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MSC用FBS
FBS はヒト間葉系幹細胞の培養に必要な主要コンポーネントです。 しかしFBSには、 シグナリング分子や、アポトーシス因子や、栄養素のような未知の要素が数多くあります。 これらの成分濃度によって、ロット間差を引き起こす場合があります。このことは一部の FBSロットがMSC培養に適さないことを意味します。
その理由のため、大規模で時間がかかるプレテストが必要とされます。 弊社の間葉系幹細胞 - Qualified Fetal Bovine Serum を使用すれば、MSC研究に最適なものを特定するためのロットチェックをする必要がありません。
 | クローン効率 個々の間葉系幹細胞が培地でコロニーを形成する能力 （クローン効率) は、間葉系幹細胞研究において非常に重要であり、媒体で使われるウシ胎児血清の選択にかなり依存していることが分かっています。 クローン効率はCFU-f（線維芽細胞コロニー形成単位）アッセイを使用して測定されます。これによって形成されたコロニーの数と播種された最初の細胞数との比率がわかります。 図 1 は、他社の製品との比較によって Invitrogenの間葉系幹細胞用FBSを使用して取得したクローン効率がいかに優れているかがわかります。 |
図 1 - 間葉系幹細胞のクローン効率におけるFBSの影響。 (P <0.05; Sudent's t-test)。
 | 増殖。 培養増殖したMSCは細胞分化、遺伝子発現、細胞シグナル伝達、組織の再モデリング、および再生医工学を含むさまざまな研究用途で使用されます。 また、再生医療分野の有望な細胞療法で使用できるかどうかが調査されています。 より高い密度に、またはより速い速度で培養が増殖できれば、研究と治療にかかるコストが大幅に削減できます。 Invitrogenの間葉系幹細胞用FBSによって、 MSC増殖特性が著しく改良されます (図 2)。 |
Figure 2 - Effect of FBS source on MSC expansion. (P <0.05; Sudent's t-test)。
分化. 間葉系幹細胞は、さまざまな分化細胞に分化でき、多分化能を有し、自己再生もする中胚葉起源の細胞です。 従来から、間葉系幹細胞は、骨、軟骨、脂肪組織の3つの系統へ分化する能力があることが知られていました。 Invitrogenの間葉系幹細胞用FBSを使用して培養すると、間葉系幹細胞は、骨 (図 3)、 軟骨細胞 (図 4)、脂肪細胞 (図 5) に分化する能力を維持していることが分かりました。
 | Figure 3 - Histological staining of osteogenic cultures growth in MSC-Qualified FBS. A. Plates were stained for alkaline phosphatase on day 14 using commercially available kits. B. Plates were stained with Alizarin Red S on day 25 using standard staining techniques. |
 | Figure 4 - Histological staining of chondrogenic cultures growth in MSC-Qualified FBS. Chondrogenic differentiation medium supplemented with 10 ng/ml TGF β1, 50 nM ascorbic acid-2-phosphate, and 6.25 μg/ml insulin or control medium was then gently overlaid onto the cells and the plates were incubated for two weeks with re-feeding twice per week. ペレット様構築物はアルシアンブルーで染色された。 Figure 5 - Histological staining of adipogenic cultures growth in MSC-Qualified FBS. 脂質組織形成誘導において、培地には0.5mMのイソブチル-メチルキサンチン、1 μMのデキサメサゾン、10mMのインシュリン、および200μMのインドメタシンを添加した。 1週間につき、2回、完全に培地を交換して栄養分を補充した。 第7日目に、培養した細胞を固定し、標準方法を用いて、Oil Red Oで染色した。 |
| クローン効率 個々の間葉系幹細胞が培地でコロニーを形成する能力 （クローン効率) は、間葉系幹細胞研究において非常に重要であり、媒体で使われるウシ胎児血清の選択にかなり依存していることが分かっています。 クローン効率はCFU-f（線維芽細胞コロニー形成単位）アッセイを使用して測定されます。これによって形成されたコロニーの数と播種された最初の細胞数との比率がわかります。 図 1 は、他社の製品との比較によって Invitrogenの間葉系幹細胞用FBSを使用して取得したクローン効率がいかに優れているかがわかります。 |
図 1 - 間葉系幹細胞のクローン効率におけるFBSの影響。 (P <0.05; Sudent's t-test)。
| 増殖。 培養増殖したMSCは細胞分化、遺伝子発現、細胞シグナル伝達、組織の再モデリング、および再生医工学を含むさまざまな研究用途で使用されます。 また、再生医療分野の有望な細胞療法で使用できるかどうかが調査されています。 より高い密度に、またはより速い速度で培養が増殖できれば、研究と治療にかかるコストが大幅に削減できます。 Invitrogenの間葉系幹細胞用FBSによって、 MSC増殖特性が著しく改良されます (図 2)。 |
Figure 2 - Effect of FBS source on MSC expansion. (P <0.05; Sudent's t-test)。
分化. 間葉系幹細胞は、さまざまな分化細胞に分化でき、多分化能を有し、自己再生もする中胚葉起源の細胞です。 従来から、間葉系幹細胞は、骨、軟骨、脂肪組織の3つの系統へ分化する能力があることが知られていました。 Invitrogenの間葉系幹細胞用FBSを使用して培養すると、間葉系幹細胞は、骨 (図 3)、 軟骨細胞 (図 4)、脂肪細胞 (図 5) に分化する能力を維持していることが分かりました。
| Figure 3 - Histological staining of osteogenic cultures growth in MSC-Qualified FBS. A. Plates were stained for alkaline phosphatase on day 14 using commercially available kits. B. Plates were stained with Alizarin Red S on day 25 using standard staining techniques. |
| Figure 4 - Histological staining of chondrogenic cultures growth in MSC-Qualified FBS. Chondrogenic differentiation medium supplemented with 10 ng/ml TGF β1, 50 nM ascorbic acid-2-phosphate, and 6.25 μg/ml insulin or control medium was then gently overlaid onto the cells and the plates were incubated for two weeks with re-feeding twice per week. ペレット様構築物はアルシアンブルーで染色された。 Figure 5 - Histological staining of adipogenic cultures growth in MSC-Qualified FBS. 脂質組織形成誘導において、培地には0.5mMのイソブチル-メチルキサンチン、1 μMのデキサメサゾン、10mMのインシュリン、および200μMのインドメタシンを添加した。 1週間につき、2回、完全に培地を交換して栄養分を補充した。 第7日目に、培養した細胞を固定し、標準方法を用いて、Oil Red Oで染色した。 |
