HILIC은 극성 고정상(polar stationary phase)을 사용하여 수행되는 역상 크로마토그래피의 변형된 형태입니다. 사용되는 이동상은 낮은 비율의 수성 용매(aqueous solvent)/완충액 또는 다른 극성 용매를 함유하는 높은 유기성(> 60-70% 용매, 일반적으로 아세토니트릴)을 나타냅니다. 이동상에 존재하는 물은 고정상의 극성 표면에 흡착되어 풍부한 수성층(aqueous-rich layer)을 형성하여 여기에 분석물질(analyte)이 분배됩니다.

분리 기법으로서 HILIC의 주요 이점은 이동상에 이온쌍 첨가제를 넣지 않고도 기존의 역상 조건에서는 유지되지 않는 극성 및 친수성 화합물을 강력하게 머무르게 한다는 것입니다.

고정상(Stationary Phases)

특정 컬럼-용매-분석물질(analyte) 시스템에서 가능한 HILIC 머무름 메커니즘을 이해하는 것은 올바른 HILIC 고정상을 선택하는 과정에서 매우 중요하며, 이는 성공적인 애플리케이션으로 이어집니다.

머무름(retention) 메커니즘

HILIC의 머무름 메커니즘은 친수성 분배(hydrophilic partitioning), 수소 결합, 정전기 상호작용 및 반데르발스(van der Waals) 상호작용이 조합되어 복합적입니다.

HILIC의 장점

HILIC은 역상 액체 크로마토그래피(RPLC)로 유지하기 어려운 친수성 화합물의 유지를 가능하게 합니다. 고수분 조건에서 극성이 매우 강한 화합물에 대해 RPLC 보다 우수한 분리 효율을 얻을 수 있습니다.

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