Automated iBind Western Systems

シンプルな技術でウエスタンの抗体反応を自動化

Invitrogen™ iBind™ Western System は、シェイカーやトレイなどは不要で、ウエスタン解析のブロッキングから2次抗体反応後の洗浄までのプロセスを自動化するシステムです。セットアップはわずか数分で完了し、あとは装置が処理します。Sequential lateral flow (SLF)法によって、ハンズフリーによる自動化プロセスを実現し、マニュアル法よりも感度および再現性に優れたデータが得られます。従来、一晩かけていた抗体反応を約2.5時間に短縮し、さらに一次抗体の使用量の削減が可能です。様々な用途や反応条件に対応するフォーマットを提供し、化学発光や蛍光ウエスタンブロッティングのプロトコルに対応し、お客様がご利用しているHRP、APまたは蛍光色素の一次抗体、または二次抗体はそのまま使用できます。

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iBind Western Systemで何ができるの?

iBind Western Systemは、ウエスタン解析のブロッキングから2次抗体反応後の洗浄までのプロセスを自動化する小型ベンチトップシステムです。iBind Western Systemは、特殊なガラス繊維で発生させた機械的圧力を利用し、プロセスを自動化するSequential lateral flow(SLF)法を生みだします。

シームレスなワークフロー

iBind Western Systemは、最初の手順ですべての溶液を調製し、装置にロードすると、その後は、シンプルな毛細管現象によるSequential lateral flow(SLF)技術によって、すべてのステップが自動的かつ連続的に実行されます。このプロセスには、電源やバッテリーは不要です。

iBind Western Systems vs Traditional Western blot detection

iBind Western SystemとiBind Flex Western System

iBind Western Systemは、一度に、1個のMini blotに対応します。iBind Flex Western Systemは、同時に最大2個のMini blot、1個のMidi blot、または最大6個のメンブレンストリップに対応します。セットアップは、溶解液を充填するだけで、約15分で完了します。追加のハンズオンステップはありません。

 iBind Western DeviceiBind Flex Western Device
 Invitrogen iBind Western DeviceInvitrogen iBind Flex Western Device
Mini blot(1個)YesYes
Mini blot(2個)NoYes
Midi blotブロットNoYes
メンブレンストリップNoYes

柔軟なフォーマット

iBind Flexシステムには交換可能なウェルが付属しているため、複数のメンブレンフォーマットを実行したり、同じ装置で異なる一次および二次抗体条件を同時に実行することもできます。

Invitrogen iBind Flex Midi well

Midi blot

同一の抗体条件のみ

Invitrogen iBind Flex Mini well

Mini blot

同一または異なる抗体条件が可能

Invitrogen iBind Flex Strip well

Vertically cut strip

同一または異なる抗体条件が可能

Sequential lateral flow technology explained

Learn how the application of sequential lateral flow technology allows automated western blot processing with the iBind Western System.

How to use iBind Western Systems

Learn how to process midi, mini or strip blots using the iBind Flex and process mini blots using the iBind with this detailed step by step video.

マニュアルブロッティングを超えた、ウェスタンブロッティングの卓越した性能

  • マニュアル処理により、CV値が通常5%未満に抑えられ、ブロット間の一貫性が向上します(マニュアル処理では、CV値が13%に達することがあります)。
  • iBind™ Systemは、様々なモノクローナル抗体やポリクローナル抗体において、マニュアル処理法よりも高感度が得られます
  • iBind™ Western Systemで高特異的な一次抗体や二次抗体を使用すれば、より高純度のウェスタンブロッティングが実現します。

一次抗体の使用量を減らし、再現性の高い確実な結果を取得

ウェスタンブロッティング解析で重要となる試薬の1つ、一次抗体は、一般的にウェスタンブロッティング解析の総コストの中で大きな割合を占めます。iBind Western Systemsは、マニュアル処理よりも高い感度でデータが得られるので、一次抗体の使用量を最大80%減らしても、同等の結果を得ることが可能です。

Invitrogen iBind Western Systemは、従来のマニュアル処理法よりも一次抗体の使用量を約80%減らすことが可能です。

化学発光または蛍光ベースの検出法の場合、一次抗体の使用量を最大80%低減しコストを大幅に削減
A 2-fold dilution series of EGF receptor control cell lysate (30 µg, 15 µg, 7.5 µg, 3.75 µg, and 1.875 µg) was used.Proteins were separated using Bolt Bis-Tris Plus gels on the Mini Gel Tank and transferred to PVDF membranes using the iBlot 2 Dry Blotting System.The blots were probed with an anti–phospho-EGF receptor [Tyr1068] (1H12) mouse monoclonal antibody (1:1,000 dilution, equated to 2 µL antibody for the iBind device method and 10 µL antibody for the manual method) followed by a goat anti–mouse IgG (H+L) peroxidase-conjugated antibody (1:360 for iBind device processing (5.55 µL); 1:1,800 for manual method (5.55 µL)).The standard iBind solution kit was used for the chemiluminescence blot (panel C, manual processing and panel D, iBind system processing); the fluorescence detection (panel A, manual processing and panel B, iBind processing) kit was used for fluorescence detection.These results demonstrate that western blots processed on the iBind device show comparable results to those obtained when western blots are processed manually, with lower overall primary antibody requirements for the iBind device.

Midi blot 、Mini blot、Vertically cut stripの比較

マニュアル処理とiBind Flex Western Systemで処理したMidi blotの比較。

マニュアル処理とiBind Flex Western Systemで処理したMidi blotの比較。
Samples containing GST-tagged recombinant proteins were separated and then transferred to nitrocellulose membranes using the Invitrogen iBlot 2 Dry Blotting System.Blots were probed with identical concentrations of the same pair of primary and secondary antibodies.The primary antibody was rabbit anti-GST diluted 1:500 (8 µL in 4 mL iBind Flex Solution for the iBind system, 40 µL in 20 mL for manual tray incubation).The secondary antibody was goat anti-rabbit HRP diluted 1:600 (6.7 µL in 4 mL iBind Flex Solution for the iBind system, 33.3 µL in 20 mL for manual tray incubation).For final detection, blots were incubated for 5 minutes in Thermo Scientific SuperSignal West Dura Substrate for visualization with an imaging system.

マニュアル処理とiBind Flex Western Systemで処理したMini blotの比較。

マニュアル処理とiBind Flex Western Systemで処理したMini blotの比較。
Blots were produced by separating samples and then transferred to nitrocellulose membranes using the iBlot 2 Dry Blotting System.Each gel contained 10 lanes loaded with two-fold dilution series of 293 cell extracts (30 µg to 0.06 µg).After immunodetection using the conditions described below, blots were incubated for 5 minutes in Thermo Scientific SuperSignal West Dura Substrate and the signal documented with an imager.

  • MEK2 (45 kDa) – rabbit anti-MEK2 antibody applied at 1:1000 for iBind blot processing (= 2 µL in 2 mL of iBind Solution), and 1:1000 for manual blot processing (= 10 µL in 10 mL buffer).
  • Securin(428 kDa) – rabbit anti-Securin antibody applied at 1:1000 for iBind blot processing (= 2 µL in 2 mL of iBind Solution), and 1:1000 for manual blot processing (= 10 µL in 10 mL buffer).
  • Secondary Antibody (both targets): goat anti-rabbit IgG at 1:600 for iBind blot processing (3.33 µL in 2 mL of iBind Solution), and at 1:1800 for manual blot processing (5.55 µL in 10 mL).
iBind Flex processed strip western blots

マニュアル処理とiBind Flex Western Systemで処理したVertically cut stripの比較。一度に6種類の抗体を組み合わせて、最大6つのストリップ使用して処理が可能です。
Process up to 6 strips with 6 different antibodies combinations at a single time.Blots were produced by separating samples and transferring to nitrocellulose membranes using the iBlot 2 Dry Blotting System.

すぐに実験を開始できるスターターキット

スターターキットには、iBind Western Systemを使用して、ウェスタン解析のブロッキングから2次抗体反応後の洗浄までのプロセスを自動化するのに必要なものすべてが含まれています。

iBind Western Device Starter kits

iBind Flex Western Device Starter kits

iBind Western Systemで何ができるの?

iBind Western Systemは、ウエスタン解析のブロッキングから2次抗体反応後の洗浄までのプロセスを自動化する小型ベンチトップシステムです。iBind Western Systemは、特殊なガラス繊維で発生させた機械的圧力を利用し、プロセスを自動化するSequential lateral flow(SLF)法を生みだします。

シームレスなワークフロー

iBind Western Systemは、最初の手順ですべての溶液を調製し、装置にロードすると、その後は、シンプルな毛細管現象によるSequential lateral flow(SLF)技術によって、すべてのステップが自動的かつ連続的に実行されます。このプロセスには、電源やバッテリーは不要です。

iBind Western Systems vs Traditional Western blot detection

iBind Western SystemとiBind Flex Western System

iBind Western Systemは、一度に、1個のMini blotに対応します。iBind Flex Western Systemは、同時に最大2個のMini blot、1個のMidi blot、または最大6個のメンブレンストリップに対応します。セットアップは、溶解液を充填するだけで、約15分で完了します。追加のハンズオンステップはありません。

 iBind Western DeviceiBind Flex Western Device
 Invitrogen iBind Western DeviceInvitrogen iBind Flex Western Device
Mini blot(1個)YesYes
Mini blot(2個)NoYes
Midi blotブロットNoYes
メンブレンストリップNoYes

柔軟なフォーマット

iBind Flexシステムには交換可能なウェルが付属しているため、複数のメンブレンフォーマットを実行したり、同じ装置で異なる一次および二次抗体条件を同時に実行することもできます。

Invitrogen iBind Flex Midi well

Midi blot

同一の抗体条件のみ

Invitrogen iBind Flex Mini well

Mini blot

同一または異なる抗体条件が可能

Invitrogen iBind Flex Strip well

Vertically cut strip

同一または異なる抗体条件が可能

Sequential lateral flow technology explained

Learn how the application of sequential lateral flow technology allows automated western blot processing with the iBind Western System.

How to use iBind Western Systems

Learn how to process midi, mini or strip blots using the iBind Flex and process mini blots using the iBind with this detailed step by step video.

マニュアルブロッティングを超えた、ウェスタンブロッティングの卓越した性能

  • マニュアル処理により、CV値が通常5%未満に抑えられ、ブロット間の一貫性が向上します(マニュアル処理では、CV値が13%に達することがあります)。
  • iBind™ Systemは、様々なモノクローナル抗体やポリクローナル抗体において、マニュアル処理法よりも高感度が得られます
  • iBind™ Western Systemで高特異的な一次抗体や二次抗体を使用すれば、より高純度のウェスタンブロッティングが実現します。

一次抗体の使用量を減らし、再現性の高い確実な結果を取得

ウェスタンブロッティング解析で重要となる試薬の1つ、一次抗体は、一般的にウェスタンブロッティング解析の総コストの中で大きな割合を占めます。iBind Western Systemsは、マニュアル処理よりも高い感度でデータが得られるので、一次抗体の使用量を最大80%減らしても、同等の結果を得ることが可能です。

Invitrogen iBind Western Systemは、従来のマニュアル処理法よりも一次抗体の使用量を約80%減らすことが可能です。

化学発光または蛍光ベースの検出法の場合、一次抗体の使用量を最大80%低減しコストを大幅に削減
A 2-fold dilution series of EGF receptor control cell lysate (30 µg, 15 µg, 7.5 µg, 3.75 µg, and 1.875 µg) was used.Proteins were separated using Bolt Bis-Tris Plus gels on the Mini Gel Tank and transferred to PVDF membranes using the iBlot 2 Dry Blotting System.The blots were probed with an anti–phospho-EGF receptor [Tyr1068] (1H12) mouse monoclonal antibody (1:1,000 dilution, equated to 2 µL antibody for the iBind device method and 10 µL antibody for the manual method) followed by a goat anti–mouse IgG (H+L) peroxidase-conjugated antibody (1:360 for iBind device processing (5.55 µL); 1:1,800 for manual method (5.55 µL)).The standard iBind solution kit was used for the chemiluminescence blot (panel C, manual processing and panel D, iBind system processing); the fluorescence detection (panel A, manual processing and panel B, iBind processing) kit was used for fluorescence detection.These results demonstrate that western blots processed on the iBind device show comparable results to those obtained when western blots are processed manually, with lower overall primary antibody requirements for the iBind device.

Midi blot 、Mini blot、Vertically cut stripの比較

マニュアル処理とiBind Flex Western Systemで処理したMidi blotの比較。

マニュアル処理とiBind Flex Western Systemで処理したMidi blotの比較。
Samples containing GST-tagged recombinant proteins were separated and then transferred to nitrocellulose membranes using the Invitrogen iBlot 2 Dry Blotting System.Blots were probed with identical concentrations of the same pair of primary and secondary antibodies.The primary antibody was rabbit anti-GST diluted 1:500 (8 µL in 4 mL iBind Flex Solution for the iBind system, 40 µL in 20 mL for manual tray incubation).The secondary antibody was goat anti-rabbit HRP diluted 1:600 (6.7 µL in 4 mL iBind Flex Solution for the iBind system, 33.3 µL in 20 mL for manual tray incubation).For final detection, blots were incubated for 5 minutes in Thermo Scientific SuperSignal West Dura Substrate for visualization with an imaging system.

マニュアル処理とiBind Flex Western Systemで処理したMini blotの比較。

マニュアル処理とiBind Flex Western Systemで処理したMini blotの比較。
Blots were produced by separating samples and then transferred to nitrocellulose membranes using the iBlot 2 Dry Blotting System.Each gel contained 10 lanes loaded with two-fold dilution series of 293 cell extracts (30 µg to 0.06 µg).After immunodetection using the conditions described below, blots were incubated for 5 minutes in Thermo Scientific SuperSignal West Dura Substrate and the signal documented with an imager.

  • MEK2 (45 kDa) – rabbit anti-MEK2 antibody applied at 1:1000 for iBind blot processing (= 2 µL in 2 mL of iBind Solution), and 1:1000 for manual blot processing (= 10 µL in 10 mL buffer).
  • Securin(428 kDa) – rabbit anti-Securin antibody applied at 1:1000 for iBind blot processing (= 2 µL in 2 mL of iBind Solution), and 1:1000 for manual blot processing (= 10 µL in 10 mL buffer).
  • Secondary Antibody (both targets): goat anti-rabbit IgG at 1:600 for iBind blot processing (3.33 µL in 2 mL of iBind Solution), and at 1:1800 for manual blot processing (5.55 µL in 10 mL).
iBind Flex processed strip western blots

マニュアル処理とiBind Flex Western Systemで処理したVertically cut stripの比較。一度に6種類の抗体を組み合わせて、最大6つのストリップ使用して処理が可能です。
Process up to 6 strips with 6 different antibodies combinations at a single time.Blots were produced by separating samples and transferring to nitrocellulose membranes using the iBlot 2 Dry Blotting System.

すぐに実験を開始できるスターターキット

スターターキットには、iBind Western Systemを使用して、ウェスタン解析のブロッキングから2次抗体反応後の洗浄までのプロセスを自動化するのに必要なものすべてが含まれています。

iBind Western Device Starter kits

iBind Flex Western Device Starter kits


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iBind Western Device saves time and is consistent

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Resources

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