようにします。より小容量のフローセル（マイクロまたはセミマイクロ）をUHPLCまたはマイクロボアカラムで使用します。
初期のピークの幅がその後の溶出分よりも広いカラム外ボリュームが大きすぎます。キャピラリーの内径と長さ、サンプルループサイズ、フローセルなどを確認します。
検出器の応答時間（時定数）が過度に長い応答時間の選択を、最小幅ピークの半値高でのピーク幅の1/4未満にします。Chromeleonクロマトグラフィーデータシステムのプログラムウィザードを使用して、応答時間（時定数）設定を最適化します。
縦分散が高いアイソクラティック分離：保持時間が長すぎます。グラジエント溶出またはより強力なアイソクラティック移動相を使用します。保持固定相の使用量を少なくします（C18の代わりにC8など）。線速度が過度に遅い：流量を確認します。
荷電化粒子検出器（CAD）とUV検出などの比較荷電化粒子検出では噴霧に起因してUVよりもピークが広がります。
ゴーストピーク
考えられる原因解決方法
一部のピークのみ幅が広い：前回注入からの溶出ピークが遅いランタイムを延長します。グラジエントの溶出強度を高めます（有機含有量を高める）。分析の最後に、カラムを強力な溶離液でフラッシュします。
汚染（通常はインジェクターまたはカラム）サンプラーをフラッシュし、汚染されやすい部品を交換します（ニードルやニードルシールなど）。
強力な溶離液でカラムをフラッシュします（カラムのインストラクションも確認し、可能であれば、逆方向のフローでフラッシュします）。
サンプル内の干渉固相抽出（SPE）などのサンプルのクリーンアップテクニックを使用します。
ネブライザーの汚染（荷電化粒子検出、CAD）ネブライザーチャンバーの清掃が必要な場合があります。カラムを取り外します。荷電化粒子検出器の洗浄を、50/50の水：メタノールを用いて2.0 mL/minで数時間実施します。流量を0.2～0.4 mL/minに調整して一晩実施します。元の移動相組成のノイズレベルを再確認します。
溶離液の汚染水質分析：さまざまな量の水でカラムを泳動し、容量の関数として濃縮時間を測定します。水をHPLCグレードの水で置き換えます。デガッサー、溶離液修飾剤（劣化したTFAなど）、溶液の不適切な取り扱い（アミノ酸移動相調製での手袋の不使用など）によって細菌増殖が発生し、汚染発生源となる可能性もあります。
スプリットまたはダブルピーク
考えられる原因解決方法
カラムまたはガードインレットの汚染 1.ガードを交換します。
2.強力な移動相を用いてカラムをフラッシュし、バックフラッシュして廃棄します（可能な場合）。
3.分析カラムを交換します。
サンプル溶媒が過剰に強い移動相でサンプルを調製／希釈します。次のアプリケーションノートを参考にします：メソッド移行時の強力な溶媒の影響の解消およびピーク結果を向上させるためのカスタム注入プログラムの使用。
未知の干渉による共溶出効率的なサンプルクリーンアップを行います。移動相またはカラムの変更によって、選択性の調整を行います。
ローターシールの磨耗ローターシールを交換します。極端なpHアプリケーションでは、シールポリマーの適合性を確認します。
温度の不一致主として発生するのは内径> 3 mmのカラムと高いカラム温度との組み合わせです。溶離液プレヒーターを使用し、溶離液温度に起因したカラム全体での温度勾配が生じないようにします。
不適切なキャピラリー接続主として発生するのは内径> 3 mmのカラムと高いカラム温度との組み合わせです。溶離液プレヒーターを使用し、溶離液温度に起因したカラム全体での温度勾配が生じないようにします。
パッキングの完全性の損失（UHPLCアプリケーション）カラムを交換します。カラムの圧力定格を確認し、圧力仕様の最大70～80%で動作させます。カラムへの圧力をゆっくりと高めて、圧力ショックを回避します。
負のピーク
考えられる原因解決方法
分析物の吸収／蛍光が移動相より低い1.UV／蛍光の検出波長を変更します。
2.移動相にバックグラウンド吸収／蛍光の少ないものを使用します。
3.サンプルを移動相に溶解します。
アナログ出力インターフェースの極性の間違いアナログ出力のケーブル極性を確認します。
不適切な基準波長設定（DAD）サンプルによる吸収は基準波長のレンジで生じてはいけません。可能であれば、基準波長を使用しないメソッドを利用します。
ドレナージスパイク（荷電化粒子検出、CAD）PEEKチューブがドレイン／ベントアセンブリ内にあることを確認します。
マトリックスまたは移動相を原因とした蛍光物質の消光（FLD）1.移動相の組成の変化を評価します。
2.負のピークを使用した定量を検討します。
信号対ノイズ比が過剰に低い
考えられる原因解決方法
非理想的な蛍光検出器設定（FLD）最適な励起波長と発光波長のスキャン、光電子増倍管のゲインの最適化、高品質な移動相のみの使用、適切な応答時間の設定をします。
非理想的なUV検出器設定（DAD）最適な吸収波長のスキャン、適切な応答時間の設定、スリット幅と帯域幅の最適化を取扱説明書にしたがって実施します。適切なフローセルを使用します（Lightpipe 10 mmと60 mmなど）。
蛍光応答の低下
考えられる原因解決方法
脱気不足が原因のクエンチングデガッサーの動作を確認します。
装置またはサンプルが原因
考えられる原因解決方法
サンプルまたはサンプラーの問題複数回の注入を実施し、サンプラーかサンプル関連の問題かを次のように判定します。
1.ピーク面積の合計が変化 → インジェクター。
2.一部のピーク領域のみ変化 → サンプルが不安定。その検証：既知の安定した混合物を注入 → ピーク面積は変化しないはず。
3.依然として特定ピークの面積が変化する場合はチェック3としてシステム圧力の安定性と短期的な流量の安定性を確認します。
ピーク積分の設定
考えられる原因解決方法
積分デリミター位置の変動ソフトウェアの積分設定を確認します。
たとえばChromeleonクロマトグラフィーデータシステムのヘルプが参考になります。Chromeleon 7 Cobraのアルゴリズムを利用して、最適な設定を特定させるのが最適です。自動データレート設定を避け、固定データレートを使用します。
ベースラインの変動
考えられる原因解決方法
ポンプの脈動や混合リップルなどによる積分の再現性欠如次の症状にあるベースラインのテーブルを参照してください：周期的なベースライン変動。
注入量の変動
考えられる原因解決方法
オートサンプラーのバイアルからの空気の吸引インジェクターニードルのサンプリング高およびサンプル充填高を確認します。
サンプルの劣化保管条件を適切にします（サーモスタット付きオートサンプラーの使用など）。
オートサンプラーの流路系内の空気オートサンプラーの流路系のフラッシュを、該当する取扱説明書の手順にしたがって実施します。
インジェクターニードルの閉塞やニードルチップの変形ニードルを交換します。オートサンプラーの流路系から空気を除去します。
オートサンプラーの吸引速度が過大、サンプルのガス含有量が過剰吸引速度を下げて最低2～3秒かかるようにします。サンプル吸引後の遅延時間をプログラムします（3秒など）。
サンプルの脱気や吸引速度の低下を行います。
インジェクターシールでの漏出、インジェクター内の気泡インジェクターシール、パージシリンジを確認します。
オートサンプラー、注入バルブ、シリンジバルブの締め付けが緩いサンプラーの注入プロセスに関係するシールを確認し、フィッティングを締め付けます。
検出器設定の不備
考えられる原因解決方法
検出波長が不適切UV／蛍光スペクトルのフランク部での測定は、精度を損なう可能性があります。検出波長または励起／発光波長のペアの選択を、スペクトルの頂点付近にします。分析物のスペクトルが大きく異なる場合は、波長の切り替えが必要になる場合があります。
応答時間が過剰に短い、ノイズが高い、不正確な積分がトレースレベルで発生応答時間（または時定数）設定が適切なことを確認します。典型的な応答時間の選択としては、最小幅ピークの半値高でのピーク幅の1/4程度にします。詳細は、取扱説明書にしたがってください。
ネブライザー温度の不備（荷電化粒子検出、CAD）ネブライザーの温度設定を確認します。大量のTHFやハロゲン化溶媒を移動相に用いる場合、温度を30℃に設定します。分析物が半揮発性の場合、ネブライザーヒーターをオフにして反応を回復させることが必要な場合があります。
データポイントの不足データ収集レートの設定を各ピーク最低20～30データポイントにして再現可能なピーク積分にします。
前回の注入からの分析物の移行
考えられる原因解決方法
キャリーオーバー（ニードル、サンプルループ、ニードルシート由来）オートサンプラーの洗浄オプションを拡張してキャリーオーバーを低減させます。ニードル、ニードルシート、ローターシールのクリーニングをします。
カラムのメモリ効果サンプル後にブランクサンプル（注入なし）での分析を実行します。ピークが検出された場合は、カラムのメモリ効果が生じています。
強力な溶離液でカラムをフラッシュします。カラムを逆転させて（可能な場合）カラムを再度フラッシュします。カラムを交換します。
圧力の過剰な上昇／増加
考えられる原因解決方法
緩衝液の沈殿1.含有量が最大の有機物とバッファーの適合性を確認します（ビーカー内）。
2.含有量の低い有機物でシステムとカラムをフラッシュします。
3.流路系を体系的に調査して、目詰まりしている部分を特定します（検出器からポンプまで）。
毛細血管の湾曲流路系を体系的に調査して、目詰まりしている部分を特定します（検出器からポンプまで）。
ミキサー、フリット、ガード、カラムの粒子カラムの粒子サイズに適した事前ろ過済み移動相を使用します（たとえば、0.1～0.2 µmは2 µm未満の粒子用、0.45 µmは3～5 µm粒子用）。適切にサンプルをフィルタリングします。シーリング機構の部品を点検します（ピストンシール、ローターシール）。
カラムのエージング／ブロッキングカラム寿命を通じて、徐々に圧力が上昇するのは正常です。異常な圧力上昇：接続チューブの点検、温度の制御、カラムの交換をします。
勾配に応じた圧力変化これは正常です。システム圧力は、システムの流路系における移動相組成の粘度に依存します。
液体インレットまたはネブライザーの目詰まり／閉塞（荷電化粒子検出）荷電化粒子検出器の背圧を確認します。背圧は10 bar（145 psi）未満である必要があります。
過剰に高い流量または過剰に低いカラム温度の設定適切な設定にします。
圧力が過剰に低い
考えられる原因解決方法
キャピラリー接続部での漏洩1.フィッティングの締め付けを確認します（特にカラムの前）。フィンガータイトフィッティング式のPEEKキャピラリーが、理想的な位置からずれている可能性があります。
2.デッドボリュームが実質的にゼロの接続が行えるViperまたはnanoViperフィンガータイトフィッティングシステムキャピラリーを使用します。
過剰に低い流量または過剰に高いカラム温度の設定適切な設定にします。
圧力の変動
考えられる原因解決方法
ポンプ内での空気のトラップ1.溶離液を脱気しますが、オンライン真空脱気またはヘリウムスパージングを使用するのが最適です。
2.緩やかな背圧に対してポンプをパージします。
3.ポンプ出口にシリンジを付けるなどして、ポンプ中の液体を能動的に吸引します。
4.一時的に水を脱気済み有機溶媒に置き換え、個々の溶離液ラインをパージします。その後、脱気水に戻します。
ポンプのインレットまたはアウトレットチェックバルブの汚れチェックバルブカートリッジを取り出し、適切な液体（メタノールなど）の入った容器に入れ、超音波バスでクリーニングします。
ポンプチェックバルブまたはピストンシールの不具合高圧比例：圧力降下とポンプサイクルを関連付けて、不具合のあるポンプブロックを特定します。%Bを変更し、圧力降下の頻度がどのように変化するかを確認します。Thermo Scientific Chromeleonクロマトグラフィーデータシステムソフトウェアのポンプ診断機能を用いて、不具合のある部位を特定します。
溶媒ラインフリットの目詰まり溶媒ラインフリットを交換します。
保持時間の減少
考えられる原因解決方法
固定相の劣化カラムを交換します。カラムのpH要件を確認します（シリカベースのRPカラムの場合、通常はpH 2～8）。
平衡化が不十分平衡化時間を増やし、最低でもカラム容量の5～10倍にします。
カラムのオーバーロードサンプル量を減らします。カラム容量を増やします（内径の大きいものを使用）。
流量の増加流量設定を確認し、流量精度に対するOQを実行します。
固定相ディウェッティングが低い有機含有量で発生低い有機含有量に適合した固定相を使用します（極性埋め込み相など）。カラムのリウェッティングは、高い有機含有量を用いて圧力を高めることで促進されます。詳細は、カラムのケアマニュアルを参照してください。
移動相の組成1.プレミックスされた移動相を点検し、液体が均一であることを確認します。
2.OQ比例テストを実行します。
3. a）高圧比例：水性溶離液で漏洩や気泡がないか確認します。b）低圧比例：プロポーショニングバルブを確認／調整します。
保持時間の増加
考えられる原因解決方法
移動相の組成1.プレミックスされた移動相を点検し、液体が均一であることを確認します。
2.OQ比例テストを実行します。
3. a）高圧比例：水性溶離液で漏洩や気泡がないか確認します。b）低圧比例：プロポーショニングバルブを確認／調整します。
固定相の活性サイト有機修飾剤塩基を使用する（TEAなど）、緩衝強度を高める、あるいはより高カバレッジのカラム充填を使用します。
流量の減少キャピラリー接続部で漏洩しています。流量設定を確認します。
プレカラムのデッドボリューム（主にナノ／キャップアプリケーション）ピークは遅いが幅は広くない場合、デッドボリュームは分離カラムの前にあります。ピークの幅が広くて遅い場合、デッドボリュームはカラムの後にあります。
保持時間の分散
考えられる原因解決方法
平衡化が不十分平衡化時間を増やし、最低でもカラム容量の5～10倍にします。
溶離液の割合が不正確OQ溶離液比例試験を実行します。ポンプのチェックバルブを清掃／交換するか、またはプロポーショニングバルブの調整／交換をサービスに依頼します。
バッファーの容量不足バッファー濃度を> 20 mMに増やします。緩衝範囲内のpHで使用します。
インジェクションとポンプサイクルが非同期（低圧比例）Chromeleonクロマトグラフィーデータシステムのポンプドライバーなどのソフトウェア機能を有効にします。
カラム温度の変化カラムをカラムサーモスタットに配置します。オーブンの温度を監視します。
周期的なベースライン変動
考えられる原因解決方法
ポンプからの圧力変動ポンプ圧力チャンネルを記録して、圧力リップルが一時的なものか永続的なものかを特定します。ポンプの影響は、ポンプサイクルと同期したベースライン変動によって示唆されます。ポンプをパージし、一般的な機能を確認し（診断テストなど）、ポンプパネルで予圧値を読み取りマニュアルの値と比較します（Thermo Scientificのポンプのみ）。用いる溶離液／流量について適切な混合量が選択されていることを確認します。
ポンプの流路系内の空気1.溶離液を脱気しますが、オンライン真空脱気またはヘリウムスパージングを使用するのが最適です。
2.ポンプをパージします。
3.ポンプ出口にシリンジを付けるなどして、ポンプ中の液体を能動的に吸引します。
4.一時的に水を脱気済み有機溶媒に置き換え、個々の溶離液ラインをパージします。その後、脱気水に戻します。
不適切な基準波長の選択（DAD）サンプルによる吸収は基準波長のレンジで生じてはいけません。可能であれば、基準波長を使用しないメソッドを利用します。
混合が不十分周期的な波状のノイズになります。影響の大きさには、溶離液、検出器の種類、検出器のレイアウトが関係します。メーカーの推奨にしたがって混合量を増やします。
不適切な接地HPLCシステム全体が同じ回路に接続されている必要があります。強電流の流れる消費者装置から電気回路を隔離するか、絶縁トランスを使用して電流変動をフィルタリングします。
溶媒の吸収移動相の劣化を、特に水性バッファーについて確認します。DADの利用時、トラブルシューティング中は基準波長をオフにします。新鮮な移動相を準備します。
光学コンポーネントの取り付け不備ランプとフローセルが適切に配置されているか確認します。
移動相の劣化新鮮な移動相を準備し、それを用いてシステムをフラッシュします。必要に応じて、カラムをバックフラッシュします（背圧の増加）。
非周期的、高ノイズ
考えられる原因解決方法
移動相の品質移動相には必ずHPLCグレード以上の品質を使用し、特に2 µm未満の粒子カラムおよび蒸発検出器（荷電化粒子検出器、CADなど）では、可能な限り粒子含有量が最少の移動相を使用します。
応答時間（時定数）の設定が過剰に短い → ノイズ増加応答時間が適切なことを確認します。典型的な応答時間の選択としては、最小幅ピークの半値高でのピーク幅の1/4程度にします。詳細は、取扱説明書にしたがってください。
光学帯域幅設定（UV検出器）が過剰に狭い低めの光帯域幅設定を使用して、最適な光学分解能が得られるようにします。帯域幅設定を高めて、最適な信号対ノイズ比が得られるようにします。詳細は、検出器の取扱説明書を参照してください。
不揮発性の移動相（荷電化粒子検出）荷電化粒子検出の利用時は、必ず揮発性の緩衝剤と添加剤を使用するようにします。テクニカルノートをご覧ください。
ネブライザー（荷電化粒子検出）ネブライザーチャンバーの清掃が必要な場合があります。カラムを取り外します。荷電化粒子検出器のフラッシュを、80/20の水：メタノールを用いて2.0 mL/minで数時間実施します。流量を0.2～0.4 mL/minに調整して一晩実施します。元の移動相組成のノイズレベルを再確認します。
窒素ガス供給（蒸発検出器用）水蒸気や微粒子を含まない純度99%の窒素を必ず使用するようにします。必要に応じて2段フィルターを交換します。
ランプが古すぎる（光検出器）ランプの寿命と点灯回数を確認します。必要に応じてランプを交換します。ランプ交換後のノイズが大きい場合は、ランプが正しく取り付けられているかを確認します。
高いベースラインドリフト
考えられる原因解決方法
検出器ランプ／光学系の温度が不安定検出器がウォームアップされるまで待機します。光学系の設計によっては30分から数時間かかることがあります。詳細は、検出器の取扱説明書を参照してください。
移動相が不均質1日以上のアイドル時間を設けた後、溶離液ボトルをゆっくり回転させ、リザーバー内にある溶離液を均質化させます。
カラムの汚染強力な溶離液でカラムをフラッシュします。可能な場合は、カラムを逆方向にしてみます（カラム仕様を要確認）。
非周期的、高ノイズで説明した原因（荷電化粒子検出）非周期的、高ノイズな荷電化粒子検出で説明した解決方法
グラジエントオペレーション（荷電化粒子検出）グラジエントなベースラインの影響を最小限に抑えるため、適切な品質の移動相を使用します。可能な限りグラジエントの緩いメソッドを使用します。逆グラジエントを使用します。テクニカルノートをご覧ください。 
新しい検出ランプ数時間待機して、ランプ光の強度を安定させます。
周囲条件が不安定ラボの室温と湿度を一定にします。Chromeleonクロマトグラフィーデータシステムソフトウェアを用いて、検出器温度チャンネルで温度変動を記録します。ランプとフローセルのカバーが適切な位置にあること、フロントパネルドアが閉まっていることを確認します。
汚染されたフローセルフローセルをクリーニングします（推奨手順については取扱説明書を参照）。必要に応じてフローセルを交換します。
カラムの平衡到達が遅い
考えられる原因解決方法
イオンペアリングアプリケーションこれは正常です。イオンペアリングアプリケーションでは、常に長い初期平衡化時間が必要です。イオンペアリング試薬のアルキル鎖の長さが短いと、鎖が長い場合より平衡は起こりにくくなります。
スパイク
考えられる原因解決方法
フローセルの流路系内の空気気泡は通常、ランダムに生じます。識別の手順：
1.異なる波長でも同様のスパイク高が観察される。
または
2.フローセルに軽度の背圧をかける（スパイクが消失）。
解決方法：接続が確実に行われていることを確認します。移動相の脱気を行い、背圧レギュレータをフローセル後で使用します（フローセルの仕様に応じて100 psiなど）。
ドレナージスパイク（荷電化粒子検出、CAD）廃棄ボトルおよびドレイン／ベントアセンブリでの漏洩を確認します。ドレインライン中に内部チューブがあることを確認します。
ネブライザー（荷電化粒子検出）ネブライザーチャンバーの清掃が必要な場合があります。カラムを取り外します。荷電化粒子検出器のフラッシュを、80/20の水：メタノールを用いて2.0 mL/minで数時間実施します。流量を0.2～0.4 mL/minに調整して一晩実施します。元の移動相組成のノイズレベルを再確認します。
カラム温度が移動相の沸点を過剰に超過背圧レギュレータをフローセル後で使用します（フローセルの仕様に応じて100 psiなど）。可能であればポストカラムクーラーを使用します。フローセルの加熱をオフにすることを検討してみます（FLD）。
接地（荷電化粒子検出）荷電化粒子検出器がLCシステムと同じ回路で動作していること、サージプロテクターに接続されていることを確認します。
カラム保存時のキャップの不使用カラムは強力な移動相でフラッシュし、通常は（RP相）バッファーフリーの高有機液体中で適切に保管します。
電気干渉最初に、前述したスパイクの原因を排除します。スパイクは通常、ランダムに生じるものではなく、たとえば周期的に強力な電力を消費する機器などとの関連があります。またスパイクはごく単純に、電力送電網の電流変動によって引き起こされる可能性もあります。解決方法：強電流の流れる消費者装置から電気回路を隔離するか、UPS（無停電電源装置）を使用して電流変動をフィルタリングします。

 
 
 
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