3 次元皮膚組織モデル

人工的に増殖させたアニマルフリーの皮膚モデルは、さまざまな条件が上皮組織に及ぼす影響についてシミュレートする重要なツールです。そうしたモデルを効果的に培養するには、研究者は、ケラチノサイトをさまざまな上皮各層へ分化をうまく誘導しなければならず、細胞の増殖と分化のサポートに用いるだけでなく空気もに直接曝露させる必要があります。

関連するアプリケーションおよび試験プロトコル:

  • アニマルフリーの皮膚細胞に関する試験
  • 化粧品に関する試験
  • 皮膚毒性評価
  • スキンケア製品に関する試験
  • ヒト皮膚細胞の増殖
  • In vitro 3 次元上皮組織培養
  • 小規模での 3 次元皮膚増殖
  • ヒト上皮ケラチノサイト
  • 気相液相界面での組織増殖
  • ヒト上皮再構築モデリング

3 次元皮膚上皮組織モデルの培養に高い効果を発揮し、時間を節約する方法を見つける

Thermo Scientific Nunc セルカルチャーインサートシステムは、スキンケア製品に関する試験から化合物や製剤の臨床スクリーニングまで、多数のアプリケーションに用いられる 3 次元上皮モデルの培養に、信頼性の高い、効果的かつ効率的なソリューションを提供します。

3 次元皮膚組織モデルの増殖用システムに含まれるのは、次のとおりです。

  • 24 ウェル細胞培養用処理プレート、孔径4 μm のポリカーボネート製メンブレンインサートセット済み
  • 独自の24 ウェルキャリアプレートは3 段階の吊り下げ式高さ調整を可能にし、必要とされる液気界面培養およびさまざまなフィーディングのプロトコルに対応するようデザインされています。
     
皮膚組織培養用キャリアプレート

皮膚組織培養の仕組みはどうなっているのか?

Nunc セルカルチャーインサートシステムは、3 次元皮膚上皮組織の培養に効果的な方法を提供します。Thermo Scientific Nunc キャリアプレートは高さを調整できますので、実験プロトコルを簡素化し、フィーディング間隔の延長、培養プロセスにおける時間と労力の節約を実現します。

細胞の接着および拡大に関する初期の実験では、Nunc セルカルチャーインサートは、ヒト上皮ケラチノサイトの優れた増殖環境であることを示しています。

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アプリケーションノートのハイライト:

下記画像では、ヘマトキシリン&エオジン(H&E)染色により、Nunc セルカルチャーインサートシステムを用いて培養された上皮モデルの層化を示しています。

培養された上皮モデルの層化

細胞生存率アッセイMTT assay after two weeks of air-liquid interface culture of Human Epidermal Keratinocyte (HEKa) showed good viability in Nunc Cell Culture Inserts.
皮膚組織の完全性評価Assessment of the integrity using transepithelial electrical resistance (TEER) measurement after initial seeding of the HEKa cells in the 24-well inserts.

キャリアプレートに設置したセルカルチャーインサートのイメージ(3 段階の設置位置で表示)

図示した寸法は、ウェルの内底からセルカルチャーインサートの培養表面までの高さを表します。図中の寸法は、約 0.1 mm 単位になっています。

Cell-Culture-Plate-Carrier-Diagram-740x250

倍率 400 倍で撮影した組織切片

キャリアプレートの汎用性を利用して、さまざまな培地交換間隔(2 日ごと、3 日ごと、4 日ごと)で、さまざまなインサート設置位置とそれに対応する培地量の増加をテストしました。3 段階の設置高さでウェルにインサートを吊り下げたキャリアプレートにおいて、さまざまな間隔での培地交換による気液界面培養から 12 日後層化皮膚モデル組織について、下図に H&E 染色結果を示します。培地交換間隔が長く設置位置が高い場合の作業は、培地交換間隔が短く設置位置が低い場合と同程度の効果で働き、皮膚組織構築の時間と労力の節約となります。

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A)低い設置位置:培地 0.5 mL/ウェル、2 日ごとに交換。

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B)中間の設置位置:培地 1.0 mL/ウェル、3 日ごとに交換。

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C)高い設置位置:培地 1.5 mL/ウェル、4 日ごとに交換。


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  • セルカルチャーインサートを用いた気液界面培養における人工皮膚モデル構築
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For Research Use Only. Not for use in diagnostic procedures.